COO(三)化学性质H,N-C—HR1. α-氨基参加的反应2.α-羧基参加的反应3.α-氨基与α-羧基共同参加的反应4.侧链参加的反应
1. α-氨基参加的反应 2. α-羧基参加的反应 3. α-氨基与α-羧基共同参加的反应 4. 侧链参加的反应 （三）化学性质
COO1.α-氨氢基参加的反应H,NC—H(1）与亚硝酸反应R(2) 与甲醛的反应(3)与2,4-二硝基氟苯（2,4-DNFB）反应（Sanger反应）（PITC）反应（Edman反应）(4) 与异硫氰酸苯酯(5)与荧光胺反应(6)形成Schiff碱(7)脱氨基反应
(1) 与亚硝酸反应 (2) 与甲醛的反应 (3) 与2,4-二硝基氟苯（2,4-DNFB）反应（Sanger反应） (4) 与异硫氰酸苯酯（PITC）反应（Edman反应） (5) 与荧光胺反应 (6) 形成Schiff碱 (7) 脱氨基反应 1.α-氨基参加的反应：
（1）与亚硝酸反应：+ H,0R—CH-COOH + HNO2→ R—CH-COOH + N21OHNH2>伯胺与亚硝酸反应放出氮气>通过测定氮气的体积可计算氨基酸的含量，>此法称为范斯莱克法
(1) 与亚硝酸反应： Ø 伯胺与亚硝酸反应放出氮气； Ø 通过测定氮气的体积可计算氨基酸的含量； Ø 此法称为范斯莱克法
(2）与甲醛的反应：14BCOoCOO-12pK2= 9.60pKa210CH2CH,+H*I+8pHNH,NH2无甲醛6pK2~7HCHOA加有甲醛4CCOOCOO2pKa2= 2.34HCHO0CH2CH00.10.050.050.1NHCH,OHN(CH,OH)加入的Hmol数加入的OH-mol数7氨基酸与甲醛反应使氨基的pK,下降2-3个pH单位可用酚酰作指示剂，NaOH滴定测定游离氨基的含量；>此法主要是无合适的指示剂；>此法用来判断蛋白质水解和合成的程度
(2) 与甲醛的反应： Ø 氨基酸与甲醛反应使氨基的pKa下降2-3个pH单位， Ø 可用酚酞作指示剂，NaOH滴定测定游离氨基的含量； Ø 此法主要是无合适的指示剂； Ø 此法用来判断蛋白质水解和合成的程度
(3) 的反应与2,4-二硝基氟苯(2,4-DNFB)(Sanger反应）弱碱性+ HFNO2NO2RCHNHFRCHNH,+COOHCOOHONNO2DNP-氨基酸（黄色）DNFB>氨基酸的氨基与DNFB反应生成DNP-氨基酸>DNP-氨基酸极性变小，呈黄色，可通过与标准品比对鉴定>DNFB与多肽链N端氨基酸的氨基反应生成DNP-蛋白质>此法被Sanger鉴定多肽或蛋白质的N端氨基酸种类和数目
(3) 与2,4-二硝基氟苯（2,4-DNFB）的反应 （Sanger反应）： Ø氨基酸的氨基与DNFB反应生成DNP-氨基酸； ØDNP-氨基酸极性变小，呈黄色，可通过与标准品比对鉴定； ØDNFB与多肽链N端氨基酸的氨基反应生成DNP-蛋白质； Ø此法被Sanger鉴定多肽或蛋白质的N端氨基酸种类和数目。 （黄色）
H,CCH3H,CCH3H,NCHCOOH+R40℃pH9.700=0HN-CHCOOHCIR5-二甲基蔡黄酰氯（DNS一C1)DNS一氨基酸>DNS-CI(丹磺酰氯)可代替DNFB>氨基酸的氨基与DNS-CI(丹磺酰氯)反应生成DNS-氨基酸>DNS-氨基酸有强烈荧光，可用荧光光度计检出；>此法用来鉴定多肽或蛋白质的N端氨基酸种类和数目。>灵敏度比DNFB法高100倍，比Edman法高几到十几倍
ØDNS-Cl (丹磺酰氯)可代替DNFB; Ø氨基酸的氨基与DNS-Cl (丹磺酰氯)反应生成DNS-氨基酸； ØDNS-氨基酸有强烈荧光，可用荧光光度计检出； Ø此法用来鉴定多肽或蛋白质的N端氨基酸种类和数目。 Ø灵敏度比DNFB法高100倍，比Edman法高几到十几倍
4)与异硫氰酸苯酯（PITC)反应（Edman反应）R>PITC与氨基酸的氨基反XCOOHHH应生成PTH-氨基酸PITC>PITC与多肽链N端氨基pH8.3酸的氨基反应生成PTHRH氨基酸和少一个氨基酸HNCOOHPTC-氨基酸H的多肽;>此法为Edman于20世纪50年代创立，称为无水HFEdman降解法，用于氨基酸序列测定PTH-氨基酸-HRH
(4) 与异硫氰酸苯酯(PITC)反应(Edman反应) ØPITC与氨基酸的氨基反 应生成PTH-氨基酸； ØPITC与多肽链N端氨基 酸的氨基反应生成PTH- 氨基酸和少一个氨基酸 的多肽； Ø此法为Edman于20世纪 5 0 年 代 创 立 ， 称 为 Edman降解法，用于氨 基酸序列测定
(5)与荧光胺反应RNH2-N-CH-COOHHO+R-C-COOHH0荧光胺荧光产物>检测灵敏度：ng水平>激发波长：390nm，发射波长475nm>可以用荧光分光光度计进行定量检测
(5)与荧光胺反应 Ø 检测灵敏度：ng水平 Ø 激发波长：390nm，发射波长475nm Ø 可以用荧光分光光度计进行定量检测
（6）形成Schiff碱R0RH-C-NH3+R-C-HH-C-N=C-R'+HCOO-HCOO-H,OAminoacidSchiffbase>转氨基反应的中间步骤
(6) 形成Schiff碱 Ø 转氨基反应的中间步骤
(7）脱氨基反应RRRR转氨酶C=0C=0HC一NHHCNH++COOHCOOHCOOHCOOH氨基酸分解代谢的重要中间步骤
(7) 脱氨基反应 Ø 氨基酸分解代谢的重要中间步骤