寄生虫标本的固定与保存 对于所获得的寄生虫，需研究或送有关单位鉴定时，必须固定保存。固定是将虫体杀 死，使其在短时间内迅速死亡，保持虫体原有的形态、构造。所以获得标本后应尽快固定， 然后选择适当的保存方法，才能长期保存。此外还须写清标本的采集地点、宿主、寄生部位 采集日期及采集人、固定液等。 一、原虫包囊及塌虫卵的固定与保存 用水洗沉淀法将包囊或虫卵浓集，尽量倾去上清液，用10%的福尔马林溶液（至少与 粪便沉渣等量)加热至70~80℃，立即倾入粪便沉渣中，摇匀，用石蜡封周瓶口，可长期 保存。也可用汞碘酪液10ml与粪便1g混匀后密封在瓶内，可保存其中的原虫包囊和滋养 体及虫卵数月之久。 二、蝙虫成虫的固定与保存 1、线虫 生理盐水洗净虫体粘附的污物，然后用加热至70~80℃的70%酒精或巴氏液（甲醛3 份、生理盐水97份)固定，冷却后移至新的70%酒精或巴氏液中保存。小型线虫（旋毛虫、 蛲虫、钩虫等)宜用甘油酒精(70%酒精95ml、甘油5ml)加热固定，保存于80%酒精中 也可用冰醋酸固定约半小时后移入0%酒精或甘油酒精中保存。 2、吸虫 小型吸虫可置于小瓶中，加生理盐水，用力摇荡数分钟，倒去生理盐水，注入周定液。 较大的吸虫应先放在薄荷脑酒精液（薄荷脑24g、95%酒精10m)中，使虫体肌肉松驰，用 载玻片压平后固定，或将洗净后的吸虫放在两片载玻片间用细线紧扎压平后固定。一般用 10%福尔马林固定，24h后移至5%福尔马林中保存，也可用70%酒精固定0.5~3h,视虫体 大小而定，再移至新的70%酒精中保存。 3、缘虫 大型缘虫如猪、牛带缘虫，可将虫体浸入自来水中8~12h,使虫体在水中充分伸展、 松驰，然后移至3%福尔马林溶液中固定，24~28h后转置5%福尔马林溶液中保存。小型缘 虫可先在生理盐水中清洗数次，然后于3%福尔马林溶液中固定3~5h,再移入5%福尔马 林溶液中保存。如需染色制片时，将虫体从上述3%福尔马林溶液中取出后置载玻片上，用
寄生虫标本的固定与保存 对于所获得的寄生虫，需研究或送有关单位鉴定时，必须固定保存。固定是将虫体杀 死，使其在短时间内迅速死亡，保持虫体原有的形态、构造。所以获得标本后应尽快固定， 然后选择适当的保存方法，才能长期保存。此外还须写清标本的采集地点、宿主、寄生部位、 采集日期及采集人、固定液等。 一、原虫包囊及蠕虫卵的固定与保存 用水洗沉淀法将包囊或虫卵浓集，尽量倾去上清液，用 10％的福尔马林溶液（至少与 粪便沉渣等量）加热至 70～80℃，立即倾入粪便沉渣中，摇匀，用石蜡封固瓶口，可长期 保存。也可用汞碘醛液 10ml 与粪便 1g 混匀后密封在瓶内，可保存其中的原虫包囊和滋养 体及虫卵数月之久。 二、蠕虫成虫的固定与保存 1、.线虫 生理盐水洗净虫体粘附的污物，然后用加热至 70～80℃的 70%酒精或巴氏液（甲醛 3 份、生理盐水 97 份）固定，冷却后移至新的 70%酒精或巴氏液中保存。小型线虫（旋毛虫、 蛲虫、钩虫等）宜用甘油酒精（70%酒精 95ml、甘油 5ml）加热固定，保存于 80%酒精中。 也可用冰醋酸固定约半小时后移入 70％酒精或甘油酒精中保存。 2、吸虫 小型吸虫可置于小瓶中，加生理盐水，用力摇荡数分钟，倒去生理盐水，注入固定液。 较大的吸虫应先放在薄荷脑酒精液（薄荷脑 24g、95%酒精 10ml）中，使虫体肌肉松驰，用 载玻片压平后固定，或将洗净后的吸虫放在两片载玻片间用细线紧扎压平后固定。一般用 10%福尔马林固定，24h 后移至 5%福尔马林中保存，也可用 70％酒精固定 0.5～3h，视虫体 大小而定，再移至新的 70％酒精中保存。 3、绦虫 大型绦虫如猪、牛带绦虫，可将虫体浸入自来水中 8～12h，使虫体在水中充分伸展、 松驰，然后移至 3%福尔马林溶液中固定，24～28h 后转置 5%福尔马林溶液中保存。小型绦 虫可先在生理盐水中清洗数次，然后于 3％福尔马林溶液中固定 3～5h，再移入 5%福尔马 林溶液中保存。如需染色制片时，将虫体从上述 3%福尔马林溶液中取出后置载玻片上，用
另一载玻片轻压，沿载玻片边缘滴加5%福尔马林溶液固定数小时，最后移至5%福尔马林 溶液中保存。 三、昆虫的保存 1、干标本的保有 系保存有翅昆虫。可用特制的昆虫针针插虫体。大型昆虫如蝇、虻等用1~3号昆虫针， 从虫体背面、中胸右侧直插。注意保存左侧完整，以便鉴定。小型昆虫如：蚊、蛉、蚋、袋 等，取00号短针插入软木片的一端，然后用这个00号短针自胸部腹面、两中足基部之间插 入，不可刺透胸背，再用另一长针从软木片的另一端插入，将针插好的昆虫插入昆虫盒的软 木板上。盒内放入纸包的樟脑粉防蛀。 2、湿标本的保存 用于保存有翅昆虫的卵和幼虫期及其无翅昆虫和蜱螨类的发有各期。活标本先经加温 70%酒(60~70℃)周定，1d后保存于甘油酒精中，也可用5%或10%福尔马林和巴氏液固 定保存。 四、原虫的低温保存 用液氮保存原虫，具有保持原虫的生物学特性且保存时间较长(1一2年)的优点。现 仅介绍疟原虫和阴道毛滴虫的低温保存方法。 1、冻存方法 (1)鼠疟原虫从感染疟原虫第3~4d的小鼠尾部（或心脏）取血，在1mm3阳性鼠 血加0.1mm的3.8%枸椽酸钠抗凝之后，按0.5一1.0ml分装入无茵安瓿（或塑料管）内，封 口（或盖严）后，放入标明日期的纱布袋中，装于液氯罐的提筒内，立即直接置液氨中保存。 (2)阴道毛滴虫用无菌拭子取阴道分泌物，放入培养基中培养48h,转种于RPM 一1640培养基中2d。取含虫培养液经1000rpm离心10min,在沉淀中加入10%DMS02ml 如上法分装及冻存。 2、复苏与观察需要时从液氨罐中取出保种小管，迅速投入37~40℃温水中，经4~5min 即溶化。将阴道毛滴虫接种于肝浸汤培养基上，37℃培养3~4后，涂片镜检活动的滋养体， 或染色观察。冻存的鼠疟原虫，经腹腔接种小鼠，每只0.2ml,接种后4~5天取鼠尾血 涂片，姬氏液染色镜检
另一载玻片轻压，沿载玻片边缘滴加 5％福尔马林溶液固定数小时，最后移至 5％福尔马林 溶液中保存。 三、昆虫的保存 1、干标本的保存 系保存有翅昆虫。可用特制的昆虫针针插虫体。大型昆虫如蝇、虻等用 1～3 号昆虫针， 从虫体背面、中胸右侧直插。注意保存左侧完整，以便鉴定。小型昆虫如：蚊、蛉、蚋、蠓 等，取 00 号短针插入软木片的一端，然后用这个 00 号短针自胸部腹面、两中足基部之间插 入，不可刺透胸背，再用另一长针从软木片的另一端插入，将针插好的昆虫插入昆虫盒的软 木板上。盒内放入纸包的樟脑粉防蛀。 2、湿标本的保存 用于保存有翅昆虫的卵和幼虫期及其无翅昆虫和蜱螨类的发育各期。活标本先经加温 70%酒（60～70℃）固定，1d 后保存于甘油酒精中，也可用 5%或 10%福尔马林和巴氏液固 定保存。 四、原虫的低温保存 用液氮保存原虫，具有保持原虫的生物学特性且保存时间较长（1～2 年）的优点。现 仅介绍疟原虫和阴道毛滴虫的低温保存方法。 1、冻存方法 （1）鼠疟原虫 从感染疟原虫第 3～4d的小鼠尾部（或心脏）取血，在 1mm3 阳性鼠 血加 0.1mm3 的 3.8%枸椽酸钠抗凝之后，按 0.5～1.0ml分装入无菌安瓿（或塑料管）内，封 口（或盖严）后，放入标明日期的纱布袋中，装于液氮罐的提筒内，立即直接置液氮中保存。 （2）阴道毛滴虫 用无菌拭子取阴道分泌物，放入培养基中培养 48h，转种于 RPMI －1640 培养基中 2d。取含虫培养液经 1000rpm 离心 10min，在沉淀中加入 10%DMSO2ml， 如上法分装及冻存。 2、复苏与观察 需要时从液氮罐中取出保种小管，迅速投入 37～40℃温水中，经 4～5min 即溶化。将阴道毛滴虫接种于肝浸汤培养基上，37℃培养 3～4d 后，涂片镜检活动的滋养体， 或染色观察。冻存的鼠疟原虫，经腹腔接种小鼠，每只 0.2ml，接种后 4～5 天取鼠尾血， 涂片，姬氏液染色镜检