安激医科大学 AL 第四章放射性标记化合物和放射性药物
安徽医科大学 第四章 放射性标记化合物和放射性药物
安激医科大学 画 一、 基本概念 重要参数 放射性浓度radioactive concentration) 放射化学纯度(radiochemical purity) 放化纯度=} 标记物的放射性活度 样品总的放射性活度 ×100% y放射性比话度specific activity) +同位素标记与非同位素标记 用同种放射性核素取代各种有机分子中的化学元素，称为 同位素标记(isotopic labelling)
安徽医科大学 放射性浓度(radioactive concentration) 重要参数 一、基本概念 放射化学纯度(radiochemical purity) 放射性比活度(specific activity) = ×100% 样品总的放射性活度 标记物的放射性活度 放化纯度 同位素标记与非同位素标记 用同种放射性核素取代各种有机分子中的化学元素， 称为 同位素标记(isotopic labelling)
安激医科大学 无法采用同位素标记的情况下，可以选用性质和原子半径相 接近的放射性核素来替代，称为非同位素标记non-isotopic labelling). 定位标记与非定位标记 定位标记(specific labelling)是指将核素标记在化 合物的指定位置上。 在化合物不同部位引入两种不同的示踪核素进行标记，称为 双标记化合物(doublelabelling compounds). 如果标记原子的结合部位无法确定，称为非定位标记口o~ specific labelling)
安徽医科大学 定位标记与非定位标记 定位标记(specific labelling)是指将核素标记在化 合物的指定位置上。 在化合物不同部位引入两种不同的示踪核素进行标记，称为 双标记化合物(double labelling compounds)。 如果标记原子的结合部位无法确定，称为非定位标记(nonspecific labelling)。 无法采用同位素标记的情况下，可以选用性质和原子半径相 接近的放射性核素来替代，称为非同位素标记(non-isotopic labelling)
安激医科大学 1是 二、放射性核素标记化合物的制备 ·放射性核素的选择 不能改变原有化合物的理化和生物学特性； 要有合适的放射性半衰期； 容易测量； y 标记方法较为筒便； 可以接受的价格
安徽医科大学 二、放射性核素标记化合物的制备 放射性核素的选择 不能改变原有化合物的理化和生物学特性； 要有合适的放射性半衰期； 容易测量； 标记方法较为简便； 可以接受的价格
安徽医科大学 制备方法分类 同位素交换法 化学合成法 生物合威法 y 络合物/警合物合成法 基本方法 y14C、H和12闷都是生命研究中最常用的示踪原子，同 时，还有32P和35S
安徽医科大学 制备方法分类 同位素交换法 化学合成法 生物合成法 络合物/螯合物合成法 基本方法 14C、3H和125I都是生命研究中最常用的示踪原子，同 时，还有32P和35S
安激医科大学 ■1是 三、放射性核素标记化合物的纯化和鉴定 +放射性化合物的要求 y放射化学纯度>95%； 在示踪过程中稳定； 不影响生命体生理代谢过程吸收、分布、排泄、转运、 代谢等)： 放射性杂质的来源： 游离的放射性核素； y 杂质被标记上放射性核素； 在运输和贮存过程中，放射性化合物出现脱标和辐射自分 解形成的杂质
安徽医科大学 三、放射性核素标记化合物的纯化和鉴定 放射性化合物的要求 放射化学纯度>95%； 在示踪过程中稳定； 不影响生命体生理代谢过程(吸收、分布、排泄、转运、 代谢等)； 放射性杂质的来源： 游离的放射性核素； 杂质被标记上放射性核素； 在运输和贮存过程中，放射性化合物出现脱标和辐射自分 解形成的杂质
安激医科大学 放射性化合物 标记率测定 分离纯化 产品的质量鉴定 放射性标记化合物的纯化和鉴定过程 1.标记率的测定 标记率= 标记物的放射性 投入的总放射性 ×100% 常用方法包活放射性纸层桥法paper chromatography小尊层 层折法thin layer chromatography TLC小柱层析和蛋自沉淀法
安徽医科大学 1. 标记率的测定 放射性化合物 标记率测定 分离纯化 产品的质量鉴定 放射性标记化合物的纯化和鉴定过程 = ×100% 投入的总放射性 标记物的放射性 标记率 常用方法包括放射性纸层析法(paper chromatography)、薄层 层析法(thin layer chromatography TLC)、柱层析和蛋白沉淀法
安激医科大学 1)基本原理 层析法是采用层析纸或层析薄板作为固定相，展开液作为作 为流动相，根据不同组分的吸附力、分配系数、带电粒子性质和数 量以及其他等方面的差异，使各组分在固定相上的移动距离出现差 异，将不同组分有效地区分开来。采用比移值®代表各组分移动 的相对速度。 待测组分和原点的距离() Rf= ×100% 流动相的前沿和原点的距离(L) 2)基本操作 a、固定相的选择 b、展开剂的遗择 c、层析的点样与展开
安徽医科大学 1) 基本原理 层析法是 采用层析纸或层析薄板作为固定相，展开液作为作 为流动相，根据不同组分的吸附力、分配系数、带电粒子性质和数 量以及其他等方面的差异，使各组分在固定相上的移动距离出现差 异，将不同组分有效地区分开来。采用比移值(Rf)代表各组分移动 的相对速度。 100% )( )( = × L l Rf 流动相的前沿和原点的距离 待测组分和原点的距离 2) 基本操作 a. 固定相的选择 b. 展开剂的选择 c. 层析的点样与展开
安徽医科大学 3)结果的测量 a、放射自显影 b、分段测量 c、放射性扫描 标记率(%)= 标记物放射峰的cpm总和 ×100% 全部层析轨迹上cpm总和 4)注意事项 a、必须确认层析条件能将样晶中的各组分有效分开； b.高比活度的标记化合物，点样加载体； C、低比活度的样品可多次点样，用氯气吹千
安徽医科大学 3) 结果的测量 a. 放射自显影 b. 分段测量 c. 放射性扫描 (%) = ×100% 全部层析轨迹上 总和 标记物放射峰的 总和 标记率 cpm cpm 4) 注意事项 a. 必须确认层析条件能将样品中的各组分有效分开； b. 高比活度的标记化合物，点样加载体； c. 低比活度的样品可多次点样，用氮气吹干
安散医科大学 2.标记物的分离纯化 )层析法 快速、简便，仅适用于少量体积的样晶纯化。 2)柱层析法 将固体相装填如一定体积的桂申，将样品加到固定相之上， 用洗脱液淋洗，样品中的各种化合物，由于吸附、分配的差异， 或由于离子所带电荷的数量、性质不同，或分子量的差异，在层 折柱淋洗过程的速度不同，各组分的洗出有前后之分，从而达到 分高目的。具有准确、高效、灵敏、应用范围广的特点。 a、凝胺过滤层析法 b、离子交换层析法 c,亲和层桥法
安徽医科大学 2. 标记物的分离纯化 1) 层析法 2) 柱层析法 a. 凝胶过滤层析法 b. 离子交换层析法 c. 亲和层析法 快速、简便，仅适用于少量体积的样品纯化。 将固体相装填如一定体积的柱中，将样品加到固定相之上， 用洗脱液淋洗，样品中的各种化合物，由于吸附、分配的差异， 或由于离子所带电荷的数量、性质不同，或分子量的差异，在层 析柱淋洗过程的速度不同，各组分的洗出有前后之分，从而达到 分离目的。具有准确、高效、灵敏、应用范围广的特点