植物病理学 实验实习指导 山西农业大学农学院植物病理系
植 物 病 理 学 实验实习指导 山西农业大学农学院植物病理系
实验一植物病害的症状观察 一、实验目的 通过植物病害症状的观察，掌握植物病害的症状类型、特点以及了解症状在病害诊断中 的作用，同时了解植物病害的种类及多样性，认识病害对农业生产的危害性。 二、实验材料 植物病害盒装标本、浸制标本、彩图、压缩标本等 三、内容与方法 (一)病状类型分为五大类型。 1、变色(Discolour)植物受到外来有害因素的影响后，常导致色泽的改变，如褪色、 条点、白化、色泽变深或变浅等，统称为变色。主要表现有： (1)褪绿或黄化：褪绿和黄化是由于叶绿素的减少而叶片表现为浅绿色或黄色。如 小麦黄矮病、柑桔黄龙病、桃树黄化病、植物的缺铁、缺氮等。 (2)花叶与斑驳：菜豆花叶病、苹果花叶病等。 (3)红化与紫化：桃红叶病、植物缺铁等症状。 2、坏死(Necrosis)坏死是由于受病植物组织和细胞的死亡而引起的。 (1)斑点：根、茎、叶、花、果实的病部局部组织或细胞坏死，产生各种形状、大小 和颜色不同的斑点如玉米大小斑病、十字花科蔬菜黑斑病等。 (2)枯死：芽、叶、枝、花局部或大部分组织发生变色、焦枯、死亡。如马铃薯晚疫 病、水稻白叶枯病。 (3)穿孔：在病斑外围的组织形成离层，使病斑从建组织中脱落下来，形成穿孔，如 桃细菌性穿孔病等。 (4)疮痂：果实、嫩茎、块茎等的受病组织局部木栓化，表面粗糙，如柑桔疮痂病、 梨黑星病（果实）、马铃薯疮痂病等。 (5)溃疡：病部深入到皮层，组织坏死或腐烂，病部面积大，稍凹陷，周围的寄主细 胞有时增生和木栓化，多见于木本植物的枝干上的溃疡症状。如柑桔溃疡病、番茄溃疡病等。 (6)猝倒和立枯：大多发生在各种植物的苗期，幼苗的茎基或根冠组织坏死，地上部 萎蔫以致死亡，如棉花苗期立枯病、瓜苗猝倒病等。 3、腐烂(R0)腐烂是较大面积植物组织的分解和破坏的表现，根据症状及失水快慢 又分为干腐和湿腐。如玉米干腐病，苹果腐烂病。湿腐如大白菜软腐病，甘薯根霉软腐病， 柑桔贮藏期青霉病，苹果果实轮纹病等 流胶也是腐烂的一种，桃树等木本植物受病菌为害后，内部组织坏死并腐烂分解，从 病部向外流出胶状物质，如桃树流胶病。 4、蒌蔫(Wt)引起植物萎蔫的原因有生理性的和病理性的俩种。如棉花枯萎病，黄 萎病，瓜类枯萎病，茄科植物青枯病等。注意有维管束部分有无变褐色？根部有无变色？ 5、畸形（Malformztion)由于病组织或细胞的生长受阻或过度增生而造成的形态异
实验一 植物病害的症状观察 一、实验目的 通过植物病害症状的观察，掌握植物病害的症状类型、特点以及了解症状在病害诊断中 的作用，同时了解植物病害的种类及多样性，认识病害对农业生产的危害性。 二、实验材料 植物病害盒装标本、浸制标本、彩图、压缩标本等 三、内容与方法 （一）病状类型 分为五大类型。 1、变色（Discolour） 植物受到外来有害因素的影响后，常导致色泽的改变，如褪色、 条点、白化、色泽变深或变浅等，统称为变色。主要表现有： （1）褪绿或黄化：褪绿和黄化是由于叶绿素的减少而叶片表现为浅绿色或黄色。如 小麦黄矮病、柑桔黄龙病、桃树黄化病、植物的缺铁、缺氮等。 （2）花叶与斑驳：菜豆花叶病、苹果花叶病等。 （3）红化与紫化：桃红叶病、植物缺铁等症状。 2、坏死（Necrosis） 坏死是由于受病植物组织和细胞的死亡而引起的。 （1）斑点：根、茎、叶、花、果实的病部局部组织或细胞坏死，产生各种形状、大小 和颜色不同的斑点如玉米大小斑病、十字花科蔬菜黑斑病等。 （2）枯死：芽、叶、枝、花局部或大部分组织发生变色、焦枯、死亡。如马铃薯晚疫 病、水稻白叶枯病。 （3）穿孔：在病斑外围的组织形成离层，使病斑从建组织中脱落下来，形成穿孔，如 桃细菌性穿孔病等。 （4）疮痂：果实、嫩茎、块茎等的受病组织局部木栓化，表面粗糙，如柑桔疮痂病、 梨黑星病（果实）、马铃薯疮痂病等。 （5）溃疡：病部深入到皮层，组织坏死或腐烂，病部面积大，稍凹陷，周围的寄主细 胞有时增生和木栓化，多见于木本植物的枝干上的溃疡症状。如柑桔溃疡病、番茄溃疡病等。 （6）猝倒和立枯：大多发生在各种植物的苗期，幼苗的茎基或根冠组织坏死，地上部 萎蔫以致死亡，如棉花苗期立枯病、瓜苗猝倒病等。 3、腐烂（Rot） 腐烂是较大面积植物组织的分解和破坏的表现，根据症状及失水快慢 又分为干腐和湿腐。如玉米干腐病，苹果腐烂病。湿腐如大白菜软腐病，甘薯根霉软腐病， 柑桔贮藏期青霉病，苹果果实轮纹病等 流胶也是腐烂的一种，桃树等木本植物受病菌为害后，内部组织坏死并腐烂分解，从 病部向外流出胶状物质，如桃树流胶病。 4、萎蔫（Wilt）引起植物萎蔫的原因有生理性的和病理性的俩种。如棉花枯萎病，黄 萎病，瓜类枯萎病，茄科植物青枯病等。注意有维管束部分有无变褐色？根部有无变色？ 5、畸形（ Malformztion） 由于病组织或细胞的生长受阻或过度增生而造成的形态异
常。植物病害的畸形症状很多，常见的有： (1)徒长：如水稻恶苗病。 (2)矮化，萎缩：矮化是植株各个器官的长度成比例缩小，病株比健株矮小的多，如 玉米矮化病。矮缩则主要是节间缩短或茎叶族生在一起。如水稻矮缩病，小麦黄萎病等。 (3)丛生：枝条或根异常的增多导致丛枝或从根，如枣疯病，竹丛枝病，桑萎缩病， 泡桐丛枝病，苹果发根病和小麦丛矮病等。 (4)瘤肿：病部的细胞或组织因病原物的刺激而增生或增大，呈现出瘤肿，如各种根 癌病，根结线虫病，松瘤锈病等。 (5)卷叶：叶片卷曲与皱缩，如桃索叶病。 (6)蕨叶：，叶片发育不良，叶片变成丝状，线状或蕨叶状，如番茄蕨叶病（病毒）。 双子叶植物受2,4-D的药害也常变成蕨叶状。 (7)花变叶：正常的花器变成叶片状结构。 (二)病征类型 病症是指在植物病部形成的，肉眼可见的病原物的结构。识别各种不同类型的病症，对 诊断病害很有帮助。 真菌病害的病症最复杂，依其形态不同，可区分为多种类型：大致分为霉状物，粉状 物，锈状物，点粒状物（小黑粒和小黑点），颗粒状物，块状物，伞状物等。并常以这些特 征来命名这些病害。有些类型的病症可根据其他特征进一步区分，如粉状物可根据其色泽不 同，分为白粉，黑粉等。细菌病害的病症比较简单，通常是在病部出现液滴状或颗粒状菌脓。 1、霉状物：瓜类绵腐病，马铃薯晚疫病，十字花科蔬菜霜霉病，甘薯软腐病，柑桔青 霉病。 2、粒状物：小麦白粉病、瓜类白粉病、苹果白粉病、小麦散黑穗病、玉米瘤黑粉病、 水稻粒黑粉病。 3、锈状物：菜豆锈病、麦类锈病和其他锈病。 4、点粒状物（小黑粒和小黑点）：小麦白粉病、桑白粉病、苹果树腐烂病、玉米干腐病、 茄褐纹病等。 5、菌核（颗粒状物）：水稻（玉米）纹枯病、油菜菌核病等。 6、煤污状物：茶煤病、桑污叶病、桔煤污病等。 7、胺状、块状和伞状物：木耳、银耳、平菇、灵芝等。 8、菌脓：水稻条斑病和白叶枯病。 注意：以上病征只针对菌物和细菌病害，病毒、植原体、线虫病害，以及非侵染性病 害无病征表现。 四、作业 将上述病害标本按下表要求填写，重点在于描述病状和病征类型。 植物病害症状观察记载表 序号 病害名称 发病部分 病状类型 病症类型 典型症状
常。植物病害的畸形症状很多，常见的有： （1）徒长：如水稻恶苗病。 （2）矮化，萎缩：矮化是植株各个器官的长度成比例缩小，病株比健株矮小的多，如 玉米矮化病。矮缩则主要是节间缩短或茎叶族生在一起。如水稻矮缩病，小麦黄萎病等。 （3）丛生：枝条或根异常的增多导致丛枝或从根，如枣疯病，竹丛枝病，桑萎缩病， 泡桐丛枝病，苹果发根病和小麦丛矮病等。 （4）瘤肿：病部的细胞或组织因病原物的刺激而增生或增大，呈现出瘤肿，如各种根 癌病，根结线虫病，松瘤锈病等。 （5）卷叶：叶片卷曲与皱缩，如桃索叶病。 （6）蕨叶：，叶片发育不良，叶片变成丝状，线状或蕨叶状，如番茄蕨叶病（病毒）。 双子叶植物受 2,4-D 的药害也常变成蕨叶状。 （7）花变叶：正常的花器变成叶片状结构。 （二）病征类型 病症是指在植物病部形成的，肉眼可见的病原物的结构。识别各种不同类型的病症，对 诊断病害很有帮助。 真菌病害的病症最复杂，依其形态不同，可区分为多种类型：大致分为霉状物，粉状 物，锈状物，点粒状物（小黑粒和小黑点），颗粒状物，块状物，伞状物等。并常以这些特 征来命名这些病害。有些类型的病症可根据其他特征进一步区分，如粉状物可根据其色泽不 同，分为白粉，黑粉等。细菌病害的病症比较简单，通常是在病部出现液滴状或颗粒状菌脓。 1、霉状物；瓜类绵腐病，马铃薯晚疫病，十字花科蔬菜霜霉病，甘薯软腐病，柑桔青 霉病。 2、粒状物：小麦白粉病、瓜类白粉病、苹果白粉病、小麦散黑穗病、玉米瘤黑粉病、 水稻粒黑粉病。 3、 锈状物：菜豆锈病、麦类锈病和其他锈病。 4、点粒状物（小黑粒和小黑点）：小麦白粉病、桑白粉病、苹果树腐烂病、玉米干腐病、 茄褐纹病等。 5、 菌核（颗粒状物）：水稻（玉米）纹枯病、油菜菌核病等。 6、 煤污状物：茶煤病、桑污叶病、桔煤污病等。 7、 胺状、块状和伞状物：木耳、银耳、平菇、灵芝等。 8、 菌脓：水稻条斑病和白叶枯病。 注意：以上病征只针对菌物和细菌病害，病毒、植原体、线虫病害，以及非侵染性病 害无病征表现。 四、作业 将上述病害标本按下表要求填写，重点在于描述病状和病征类型。 植物病害症状观察记载表 序号 病害名称 发病部分 病状类型 病症类型 典型症状
实验二植物病原真菌的一般形态观察 一、实验目的 通过观察认识病原真菌的营养体及其变态，认识真菌的子实体、有性繁殖、无性繁殖产 生的各种类型孢子。 二、材料与用具 棉花立枯病菌、黄瓜绵腐病菌（菌丝）黑麦麦角病菌（子座） 镰刀菌（后垣孢子）甘薯软腐病菌（假根） 小麦白粉病（吸器）苹果紫纹病菌（根状菌索） 小麦菌核性根腐病菌（菌核的切面）玉米小斑病菌（分生孢子） 甘薯软腐病菌（孢子囊、接合孢子）小麦腥黑穗病菌（担子、担孢子） 三、内容与方法 1、病原真菌的营养体 真菌营养生长阶段的结构统称为真菌的营养体。真菌典型的营养体是很细小的丝状体， 即菌丝，少数为单细胞。菌丝通常是圆管状，多为无色透明，有的有隔膜，有的无隔膜。 用挑针挑取平板上培养好的瓜果腐霉病菌(Pythium aphanidermatum)、立枯丝核菌 (Rhizoctonia solani)和链格孢菌(Alternaria sp.)的菌丝体，用蒸馏水作浮载剂，制临时玻 片镜检，观察菌丝有无隔膜？菌丝体直径变化是否明显？颜色有无差别？分隔的间隔距离是 否均匀？ 2、真菌营养体的变态 病原真菌营养体在一定条件下可发生变态而形成特殊的结构，这些变态是真菌适应性的 表现，其作用是抵抗不良的环境条件，有利于传播、固着吸收和繁殖。主要的变态有吸器、 假根、菌核、子座以及根状菌索、附着孢、附着枝等。 (1)吸器：吸器的形态有圆球状、棒状、裂片状、掌状、根状等。观察用撕取法制片 的小麦白粉病菌（Blumeria graminis)吸器形态，注意吸器的形状和在细胞内的位置。为便 于清楚观察，也可以用棉蓝乳酚油作为浮载剂。 (2)假根：是由菌丝分化的根状分枝。挑取甘薯软腐病菌(Rhizopus s1 olonifer)平板 培养物制片镜检，观察在孢囊梗基部的假根的形态和颜色。 (3)菌核：是菌丝体的菌丝纠结而成的坚固的颗粒状休眠体。观察油菜菌核病菌 (Sclerotium sclerotiorum)的菌核和小麦麦角病菌(Claviceps purpurea)的菌核标本。比较 两种菌核的大小、形状和色泽有何不同？
实验二 植物病原真菌的一般形态观察 一、实验目的 通过观察认识病原真菌的营养体及其变态，认识真菌的子实体、有性繁殖、无性繁殖产 生的各种类型孢子。 二、材料与用具 棉花立枯病菌、黄瓜绵腐病菌（菌丝） 黑麦麦角病菌（子座） 镰刀菌（后垣孢子） 甘薯软腐病菌（假根） 小麦白粉病（吸器） 苹果紫纹病菌（根状菌索） 小麦菌核性根腐病菌（菌核的切面） 玉米小斑病菌（分生孢子） 甘薯软腐病菌（孢子囊、接合孢子） 小麦腥黑穗病菌（担子、担孢子） 三、内容与方法 1、病原真菌的营养体 真菌营养生长阶段的结构统称为真菌的营养体。真菌典型的营养体是很细小的丝状体， 即菌丝，少数为单细胞。菌丝通常是圆管状，多为无色透明，有的有隔膜，有的无隔膜。 用挑针挑取平板上培养好的瓜果腐霉病菌（Pythium aphanidermatum）、立枯丝核菌 （Rhizoctonia solani）和链格孢菌（Alternaria sp.）的菌丝体，用蒸馏水作浮载剂，制临时玻 片镜检，观察菌丝有无隔膜？菌丝体直径变化是否明显？颜色有无差别？分隔的间隔距离是 否均匀？ 2、真菌营养体的变态 病原真菌营养体在一定条件下可发生变态而形成特殊的结构，这些变态是真菌适应性的 表现，其作用是抵抗不良的环境条件，有利于传播、固着吸收和繁殖。主要的变态有吸器、 假根、菌核、子座以及根状菌索、附着孢、附着枝等。 （1）吸器：吸器的形态有圆球状、棒状、裂片状、掌状、根状等。观察用撕取法制片 的小麦白粉病菌（Blumeria graminis）吸器形态，注意吸器的形状和在细胞内的位置。为便 于清楚观察，也可以用棉蓝乳酚油作为浮载剂。 （2）假根：是由菌丝分化的根状分枝。挑取甘薯软腐病菌（Rhizopus stolonifer）平板 培养物制片镜检，观察在孢囊梗基部的假根的形态和颜色。 （3）菌核：是菌丝体的菌丝纠结而成的坚固的颗粒状休眠体。观察油菜菌核病菌 （Sclerotium sclerotiorum）的菌核和小麦麦角病菌（Claviceps purpurea）的菌核标本。比较 两种菌核的大小、形状和色泽有何不同？
(4)根状菌索：许多菌丝体平行生长并纠结成绳索状，称为根状菌索。在示范镜下观 察苹果或甘薯紫纹羽病菌(Helicobasidium purpureum)的根状菌索。 (5)子座：由菌丝体或由菌丝体和寄主组织共同组成的着生子实体的垫状物。在子座 上形成无性或有性孢子。在显微镜下观察麦角病菌(Claviceps purpurea)头状子座的切片， 注意其内部结构与菌核有何区别，或镜检大叶黄杨叶斑病菌或紫荆叶斑病菌(Cercospora sp)的垫状子座。 (6)附着孢：附着孢是真菌孢子萌发形成的牙管或菌丝顶端的膨大部分，可以牢固地 附着在寄主体表，其下方产生侵入钉穿透寄主角质层和表层细胞壁。 3、病原真菌的繁殖体—子实体 真菌产生孢子的机构称为子实体。病原真菌孢子的形态特征是鉴定和分类学上重要的依 据。真菌的孢子可分为无性孢子和有性孢子两类。 3.1无性孢子 (1)游动孢子囊和游动孢子：鞭毛菌亚门真菌的无性繁殖器官是孢子囊。大多数鞭毛 菌孢子囊可释放出具鞭毛、在水中能游动的游动孢子，故其孢子囊又称为游动孢子囊。镜检 腐霉菌(Pythium sp.)和疫霉菌(Phytophthora sp.)的游动孢子囊形态，注意孢囊梗与菌丝有 无区别。 (2)孢子囊和孢囊孢子：接合菌亚门真菌的无性繁殖器官是孢囊孢子。镜检根霉菌 (Rhizopus spp.)、毛霉菌(Mucor spp.)的孢子囊、孢囊孢子。 (3)分生孢子：半知菌亚门真菌和子囊菌的无性世代繁殖时都可产生分生孢子。，其 形态、大小、色泽极其多样化，从无色至深色、单孢到多孢，并具多种形态。分生孢子多着 生在分生孢子梗上。分生孢子梗有色或无色、散生或聚生，或着生在分生孢子座、分生孢子 盘或分生孢子器内。 采用挑、刮或切片的方法制作临时玻片，观察下列病原菌分生孢子的颜色、分隔：分生 孢子梗的形态、颜色，是否分枝及分枝的类型、着生位置等。 玉米小斑病菌(Bipolaris maydis) 花生黑斑病菌(Cercospora arachidicola) 小麦白粉病菌（无性世代）(Oidium monilioides) 柑桔青霉病菌（Penicillium italicum)‘ 棉花黄萎病菌(Verticillium dahliae) 稻瘟病菌(Pyricularia oryzae） 马铃薯早疫病菌(Alternaria solani) (4)厚垣孢子：由菌丝中个别细胞膨大、细胞壁加厚而形成的一种厚壁孢子。对不良 环境的抵抗能力较强。 挑取棉花枯萎病菌(Fusarium oxysporum)或樟疫霉(Phytophthora cinnarnomi)的培养 物制片镜检，观察厚垣孢子的形状、颜色和孢子壁的厚度。 3.2有性孢子
（4）根状菌索：许多菌丝体平行生长并纠结成绳索状，称为根状菌索。在示范镜下观 察苹果或甘薯紫纹羽病菌（Helicobasidium purpureum）的根状菌索。 （5）子座：由菌丝体或由菌丝体和寄主组织共同组成的着生子实体的垫状物。在子座 上形成无性或有性孢子。在显微镜下观察麦角病菌（Claviceps purpurea）头状子座的切片， 注意其内部结构与菌核有何区别，或镜检大叶黄杨叶斑病菌或紫荆叶斑病菌（Cercospora sp.）的垫状子座。 （6）附着孢：附着孢是真菌孢子萌发形成的牙管或菌丝顶端的膨大部分，可以牢固地 附着在寄主体表，其下方产生侵入钉穿透寄主角质层和表层细胞壁。 3、病原真菌的繁殖体——子实体 真菌产生孢子的机构称为子实体。病原真菌孢子的形态特征是鉴定和分类学上重要的依 据。真菌的孢子可分为无性孢子和有性孢子两类。 3.1 无性孢子 （1）游动孢子囊和游动孢子：鞭毛菌亚门真菌的无性繁殖器官是孢子囊。大多数鞭毛 菌孢子囊可释放出具鞭毛、在水中能游动的游动孢子，故其孢子囊又称为游动孢子囊。镜检 腐霉菌（Pythium sp.）和疫霉菌（Phytophthora sp.）的游动孢子囊形态,注意孢囊梗与菌丝有 无区别。 （2）孢子囊和孢囊孢子：接合菌亚门真菌的无性繁殖器官是孢囊孢子。镜检根霉菌 （Rhizopus spp.）、毛霉菌（Mucor spp.）的孢子囊、孢囊孢子。 （3）分生孢子：半知菌亚门真菌和子囊菌的无性世代繁殖时都可产生分生孢子。，其 形态、大小、色泽极其多样化，从无色至深色、单孢到多孢，并具多种形态。分生孢子多着 生在分生孢子梗上。分生孢子梗有色或无色、散生或聚生，或着生在分生孢子座、分生孢子 盘或分生孢子器内。 采用挑、刮或切片的方法制作临时玻片，观察下列病原菌分生孢子的颜色、分隔；分生 孢子梗的形态、颜色，是否分枝及分枝的类型、着生位置等。 玉米小斑病菌（Bipolaris maydis） 花生黑斑病菌（Cercospora arachidicola） 小麦白粉病菌（无性世代）（Oidium monilioides） 柑桔青霉病菌（Penicillium italicum） ‘ 棉花黄萎病菌（Verticillium dahliae） 稻瘟病菌（Pyricularia oryzae） 马铃薯早疫病菌（Alternaria solani） （4）厚垣孢子：由菌丝中个别细胞膨大、细胞壁加厚而形成的一种厚壁孢子。对不良 环境的抵抗能力较强。 挑取棉花枯萎病菌（Fusarium oxysporum）或樟疫霉（Phytophthora cinnarnomi）的培养 物制片镜检，观察厚垣孢子的形状、颜色和孢子壁的厚度。 3.2 有性孢子
真菌有性生殖产生的孢子是由两个有亲和力的性细胞结合后发育形成的，包括休眠孢子 囊、卵孢子、接合孢子、子囊孢子和担孢子。 (1)休眠孢子囊：通常有两个游动配子配合所形成的合子发育而成，壁厚，萌发时发 生减数分裂释放出单倍体的游动孢子，如壶菌、根肿菌。 (2)卵孢子：是鞭毛菌亚门真菌产生的有性孢子，常由形态、大小不同的雌、雄性器 官交配形成。卵孢子通常形成于藏卵器内，每个藏卵器内可包含1至多个卵孢子，其数目因 真菌种类不同而各异。 挑取疫霉（Phytophthora sp.)的培养物（连同培养基）制片镜检。 取禾谷类作物，如水稻、小麦、大麦、玉米等的霜霉病(Sclerophthora macrospora) 病组织做徒手切片。滴一滴乳酚油于载玻片上，挑几块切片于乳酚油中，在酒精灯火焰上微 微加热，使病组织透明，盖上盖玻片、镜检，观察藏卵器的形态、色泽、壁有无饰纹或光滑： 雄器形态及其位置：卵孢子形态、每个藏卵器内卵孢子的数目、卵孢子是否充满藏卵器。 (3)接合孢子：是接合菌亚门真菌产生的有性孢子，由两个形状和大小相似的雌、雄 配子囊结合而成。 挑取根霉(Rh忙opus sp..)正、负菌株在PDA培养基上交配7-10天后的培养物制片镜 检，观察接合孢子的形状、表面的饰纹、色泽、配囊柄的形状及有无丝状附属物。 (4)子囊孢子：子囊菌亚门真菌的有性孢子，产生在子囊内，每个子囊通常含有8个 子囊孢子。子囊孢子有色或无色、单胞或多胞，具多种形状。子囊通常棍棒状，有的近球状， 散生或着生在一定形态的子囊果内。 采用挑、刮或切片的方法制作临时玻片或直接观察永久玻片，镜检下列病原物。观察子 囊孢子的形态、颜色：子囊的形态，是否具双层子囊壁，子囊有无固定孔口：子囊果的类型， 有闭囊壳、子囊壳、子囊盘或子囊腔。 桃缩叶病菌（Taphrina deformans) 小麦白粉病菌(Erysiphe graminis) 桑里白粉病菌(Phyllactinia corylea) 小麦赤霉病菌(Gibberella zeae) 苹果树腐烂病菌(Valsa mali) 麦角病菌(Claviceps purpurea) (5)担孢子：担子菌亚门真菌产生的有性孢子。担孢子产生在担子上，每个担子通常 有4个担孢子。 观察小麦腥黑穗病菌(Tilletia caries)冬孢子萌发形成的担子及担孢子的形态。黑粉菌 孢子萌发的条件是恒温(15一25℃)和定期的光照，连续培养3一5d,冬孢子即可萌发。 四、作业 1、认识病原真菌菌丝、无性孢子、有性孢子有何意义？ 2、填图，注明图1中各部分的名称
真菌有性生殖产生的孢子是由两个有亲和力的性细胞结合后发育形成的，包括休眠孢子 囊、卵孢子、接合孢子、子囊孢子和担孢子。 （1）休眠孢子囊：通常有两个游动配子配合所形成的合子发育而成，壁厚，萌发时发 生减数分裂释放出单倍体的游动孢子，如壶菌、根肿菌。 （2）卵孢子：是鞭毛菌亚门真菌产生的有性孢子，常由形态、大小不同的雌、雄性器 官交配形成。卵孢子通常形成于藏卵器内，每个藏卵器内可包含 1 至多个卵孢子，其数目因 真菌种类不同而各异。 挑取疫霉（Phytophthora sp.）的培养物（连同培养基）制片镜检。 取禾谷类作物，如水稻、小麦、大麦、玉米等的霜霉病 （Sclerophthora macrospora） 病组织做徒手切片。滴一滴乳酚油于载玻片上，挑几块切片于乳酚油中，在酒精灯火焰上微 微加热，使病组织透明，盖上盖玻片、镜检，观察藏卵器的形态、色泽、壁有无饰纹或光滑； 雄器形态及其位置；卵孢子形态、每个藏卵器内卵孢子的数目、卵孢子是否充满藏卵器。 （3）接合孢子：是接合菌亚门真菌产生的有性孢子，由两个形状和大小相似的雌、雄 配子囊结合而成。 挑取根霉（Rhizopus sp.）正、负菌株在 PDA 培养基上交配 7－10 天后的培养物制片镜 检，观察接合孢子的形状、表面的饰纹、色泽、配囊柄的形状及有无丝状附属物。 （4）子囊孢子：子囊菌亚门真菌的有性孢子，产生在子囊内，每个子囊通常含有 8 个 子囊孢子。子囊孢子有色或无色、单胞或多胞，具多种形状。子囊通常棍棒状，有的近球状， 散生或着生在一定形态的子囊果内。 采用挑、刮或切片的方法制作临时玻片或直接观察永久玻片，镜检下列病原物。观察子 囊孢子的形态、颜色；子囊的形态，是否具双层子囊壁，子囊有无固定孔口；子囊果的类型， 有闭囊壳、子囊壳、子囊盘或子囊腔。 桃缩叶病菌（Taphrina deformans） 小麦白粉病菌（Erysiphe graminis） 桑里白粉病菌（Phyllactinia corylea） 小麦赤霉病菌（Gibberella zeae） 苹果树腐烂病菌（Valsa mali） 麦角病菌（Claviceps purpurea） （5）担孢子：担子菌亚门真菌产生的有性孢子。担孢子产生在担子上，每个担子通常 有 4 个担孢子。 观察小麦腥黑穗病菌 ( Tilletia caries )冬孢子萌发形成的担子及担孢子的形态。黑粉菌 孢子萌发的条件是恒温 (15—25℃) 和定期的光照，连续培养 3—5d，冬孢子即可萌发。 四、作业 1、认识病原真菌菌丝、无性孢子、有性孢子有何意义？ 2、填图，注明图 1 中各部分的名称
图1病原真菌子实体形态图（填注各部分名称） 1.鞭毛菌2.接合菌3.子囊菌4.担子菌 实验三植物病原线虫观察 一、实验目的 本实验的目的是熟悉植物病原线虫的基本形态及其所致病害的症状特点。 二、实验材料与用具 小麦粒线虫、甘薯茎线虫(D.destructor)、水稻干尖线虫（A.besseyi)、大豆胞囊线 虫(H.glycines)、蔬菜根结线虫(M.spp.)、烟草环斑病毒(TRSV)、长针线虫(Longidorus sp.):毛刺线虫(Trichodorus sp..)病的危害标本。 刀片、挑针、载玻片、盖玻片、显微镜 三、内容与方法 (1)粒线虫属(Anguina). 观察由小麦粒线虫危害小麦引起的症状，注意小麦受害部位，受害的茎叶有无扭曲或 畸形？虫瘿的外形与麦粒有什么区别？ 取虫瘿一个，用刀片切开或挑针挑破，挑取虫瘿内部的白色棉絮状物于载玻片上的水 滴中盖上盖玻片，置于低倍镜下镜检，可见到成虫、卵和幼虫。雌虫、雄虫均为线形，雌虫 体形较雄虫粗大，往往卷曲，体内的卵巢顶端弯曲。雄虫昆部有交合刺，交合伞几乎包到尾 尖。 (2)茎线虫属（Ditylenchus) 观察甘薯茎线虫(D.destructor)危害甘薯的症状，剖开病薯可见到条点状褐色或白 粉干腐症状，挑取少量组织于载玻片的水滴中，加盖玻片镜检，可见到卵、幼虫、成虫等各 个虫态。甘薯茎线虫雌雄同型，都是线形，雌虫稍粗大，尾端尖细。注意口针、食道球形态， 肠和卵巢平行，单卵巢，卵单行排列。雄虫较细小，尾部可见交合刺、交合伞，交合伞后端 距虫体末端有一定间隔。因虫体很小，观察内部器官需用高倍镜。观察示范镜下的雄虫尾部 形态。 (3)滑刃线虫属(Aphelenchoides) 有各种危害状，例如水稻干尖线虫(A.bessevi)引起水稻干尖线虫病，以剑叶的干尖 最明显，剑叶尖端2一6厘米一段变为白色。干枯卷缩，幼穗形成时线虫侵入颖壳内，引起
图 1 病原真菌子实体形态图（填注各部分名称） 1.鞭毛菌 2.接合菌 3.子囊菌 4.担子菌 实验三 植物病原线虫观察 一、实验目的 本实验的目的是熟悉植物病原线虫的基本形态及其所致病害的症状特点。 二、实验材料与用具 小麦粒线虫、甘薯茎线虫（D．destructor）、水稻干尖线虫（A．besseyi）、大豆胞囊线 虫（H．glycines）、蔬菜根结线虫（M．spp．）、烟草环斑病毒（TRSV）、长针线虫（Longidorus sp.）；毛刺线虫（Trichodorus sp.）病的危害标本。 刀片、挑针、载玻片、盖玻片、显微镜 三、内容与方法 （1） 粒线虫属（Anguina） 观察由小麦粒线虫危害小麦引起的症状，注意小麦受害部位，受害的茎叶有无扭曲或 畸形？虫瘿的外形与麦粒有什么区别？ 取虫瘿一个，用刀片切开或挑针挑破，挑取虫瘿内部的白色棉絮状物于载玻片上的水 滴中盖上盖玻片，置于低倍镜下镜检，可见到成虫、卵和幼虫。雌虫、雄虫均为线形，雌虫 体形较雄虫粗大，往往卷曲，体内的卵巢顶端弯曲。雄虫昆部有交合刺，交合伞几乎包到尾 尖。 （2） 茎线虫属（Ditylenchus） 观察甘薯茎线虫（D．destructor）危害甘薯的症状，剖开病薯可见到条点状褐色或白 粉干腐症状，挑取少量组织于载玻片的水滴中，加盖玻片镜检，可见到卵、幼虫、成虫等各 个虫态。甘薯茎线虫雌雄同型，都是线形，雌虫稍粗大，尾端尖细。注意口针、食道球形态， 肠和卵巢平行，单卵巢，卵单行排列。雄虫较细小，尾部可见交合刺、交合伞，交合伞后端 距虫体末端有一定间隔。因虫体很小，观察内部器官需用高倍镜。观察示范镜下的雄虫尾部 形态。 （3） 滑刃线虫属（Aphelenchoides） 有各种危害状，例如水稻干尖线虫（A．besseyi）引起水稻干尖线虫病，以剑叶的干尖 最明显，剑叶尖端 2－6 厘米一段变为白色。干枯卷缩，幼穗形成时线虫侵入颖壳内，引起
秕粒或不很充实：菊叶线虫(A.ritzemabosi)为害菊的叶片，使叶片组织坏死。 镜检水稻干尖线虫或珠蓝线虫，观察口针、食道球的形态特征、雄虫尾部的交合刺，有无交 合伞？ (4)胞囊线虫属(Heterodera) 观察大豆胞囊线虫(H.glycines)的危害症状。挑取病根上的雌虫，肉眼可见到线虫 头部已钻入寄主组织，虫体外露，多为柠檬形，黄褐色。制片镜检，大豆胞囊线虫的卵大多 不排出体外，整个雌虫体后期变成颜色深褐的卵囊，特称为胞囊（少数可排部分卵于体尾的 胶质囊内)。 (5)根结线虫属(Meloidogyne) 观察蔬菜根结线虫(M.spp.)或花生、茄科植物根结线虫危害症状，镜检观察雌虫虫 体形态。根结线虫属分种的主要依据是：会阴花纹的形态特征，胞囊线虫分种是根据阴门椎 周围的形态特征加以区别的。 (6)外寄生线虫 这类线虫只有取食时才将口针穿刺到寄主植物的体内，虫体外露，平时生活于土壤中。 由于取食与栖息不在一处，它们经常往返于土壤与植物根系之间，而且取食的植株不固定， 一条线虫可以危害多株植物。在它们转移危害时，线虫往往成为其它病害的传播介体，例如 烟草环斑病毒(TRSV)就是通过线虫传播的。 剑线虫属(Xiphinema):齿针很长，基部球大为瘤状，导环位置低。 长针线虫属(Longidorus):齿针很长，基部球不大，导环位置高。 毛刺线虫属(Trichodorus):瘤针弯曲，基部渐粗，形似毛刺。 在示范镜下观察比较外寄生线虫头部及口针部的形态特征。 四、作业 1、绘制小麦粒线虫雌虫、雄虫体形图，注意交合刺、交合伞。 2、绘制滑刃线虫雄虫尾部图，注意有无交合伞？ 3、根结线虫和胞囊线虫为害根部时，症状有何不同？ 实验四小麦病害的识别 一、实验目的 认识和掌握主要麦类病害的症状和病原菌形态特征。学会独立诊断鉴定小麦 条锈、叶锈、秆锈3种锈病、小麦白粉病、小麦赤霉病、小麦腥黑穗等病害，掌 握主要鉴定方法，对其它麦类病害也能举一反三，进行鉴别。 二、材料和用具 小麦病害腊叶标本和病原菌玻片标本。病害特征挂图或多媒体幻灯片。电动离心机、离 心试管、天平、吸管、三角瓶、显微镜、载玻片、盖玻片、解剖针、镊子等实验常规用具。 三、内容和方法 (一)小麦锈病
秕粒或不很充实；菊叶线虫（A.ritzemabosi）为害菊的叶片，使叶片组织坏死。 镜检水稻干尖线虫或珠蓝线虫，观察口针、食道球的形态特征、雄虫尾部的交合刺，有无交 合伞？ （4） 胞囊线虫属（Heterodera） 观察大豆胞囊线虫（H．glycines）的危害症状。 挑取病根上的雌虫，肉眼可见到线虫 头部已钻入寄主组织，虫体外露，多为柠檬形，黄褐色。制片镜检，大豆胞囊线虫的卵大多 不排出体外，整个雌虫体后期变成颜色深褐的卵囊，特称为胞囊（少数可排部分卵于体尾的 胶质囊内）。 （5）根结线虫属（Meloidogyne） 观察蔬菜根结线虫（M．spp．）或花生、茄科植物根结线虫危害症状，镜检观察雌虫虫 体形态。根结线虫属分种的主要依据是：会阴花纹的形态特征，胞囊线虫分种是根据阴门椎 周围的形态特征加以区别的。 （6）外寄生线虫 这类线虫只有取食时才将口针穿刺到寄主植物的体内，虫体外露，平时生活于土壤中。 由于取食与栖息不在一处，它们经常往返于土壤与植物根系之间，而且取食的植株不固定， 一条线虫可以危害多株植物。在它们转移危害时，线虫往往成为其它病害的传播介体，例如 烟草环斑病毒（TRSV）就是通过线虫传播的。 剑线虫属（Xiphinema）：齿针很长，基部球大为瘤状，导环位置低。 长针线虫属（Longidorus）：齿针很长，基部球不大，导环位置高。 毛刺线虫属（Trichodorus）：瘤针弯曲，基部渐粗，形似毛刺。 在示范镜下观察比较外寄生线虫头部及口针部的形态特征。 四、作业 1、绘制小麦粒线虫雌虫、雄虫体形图，注意交合刺、交合伞。 2、绘制滑刃线虫雄虫尾部图，注意有无交合伞？ 3、根结线虫和胞囊线虫为害根部时，症状有何不同？ 实验四 小麦病害的识别 一、实验目的 认识和掌握主要麦类病害的症状和病原菌形态特征。学会独立诊断鉴定小麦 条锈、叶锈、秆锈 3 种锈病、小麦白粉病、小麦赤霉病、小麦腥黑穗等病害，掌 握主要鉴定方法，对其它麦类病害也能举一反三，进行鉴别。 二、材料和用具 小麦病害腊叶标本和病原菌玻片标本。病害特征挂图或多媒体幻灯片。电动离心机、离 心试管、天平、吸管、三角瓶、显微镜、载玻片、盖玻片、解剖针、镊子等实验常规用具。 三、内容和方法 （一）小麦锈病
1、症状观察： 小麦锈病有三种一条锈病、叶锈病、秆锈病。通过症状观察，要求能正确区分三种锈病 的症状。将三种锈病的症状标本进行比较观察。在病部是否见到呈锈色小点状的夏孢子堆？ 是否见到呈黑色小点状的冬孢子堆？注意三种锈病的区别。比较病株上夏孢子堆和冬孢子堆 的形态、颜色、大小、排列情况、发病部位等方面，区别三种锈病之间的异同。 2、病原菌观察： 小麦条锈病病原物为条形柄锈菌(Puccimia striiiformis West),担子菌亚门柄锈菌属。 小麦叶锈病病原物为隐匿柄锈菌小麦专化型(Puccinia recondita Rob.ex Desm.fsp.tritici Erikss et Henn.),担子菌亚门柄锈菌属。 小麦秆锈病病原物为禾柄锈菌小麦专化型（Puccinia graminis Pers.fsp.tritici Erikss..et.Hem.),担子菌亚门柄锈菌属。 用解剖针挑取病部夏孢子堆和冬孢子堆中的粉末少许制片（或用玻片标本），在显微镜 下观察。观察三种锈病夏孢子的形态、结构和颜色等有何异同？在高倍镜下，可否见到表面 有微刺？ 三种锈菌的冬孢子很相似。本实验不要求进行区分。 条锈（一） 条锈（二） 秆锈 叶锈 小麦条锈病病菌（一）小麦条锈病病菌（二） 小麦秆锈病的夏孢子堆穿透叶背能力强，同一个孢子堆，叶背的粉堆较叶面出现的粉堆 大，叶锈病孢子堆则多不穿透叶背，可简单的记为“条锈成行、叶锈散，秆锈是块大红斑。 (二)小麦白粉病 1、症状观察： 该病可发生于小麦地上各部位各生育期。取小麦白粉病病株，观察病害部位是否有白色 一淡褐色的粉霉堆？观察霉层的形状、厚度。比较叶片背面与叶片正面霉层大小。在淡褐色 的老粉霉堆中散生有黑色小点，是何物？试用手抹去粉霉堆行否？为什么？
1、症状观察： 小麦锈病有三种—条锈病、叶锈病、秆锈病。通过症状观察，要求能正确区分三种锈病 的症状。将三种锈病的症状标本进行比较观察。在病部是否见到呈锈色小点状的夏孢子堆？ 是否见到呈黑色小点状的冬孢子堆？注意三种锈病的区别。比较病株上夏孢子堆和冬孢子堆 的形态、颜色、大小、排列情况、发病部位等方面，区别三种锈病之间的异同。 2、病原菌观察： 小麦条锈病病原物为条形柄锈菌（Puccimia striiiformis West），担子菌亚门柄锈菌属。 小麦叶锈病病原物为隐匿柄锈菌小麦专化型（Puccinia recondita Rob.ex Desm. f.sp. tritici Erikss et Henn.），担子菌亚门柄锈菌属。 小 麦 秆 锈 病 病 原 物 为 禾 柄 锈 菌 小 麦 专 化 型 （ Puccinia graminis Pers.f.sp.tritici Erikss.et.Hem.），担子菌亚门柄锈菌属。 用解剖针挑取病部夏孢子堆和冬孢子堆中的粉末少许制片（或用玻片标本），在显微镜 下观察。观察三种锈病夏孢子的形态、结构和颜色等有何异同？在高倍镜下，可否见到表面 有微刺？ 三种锈菌的冬孢子很相似。本实验不要求进行区分。 条锈（一） 条锈（二） 秆锈 叶锈 小麦条锈病病菌（一） 小麦条锈病病菌（二） 小麦秆锈病的夏孢子堆穿透叶背能力强，同一个孢子堆，叶背的粉堆较叶面出现的粉堆 大，叶锈病孢子堆则多不穿透叶背，可简单的记为“条锈成行、叶锈散，秆锈是块大红斑。 （二）小麦白粉病 1、症状观察： 该病可发生于小麦地上各部位各生育期。取小麦白粉病病株，观察病害部位是否有白色 －淡褐色的粉霉堆？观察霉层的形状、厚度。比较叶片背面与叶片正面霉层大小。在淡褐色 的老粉霉堆中散生有黑色小点，是何物？试用手抹去粉霉堆行否？为什么？
2、病原菌形态观察 麦类白粉病病原菌有性态为禾布氏白粉菌(Blumeria graminis(DC.)Speer),危害小 麦的是禾布氏白粉菌小麦专化型(B.graminis f.sp.tritici），子囊菌亚门布氏白粉菌属：无 性态为串珠粉状孢(Oidium monilioides Nees),半知菌亚门粉孢属。 2.1菌丝体及分生孢子的观察： 用镊子撕取带有粉霉堆的新鲜麦叶表皮制片。或用现成玻片标本在显微镜下观察。观察 表皮上病菌菌丝体以及分生孢子梗的形态、颜色。观察串生于分生孢子梗顶端的分生孢子， 描述其颜色、形态。 2.2闭囊壳及其子囊孢子的观察： 用制好的玻片标本或在示范镜下观察，黑色无孔口的球状结构为病菌的闭囊壳，在壳的 表面有丝状物一附属丝。在压破的子囊壳处，可见子囊和子囊孢子，观察其颜色、形态。 小麦白粉病（一） 小麦白粉病（二） 小麦白粉病病原 (三)小麦赤霉病 1、症状观察： 主要发生在穗期，造成穗腐。取小麦赤霉病病株，先观察穗部部分小穗在颜色上有何改 变？穗部是否有干瘪籽粒？穗部是否有变色或枯死的现象？在病穗颖壳合缝处是否见到粉 红色胶质霉层（分生孢子座及分生孢子）？有时在粉红色霉层处可见蓝黑色小颗粒（子囊壳）。 观察受害籽粒的形态、大小，特别是种皮色泽上有何改变？ 2、病原菌观察： 病原菌有性态为玉蜀黍赤霉(Gibberella zeae(Schw.)Petch)子囊菌亚门赤霉属，无性 态为禾谷镰孢（Fusarium graminearum Schw.,),半知菌亚门镰孢属。 2.1分生孢子的观察： 挑取病穗上的粉红色粘质物少许制片，在显微镜下观察分生孢子的形态、大小、有无隔 膜？ 2.2子囊壳及其子囊孢子的观察： 挑取霉层处的黑色小粒物制片镜检。观察子囊壳的形态、结构。注意是否在子囊壳顶端 锥状突起有一孔口？轻压片使子囊壳破裂，观察子囊及子囊孢子的形态、结构特征
2、病原菌形态观察 麦类白粉病病原菌有性态为禾布氏白粉菌（ Blumeria graminis (DC.) Speer ），危害小 麦的是禾布氏白粉菌小麦专化型（ B. graminis f.sp.tritici ），子囊菌亚门布氏白粉菌属；无 性态为串珠粉状孢（Oidium monilioides Nees），半知菌亚门粉孢属。 2.1 菌丝体及分生孢子的观察： 用镊子撕取带有粉霉堆的新鲜麦叶表皮制片。或用现成玻片标本在显微镜下观察。观察 表皮上病菌菌丝体以及分生孢子梗的形态、颜色。观察串生于分生孢子梗顶端的分生孢子， 描述其颜色、形态。 2.2 闭囊壳及其子囊孢子的观察： 用制好的玻片标本或在示范镜下观察，黑色无孔口的球状结构为病菌的闭囊壳，在壳的 表面有丝状物－附属丝。在压破的子囊壳处，可见子囊和子囊孢子，观察其颜色、形态。 小麦白粉病（一） 小麦白粉病（二） 小麦白粉病病原 （三）小麦赤霉病 1、症状观察： 主要发生在穗期，造成穗腐。取小麦赤霉病病株，先观察穗部部分小穗在颜色上有何改 变？穗部是否有干瘪籽粒？穗部是否有变色或枯死的现象？在病穗颖壳合缝处是否见到粉 红色胶质霉层（分生孢子座及分生孢子）？有时在粉红色霉层处可见蓝黑色小颗粒（子囊壳）。 观察受害籽粒的形态、大小，特别是种皮色泽上有何改变？ 2、病原菌观察： 病原菌有性态为玉蜀黍赤霉（Gibberella zeae (Schw.) Petch ）子囊菌亚门赤霉属，无性 态为禾谷镰孢（Fusarium graminearum Schw.），半知菌亚门镰孢属。 2.1 分生孢子的观察： 挑取病穗上的粉红色粘质物少许制片，在显微镜下观察分生孢子的形态、大小、有无隔 膜？ 2.2 子囊壳及其子囊孢子的观察： 挑取霉层处的黑色小粒物制片镜检。观察子囊壳的形态、结构。注意是否在子囊壳顶端 锥状突起有一孔口？轻压片使子囊壳破裂，观察子囊及子囊孢子的形态、结构特征