1492 自然科学进展第17卷第11期2007年11月 中国大鲵( andrias davidianus)的胚胎发育 骆剑¨肖亚梅¨罗凯坤黄小西彭亮跃刘筠 湖南师范大学生命科学学院,教育部蛋白质化学和鱼类发育生物学重点实验室 410081 摘要对中国大鲵( andrias davidianus)胚胎发育过程的外部形态及器官发育特点进行了详细地 描述,为中国大鲵胚胎发育制定出完整的分期标准.中国大鲵胚胎发育过程依据形态学和组织学 特征可以划分为6个阶段:卵裂阶段、囊胚阶段、原肠胚阶段、神经胚阶段、器官形成阶段、孵 化阶段,共20个时期.从整体上来看,中国大鲵的胚胎发育特征与东方蝾螈( Cynops orientalis)、 黑斑蛙(R. ni gromaculata)大体相似,主要的差异表现在早期卵裂方式以及消化系统的发育方面 形态学及组织学观察表明,中国大鲵卵裂并非盘状卵裂类型.同时,中国大鲵胚胎发育过程中前 三次卵裂均为经裂,胚胎消化系统的发生发育迟缓,无平衡器或口吸盘等,这些均为中国大鲵胚 胎发育的显著特点 关键词中国大鲵胚胎发育卵裂器官发生 两栖类是脊椎动物由水生到陆生的过渡类型, 两栖动物胚胎学研究对探索脊椎动物进化及比较胚1材料与方法 胎学具有重要意义.目前,两栖类胚胎学的研究主1.1实验材料 要集中于无尾目及有尾目蝾螈科,蔡堡为东方蝾 中国大鲵人工催产及孵化是在本研究室大鲵人 螈胚胎发育建立了分期系统,绘制了翔实的外形及工繁育基地进行的.已达性成熟亲本通过人工催 器官发育图谱.有尾目隐鳃鲵科系进化过程中残留产、人工授精获得受精卵.受精卵在地下室孵化池 的古生物类群,现仅存3种:北美大鲵、日本大中流水孵化(水温(20±1)℃,溶解氧(5±1)mg/L 鲵和中国大鲵( Andrias davidianus).北美大鲵和pH值74-7.6),每日平均光照大约lh,照度为4lx 日本大鲵未见有胚胎发育相关的研究报道,有关中 1.2研究方法 国大鲵胚胎学研究3仅局限于对外形的初步观察 外形观察的方法为:受精后多细胞期,每2小 胚胎发育时期的划分不清晰,同时缺乏组织器官发时观察记录一次;囊胚期尾芽期,约每8小时观察 生发育的研究近年来作者所在研究室在成功开展记录一次;鰓板期孵化出膜,约12h观察记录 中国大鲵人工繁殖基础上,对中国大鲵胚胎发育进次胚胎发育时期的确定基本上以同批胚胎1/2达 行了连续、系统的形态以及组织学观察,在中国大到该时期为准,2003-200年期间共观察统计了 鲵早期卵裂及器官的发生发育方面获得了新的认 余枚胚胎 识,为研究隐鳃鲵科其他物种及两栖类系统进化奠 组织学研究采用所拍照记录的胚胎,具体方法 定了基础 为:卵裂阶段每个时期取2枚胚胎;囊胚和原肠胚 2007-0326收稿,2007-0424收修改稿 国家自然科学基金(批准号:30450006)和湖南省教育厅(批准号:06B055资助项目 等贡献作者 **通信作者,Emal: - chunn.edu.cn 201994-2009chinaAcademicJournaleLectronicPublishingHouse.Allrightsreservedhttp://www.cnki.net
自然科学进展 第 17 卷 第 11 期 2007 年 11 月 中国大鲵( Andrias davidia nus) 的胚胎发育3 骆 剑3 3 肖亚梅3 3 罗凯坤 黄小西 彭亮跃 刘 筠3 3 3 湖南师范大学生命科学学院 , 教育部蛋白质化学和鱼类发育生物学重点实验室 , 长沙 410081 2007203226 收稿 , 2007204224 收修改稿 3 国家自然科学基金(批准号 : 30450006) 和湖南省教育厅(批准号 : 06B055) 资助项目 3 3 同等贡献作者 3 3 3 通信作者 , E2mail : Liuyun @hunnu. edu. cn 摘要 对中国大鲵( A n d ri as d avi di anus) 胚胎发育过程的外部形态及器官发育特点进行了详细地 描述 , 为中国大鲵胚胎发育制定出完整的分期标准. 中国大鲵胚胎发育过程依据形态学和组织学 特征可以划分为 6 个阶段 : 卵裂阶段、囊胚阶段、原肠胚阶段、神经胚阶段、器官形成阶段、孵 化阶段 , 共 20 个时期. 从整体上来看 , 中国大鲵的胚胎发育特征与东方蝾螈( Cy nops orient alis) 、 黑斑蛙( R. ni g romacul ata) 大体相似 , 主要的差异表现在早期卵裂方式以及消化系统的发育方面. 形态学及组织学观察表明 , 中国大鲵卵裂并非盘状卵裂类型. 同时 , 中国大鲵胚胎发育过程中前 三次卵裂均为经裂 , 胚胎消化系统的发生发育迟缓 , 无平衡器或口吸盘等 , 这些均为中国大鲵胚 胎发育的显著特点. 关键词 中国大鲵 胚胎发育 卵裂 器官发生 两栖类是脊椎动物由水生到陆生的过渡类型 , 两栖动物胚胎学研究对探索脊椎动物进化及比较胚 胎学具有重要意义. 目前 , 两栖类胚胎学的研究主 要集中于无尾目及有尾目蝾螈科 , 蔡堡[1 ] 为东方蝾 螈胚胎发育建立了分期系统 , 绘制了翔实的外形及 器官发育图谱. 有尾目隐鳃鲵科系进化过程中残留 的古生物类群[2 ] , 现仅存 3 种 : 北美大鲵、日本大 鲵和中国大鲵 ( A n d ri as d avi di anus) . 北美大鲵和 日本大鲵未见有胚胎发育相关的研究报道 , 有关中 国大鲵胚胎学研究[3 —5 ]仅局限于对外形的初步观察 , 胚胎发育时期的划分不清晰 , 同时缺乏组织器官发 生发育的研究. 近年来作者所在研究室在成功开展 中国大鲵人工繁殖基础上 , 对中国大鲵胚胎发育进 行了连续、系统的形态以及组织学观察 , 在中国大 鲵早期卵裂及器官的发生发育方面获得了新的认 识 , 为研究隐鳃鲵科其他物种及两栖类系统进化奠 定了基础. 1 材料与方法 1. 1 实验材料 中国大鲵人工催产及孵化是在本研究室大鲵人 工繁育基地进行的. 已达性成熟亲本通过人工催 产、人工授精获得受精卵. 受精卵在地下室孵化池 中流水孵化(水温(20 ±1) ℃, 溶解氧(5 ±1) mg/ L , p H 值 7. 4 —7. 6) , 每日平均光照大约 1 h , 照度为 4lx. 1. 2 研究方法 外形观察的方法为 : 受精后2多细胞期 , 每 2 小 时观察记录一次 ; 囊胚期2尾芽期 , 约每 8 小时观察 记录一次 ; 鳃板期2孵化出膜 , 约 12 h 观察记录一 次. 胚胎发育时期的确定基本上以同批胚胎 1/ 2 达 到该时期为准 , 2003 —2005 年期间共观察统计了 1100 余枚胚胎. 组织学研究采用所拍照记录的胚胎 , 具体方法 为 : 卵裂阶段每个时期取 2 枚胚胎 ; 囊胚和原肠胚 1492
自然科学进展第17卷第11期2007年11月 1493 各取3枚胚胎;神经胚各时期分别取2枚胚胎;器 表1中国大鲵胚胎发育分期表 官形成阶段每日取1-2枚胚胎.共取得大鲵胚胎 发育阶段胚胎发育发生时间/h 时期(受精开始) 胚胎发育分期标志 56枚,早期胚胎采用 Smith’s液固定,常规酒精- 卵裂阶段二细胞期18-22受精卵分裂 叔丁醇脱水,前肢芽期后的胚胎采用 Bouin’s液固 四细胞期22-262条分裂沟出现 定,常规酒精脱水,石蜡包埋,切片(厚度6 八细胞期26-304条分裂沟出现 10μm),常规HE染色 多细胞期30-48卵裂腔出现 形态观察及照像采用 Nikon smz800体视镜摄 囊胚阶段囊胚早期48-90囊胚腔出现 像系统, Olympusⅹ-Ⅱ型照相机体视显微照相 囊胚晚期90-128囊胚腔扩大,囊胚腔顶壁为 2→3层细胞 系统和 Sony rI数码相机;显微切片观察及照像采原肠胚原肠早期128-72新月沟/背唇出现 用 Nikon e600显微图像采集系统 阶段原肠中期172-216原肠腔扩大,侧唇出现 分期系统的建立依据中国大鲵胚胎发育各阶段 原肠晚期216-240囊胚腔消失,卵黄栓形成 获得的外形记录及图片,结合组织学切片结果,分 神经胚神经板期240-256神经板/原体节腔出现 阶段神经褶期256-280形成神经褶,体节出现 析其外形变化及主要器官发生发育变化特征,并划 神经管期280-300前、后脑分化,视泡咽肾管 分具体发育时期.分期标准参考东方蝾螈和黑斑 蛙16的分期方法 器官形成尾芽期300-356心脏原基出现,尾芽形成 鳃板期356-412鳃板形成,体色素出现,心房 2实验结果 心室分化 前肢芽412-468听囊中脑菱脑鳃芽/肝脏 中国大鲵胚胎发育可分为6个阶段,共20个发 前肢芽出现,心脏开始搏动,脊 索开始空泡 育时期(见表1) 前肢芽468-516晶状体/嗅窝/甲状腺出现 2.1卵裂阶段 鳃血循环516-540眼色素形成,鳃血循环出现,腹 中国大鲵卵子大多直径为5-8mm,不含色 部形成透明血管网 素,卵黄含量非常丰富,卵子呈卵黄色,动物极附 鳃血循环540-5%6外鳃芽分支增多,下颌/胃出 现,体色素丰富 近颜色稍浅.卵子外裹有胶膜,入水后胶膜吸水膨 尾血循5%6-676晶状体透明,外鳃呈羽状,尾血 胀,卵周隙明显扩大 循环明显,色素在腹部广泛分布 受精后20h左右,动物极出现一条分裂沟,第孵化阶段后肢芽期676-768后肢芽/肛门出现,背部出现皮 一次卵裂开始.第一次卵裂为经裂(图1(a),分裂 沟在动物极端较深,随着分裂进行,分裂沟缓慢地 向下延伸并越来越浅,越过赤道面后消失在植物半2.2囊胚阶段 球,第一次分裂完成大约需要4-8h.第二条分裂 从第三天开始胚胎发育进入囊胚期.囊胚期胚 沟在第一条分裂沟出现大约2h后出现,第二次分体呈球状(图1(e),(f),在近动物极端出现一个 裂亦为经裂,与第一次分裂面垂直(图1(b).第三大的空腔,此即囊胚腔(图2(a),在植物半球可见 次卵裂仍为经裂,并且有两个相互垂直的经裂面.较多呈龟裂状分裂沟.囊胚腔顶端的细胞界限不清 前三次分裂在动物极端呈现“米”字形(图1(c),晰,但可见细胞核,卵黄颗粒也较细密,卵黄含量 随后的第四次分裂为纬裂,分裂面靠近动物极顶较少;囊胚腔底端植物半球细胞大,可见细胞核 端,并且分裂在各个卵裂球不是同时进行的,分裂(图2(b),周围卵黄密布 速度出现明显差异,细胞的排列也不规则.在最初 2.3原肠胚阶段 的几次分裂中,动物半球每隔2-4h就会产生一条 从第六天开始,胚胎赤道面稍下方出现一道浅 分裂沟,之后胚胎的分裂速度逐渐加快,分裂沟在 的横沟,沟的上方为背唇(图1(g),(h);图2(c) 动物半球越来越多,在植物半球只能依稀看见数条 浅分裂沟 201994-2009ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouse.Allrightsreservedhttp://www.cnki.net
各取 3 枚胚胎 ; 神经胚各时期分别取 2 枚胚胎 ; 器 官形成阶段每日取 1 —2 枚胚胎. 共取得大鲵胚胎 56 枚 , 早期胚胎采用 Smit h’s 液固定 , 常规酒精2 叔丁醇脱水 , 前肢芽期后的胚胎采用 Bouin’s 液固 定 , 常规酒精脱水 , 石蜡包埋 , 切片 (厚度 6 — 10μm) , 常规 H E 染色. 形态观察及照像采用 Nikon SMZ800 体视镜摄 像系统 , Olymp us XTL2Ⅱ型照相机体视显微照相 系统和 Sony R1 数码相机 ; 显微切片观察及照像采 用 Nikon E600 显微图像采集系统. 分期系统的建立依据中国大鲵胚胎发育各阶段 获得的外形记录及图片 , 结合组织学切片结果 , 分 析其外形变化及主要器官发生发育变化特征 , 并划 分具体发育时期. 分期标准参考东方蝾螈[1 ] 和黑斑 蛙[6 ]的分期方法. 2 实验结果 中国大鲵胚胎发育可分为 6 个阶段 , 共 20 个发 育时期(见表 1) . 2. 1 卵裂阶段 中国大鲵卵子大多直径为 5 —8 mm , 不含色 素 , 卵黄含量非常丰富 , 卵子呈卵黄色 , 动物极附 近颜色稍浅. 卵子外裹有胶膜 , 入水后胶膜吸水膨 胀 , 卵周隙明显扩大. 受精后 20 h 左右 , 动物极出现一条分裂沟 , 第 一次卵裂开始. 第一次卵裂为经裂(图 1 (a) ) , 分裂 沟在动物极端较深 , 随着分裂进行 , 分裂沟缓慢地 向下延伸并越来越浅 , 越过赤道面后消失在植物半 球 , 第一次分裂完成大约需要 4 —8 h. 第二条分裂 沟在第一条分裂沟出现大约 2 h 后出现 , 第二次分 裂亦为经裂 , 与第一次分裂面垂直(图 1 ( b) ) . 第三 次卵裂仍为经裂 , 并且有两个相互垂直的经裂面. 前三次分裂在动物极端呈现“米”字形 (图 1 (c) ) , 随后的第四次分裂为纬裂 , 分裂面靠近动物极顶 端 , 并且分裂在各个卵裂球不是同时进行的 , 分裂 速度出现明显差异 , 细胞的排列也不规则. 在最初 的几次分裂中 , 动物半球每隔 2 —4 h 就会产生一条 分裂沟 , 之后胚胎的分裂速度逐渐加快 , 分裂沟在 动物半球越来越多 , 在植物半球只能依稀看见数条 浅分裂沟. 表 1 中国大鲵胚胎发育分期表 发育阶段 胚胎发育 时期 发生时间/ h (受精开始) 胚胎发育分期标志 卵裂阶段 二细胞期 18 —22 受精卵分裂 四细胞期 22 —26 2 条分裂沟出现 八细胞期 26 —30 4 条分裂沟出现 多细胞期 30 —48 卵裂腔出现 囊胚阶段 囊胚早期 48 —90 囊胚腔出现 囊胚晚期 90 —128 囊胚腔扩大 , 囊胚腔顶壁为 2 —3 层细胞 原肠胚 阶段 原肠早期 128 —172 新月沟/ 背唇出现 原肠中期 172 —216 原肠腔扩大 ,侧唇出现 原肠晚期 216 —240 囊胚腔消失 ,卵黄栓形成 神经胚 阶段 神经板期 240 —256 神经板/ 原体节腔出现 神经褶期 256 —280 形成神经褶 ,体节出现 神经管期 280 —300 前、后脑分化 ,视泡/ 咽/ 肾管/ 肠出现 器官形成 阶段 尾芽期 300 —356 心脏原基出现 ,尾芽形成 鳃板期 356 —412 鳃板形成 ,体色素出现 ,心房/ 心室分化 前肢芽 早期 412 —468 听囊/ 中脑/ 菱脑/ 鳃芽/ 肝脏/ 前肢芽出现 ,心脏开始搏动 ,脊 索开始空泡化 前肢芽 晚期 468 —516 晶状体/ 嗅窝/ 甲状腺出现 鳃血循环 早期 516 —540 眼色素形成 ,鳃血循环出现 ,腹 部形成透明血管网 鳃血循环 晚期 540 —596 外鳃芽分支增多 ,下颌/ 胃出 现 ,体色素丰富 尾血循 环期 596 —676 晶状体透明 ,外鳃呈羽状 ,尾血 循环明显 ,色素在腹部广泛分布 孵化阶段 后肢芽期 676 —768 后肢芽/ 肛门出现 ,背部出现皮 肤腺 2. 2 囊胚阶段 从第三天开始胚胎发育进入囊胚期. 囊胚期胚 体呈球状 (图 1 (e) , (f) ) , 在近动物极端出现一个 大的空腔 , 此即囊胚腔(图 2 (a) ) , 在植物半球可见 较多呈龟裂状分裂沟. 囊胚腔顶端的细胞界限不清 晰 , 但可见细胞核 , 卵黄颗粒也较细密 , 卵黄含量 较少 ; 囊胚腔底端植物半球细胞大 , 可见细胞核 (图 2 (b) ) , 周围卵黄密布. 2. 3 原肠胚阶段 从第六天开始 , 胚胎赤道面稍下方出现一道浅 的横沟 ,沟的上方为背唇 (图1 ( g) , ( h) ;图2 ( c) ) , 自然科学进展 第 1493 17 卷 第 11 期 2007 年 11 月
1494 自然科学进展第17卷第11期2007年11月 图1中国大鲵胚胎发育外形图 (a)二细胞期;(b)四细胞期;(c)八细胞期,箭头示分裂沟;(d)多细胞期;(e)囊胚早期;(f)囊胚晚期 (g)原肠早期顶面观;(h)原肠早期侧面观(固定后的胚胎);ω)原肠晚期腹面观;()神经板期,NP示神经板; (k)神经褶期,箭头示神经褶;(1)正在愈合的神经胚尾端,长箭头示胚孔,短箭头示神经管;(m)神经管期 箭头示体节,短箭头示神经管;(n)尾芽期,箭头示突出的尾芽;(o)鳃板期,箭头示隆起的鳃板,短箭头示心脏 位置;(p)前肢芽早期,箭头示鳃芽,短箭头示前肢芽;(q)前肢芽晩期;(r),(s)鳃血循环期,黑箭头示外鳃, 白箭头示下颌;(t)尾血循环期,白箭头示尾血管,黑箭头示腹部色素;(u)后肢芽期,箭头示后肢芽,短箭头示 羽状外鳃 201994-2009ChinaacAdemicJournalElectronicPublishingHouse.Allrightsreservedhttp://www.cnki.net
图 1 中国大鲵胚胎发育外形图 (a) 二细胞期 ; (b) 四细胞期 ; (c) 八细胞期 , 箭头示分裂沟 ; (d) 多细胞期 ; (e) 囊胚早期 ; (f) 囊胚晚期 ; (g) 原肠早期顶面观 ; (h) 原肠早期侧面观(固定后的胚胎) ; (i) 原肠晚期腹面观 ; (j) 神经板期 , NP 示神经板 ; (k) 神经褶期 , 箭头示神经褶 ; (l) 正在愈合的神经胚尾端 , 长箭头示胚孔 , 短箭头示神经管 ; (m) 神经管期 , 箭头示体节 , 短箭头示神经管 ; (n) 尾芽期 , 箭头示突出的尾芽 ; (o) 鳃板期 , 箭头示隆起的鳃板 , 短箭头示心脏 位置 ; (p) 前肢芽早期 , 箭头示鳃芽 , 短箭头示前肢芽 ; (q) 前肢芽晚期 ; (r) , (s) 鳃血循环期 , 黑箭头示外鳃 , 白箭头示下颌 ; (t) 尾血循环期 , 白箭头示尾血管 , 黑箭头示腹部色素 ; (u) 后肢芽期 , 箭头示后肢芽 , 短箭头示 羽状外鳃 1494 自然科学进展 第 17 卷 第 11 期 2007 年 11 月
自然科学进展第17卷第11期2007年11月 0.2mm (1) 0.4m (m) 图2中国大鲵胚胎发育组织显微图 (a)囊胚期横切切片,BC示囊胚腔,箭头示囊胚腔顶壁细胞,红色区域放大为(b)图;(b)囊胚植物半球放大,箭头示 细胞核;(c)原肠胚早期切片,BC示囊胚腔,箭头示背唇,背唇左侧的空腔是由于卵黄脱落造成的假象,并非原肠腔, 红色区域放大为(d)图;(d)原肠胚背唇,箭头示细胞核;(e)原肠胚晚期纵切切片,箭头示背唇;(f)神经板期横切 箭头示神经板;(g)神经板细胞放大,短箭头示细胞核,箭头示卵黄颗粒;(h)神经褶期横切切片;(神经褶部位放 大图,N示细胞核,箭头示卵黄颗粒;()神经管期头部纵切切片,箭头示眼泡,F示前脑,HB示后脑;(k)神经管 期胸部横切切片,箭头示体节,短箭头示实心的脊索,NT示神经管,P示咽;()神经管期腹部横切切片,箭头示脊 索,1示肠;(m)尾芽期胸部横切切片,H示心脏原基;(n)鰓板期头部横切切片,箭头示鳃板,短箭头示脊索;(o)鰓 板期胸部横切切片,箭头示心房心室 601994-2009ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouse.Allrightsreservedhttp://www.cnki.net
图 2 中国大鲵胚胎发育组织显微图 (a) 囊胚期横切切片 , BC 示囊胚腔 , 箭头示囊胚腔顶壁细胞 , 红色区域放大为(b) 图 ; (b) 囊胚植物半球放大 , 箭头示 细胞核 ; (c) 原肠胚早期切片 , BC 示囊胚腔 , 箭头示背唇 , 背唇左侧的空腔是由于卵黄脱落造成的假象 , 并非原肠腔 , 红色区域放大为(d) 图 ; (d) 原肠胚背唇 , 箭头示细胞核 ; (e) 原肠胚晚期纵切切片 , 箭头示背唇 ; (f) 神经板期横切 , 箭头示神经板 ; (g) 神经板细胞放大 , 短箭头示细胞核 , 箭头示卵黄颗粒 ; (h) 神经褶期横切切片 ; (i) 神经褶部位放 大图 , N 示细胞核 , 箭头示卵黄颗粒 ; (j) 神经管期头部纵切切片 , 箭头示眼泡 , FB 示前脑 , HB 示后脑 ; (k) 神经管 期胸部横切切片 , 箭头示体节 , 短箭头示实心的脊索 , N T 示神经管 , P 示咽 ; (l) 神经管期腹部横切切片 , 箭头示脊 索 , I 示肠 ; (m) 尾芽期胸部横切切片 , H 示心脏原基 ; (n) 鳃板期头部横切切片 , 箭头示鳃板 , 短箭头示脊索; (o) 鳃 板期胸部横切切片 , 箭头示心房心室 自然科学进展 第 1495 17 卷 第 11 期 2007 年 11 月
1496 自然科学进展第17卷第11期2007年11月 胚胎发育进入原肠期在接下来的几天里,背唇由分裂加快,可见众多细胞核(图3(g)) 短的浅沟逐渐拉长成为大圆弧,原肠腔扩大囊胚腔 鳃血循环期:心脏-外鳃的循环开始,心率 消失(图2(e)),胚轴逐渐转动.圆弧形的胚孔最后40-50;头部及外鳃发达(图1(s);图3(h),(i)) 合并为环状(图1(i),中间充塞着大的卵黄栓,受每根外鳃芽上分出3-5对分枝,可以观察到透明 精后10d左右卵黄栓转至尾部慢慢缩小,并在神经的毛细血管中有红细胞流动;腹部出现网状血管分 管闭合时消失 布;眼出现少许色素,头部、背部的色素成片分布 2.4神经胚阶段 (图1(r),(s).鳃血循环晚期时,心率50-55 神经板期:胚胎背部出现前端宽大、后端细长每根鳃芽分枝5-8对;眼色素连成环状,腹部色 素增多;前肢芽呈现尖细状;下颌及胃出现(图3 的勺状神经板(图1();图2m),神经板及其周围 的组织依然含有丰富的卵黄(图2(g) (j)) 神经褶期:神经板边缘高举出现神经褶(图1 尾血循环期:可见明显尾部血液循环;下颌裂 (k);图2(h).在神经褶期的稍晚阶段出现体节 延长,可以活动;脑壁增厚,晶状体变透明,体色 大约6-8对.神经褶细胞中充斥着大量卵黄(图 素在腹部广泛分布(图1(t);图3(k),(1).此阶 (i).神经褶沿胚胎背中部汇聚中间下陷,彼此黏 段的幼苗肌肉、骨骼发达,运动频繁,常提前脱 附、融合形成中空的神经管 膜.该时期脱膜的幼鲵存活率较高,而在此时期之 神经管期:神经管闭合(图1(m)),胚胎在胶前出膜的幼苗大部分死亡 膜内开始侧卧.神经管头部膨大离开卵面突出,并2.6孵化期(后肢芽期) 出现凸凹不平的隆起;体节大约10-12对,体节 受精后历经31d,每根外鳃上有6-8对鳃丝分 下方出现肾原基.神经管头部可见视泡、前脑和后枝,呈羽状,心率每分钟约55次;头背部色素 脑(图2(j);稍后部位可见咽、咽囊、脊索和肾管血管密布,呈现黑红色;腹部卵黄细胞区有一半区 (图2(k));胚胎后端的肠呈现细长条状(图2().域出现色素;后肢芽出现并伸长,皮肤腺(图3 2.5器官形成阶段 (m)、肛门出现(图1(u);图3(n),(o));前肢芽 尾芽期:胚胎头部显著膨大,肉眼可分辨出眼增长增粗亦出现色素,出膜前后分为两趾;眼黑 泡,并且由于脑的发育,整个神经管伸长较快,因 亮;背鳍宽大,尾鳍狭长.胚胎胶膜松散并膨胀 幼鲵不断扭动,头部突破胶囊最后完全脱膜.刚出 此产生弯曲,脑部向下弯曲约成90°角,成为脑曲 膜的幼苗长约3.5cm,背部黑褐色,腹部细胞仍然 尾部形成尾芽并离开卵面突出(图1(n);心脏原基 含有丰富卵黄,外鳃发达每侧长约1cm,无平衡 出现(图2(m)) 鰓板期:眼泡突出,周围凹陷;鳃板原基隆起棒,无口吸盘.静止时平卧或侧卧于水底,依靠尾 逐渐分化为鳃弓(图1(o);图2(n);胸腔更加膨部摆动可以平游 孵化出膜后大约一个月,中国大鲵幼苗前后肢 大,心脏分化为心房和心室(图2(o));体节24对 体表尤其是背部区域出现色素斑点;尾芽末端细 的伸长、分趾逐渐完成,腹部卵黄也会消耗殆尽 随着生长发育,肺也逐渐发育,外鳃在出膜后大约 前肢芽期:前肢芽出现原基;鳃板部位分化出8个月开始萎缩,最终完全消失而由肺成为唯一的 呼吸器官大约需要1-2年的时间 3对短小的外鳃芽(图1(p),(q);图3(c),(d) (门));胸腔透明化,心脏浅色并开始跳动,每分钟 25次左右;胚体可以缓慢扭动.视杯、晶状体、嗅 讨论 窝出现(图3(a));听囊、中脑、菱脑、脑神经节出3.1关于中国大鲵的卵裂方式 现,甲状腺出现,脊索开始空泡化,肝脏出现(图3 之前有报道认为:中国大鲵卵子受精后形成白 (b),(c),(e).3对外鳃芽增长并长出分枝;体色帽状胚盘,分裂仅限于胚盘,属于典型的盘状卵 色素增多;心律30-40;同时富含卵黄的腹部细胞裂.作者近三年对大鲵早期胚胎的观察发现 o1994-2009ChinaAcademicJOurnaleLectronicPublishingHouse.Allrightsreservedhttp://www.cnki.net
胚胎发育进入原肠期. 在接下来的几天里 , 背唇由 短的浅沟逐渐拉长成为大圆弧 , 原肠腔扩大囊胚腔 消失(图 2 (e) ) , 胚轴逐渐转动. 圆弧形的胚孔最后 合并为环状(图 1 (i) ) , 中间充塞着大的卵黄栓 , 受 精后 10 d 左右卵黄栓转至尾部慢慢缩小 , 并在神经 管闭合时消失. 2. 4 神经胚阶段 神经板期 : 胚胎背部出现前端宽大、后端细长 的勺状神经板(图 1 (j) ; 图 2 (f) ) , 神经板及其周围 的组织依然含有丰富的卵黄(图 2 (g) ) . 神经褶期 : 神经板边缘高举出现神经褶 (图 1 (k) ; 图 2 (h) ) . 在神经褶期的稍晚阶段出现体节 , 大约 6 —8 对. 神经褶细胞中充斥着大量卵黄 (图 2 (i) ) . 神经褶沿胚胎背中部汇聚中间下陷 , 彼此黏 附、融合形成中空的神经管. 神经管期 : 神经管闭合 (图 1 (m) ) , 胚胎在胶 膜内开始侧卧. 神经管头部膨大离开卵面突出 , 并 出现凸凹不平的隆起 ; 体节大约 10 —12 对 , 体节 下方出现肾原基. 神经管头部可见视泡、前脑和后 脑(图 2 (j) ) ; 稍后部位可见咽、咽囊、脊索和肾管 (图 2 (k) ) ; 胚胎后端的肠呈现细长条状(图 2 (l) ) . 2. 5 器官形成阶段 尾芽期 : 胚胎头部显著膨大 , 肉眼可分辨出眼 泡 , 并且由于脑的发育 , 整个神经管伸长较快 , 因 此产生弯曲 , 脑部向下弯曲约成 90°角 , 成为脑曲 , 尾部形成尾芽并离开卵面突出(图 1 (n) ) ; 心脏原基 出现(图 2 (m) ) . 鳃板期 : 眼泡突出 , 周围凹陷 ; 鳃板原基隆起 逐渐分化为鳃弓 (图 1 (o) ; 图 2 ( n) ) ; 胸腔更加膨 大 , 心脏分化为心房和心室(图 2 (o) ) ; 体节 24 对 ; 体表尤其是背部区域出现色素斑点 ; 尾芽末端细 圆. 前肢芽期 : 前肢芽出现原基 ; 鳃板部位分化出 3 对短小的外鳃芽 (图 1 (p ) , ( q) ; 图 3 (c) , ( d) , (f) ) ; 胸腔透明化 , 心脏浅色并开始跳动 , 每分钟 25 次左右 ; 胚体可以缓慢扭动. 视杯、晶状体、嗅 窝出现(图 3 (a) ) ; 听囊、中脑、菱脑、脑神经节出 现 , 甲状腺出现 , 脊索开始空泡化 , 肝脏出现(图 3 (b) , (c) , (e) ) . 3 对外鳃芽增长并长出分枝 ; 体 色素增多 ; 心律 30 —40 ; 同时富含卵黄的腹部细胞 分裂加快 , 可见众多细胞核(图 3 (g) ) . 鳃血循 环期 : 心脏2外鳃 的循环 开始 , 心率 40 —50 ; 头部及外鳃发达 (图 1 (s) ; 图 3 ( h) , (i) ) 每根外鳃芽上分出 3 —5 对分枝 , 可以观察到透明 的毛细血管中有红细胞流动 ; 腹部出现网状血管分 布 ; 眼出现少许色素 , 头部、背部的色素成片分布 (图 1 (r) , (s) ) . 鳃血循环晚期时 , 心率 50 —55 ; 每根鳃芽分枝 5 —8 对 ; 眼色素连成环状 , 腹部色 素增多 ; 前肢芽呈现尖细状 ; 下颌及胃出现 (图 3 (j) ) . 尾血循环期 : 可见明显尾部血液循环 ; 下颌裂 延长 , 可以活动 ; 脑壁增厚 , 晶状体变透明 , 体色 素在腹部广泛分布 (图 1 (t) ; 图 3 ( k) , (l) ) . 此阶 段的幼苗肌肉、骨骼发达 , 运动频繁 , 常提前脱 膜. 该时期脱膜的幼鲵存活率较高 , 而在此时期之 前出膜的幼苗大部分死亡. 2. 6 孵化期( 后肢芽期) 受精后历经 31 d , 每根外鳃上有 6 —8 对鳃丝分 枝 , 呈羽状 , 心率每分钟约 55 次 ; 头背部色素、 血管密布 , 呈现黑红色 ; 腹部卵黄细胞区有一半区 域出现色素 ; 后肢芽出现并伸长 , 皮肤腺 (图 3 (m) ) 、肛门出现(图 1 (u) ; 图 3 (n) , (o) ) ; 前肢芽 增长增粗亦出现色素 , 出膜前后分为两趾 ; 眼黑 亮 ; 背鳍宽大 , 尾鳍狭长. 胚胎胶膜松散并膨胀 , 幼鲵不断扭动 , 头部突破胶囊最后完全脱膜. 刚出 膜的幼苗长约 3. 5 cm , 背部黑褐色 , 腹部细胞仍然 含有丰富卵黄 , 外鳃发达每侧长约 1 cm , 无平衡 棒 , 无口吸盘. 静止时平卧或侧卧于水底 , 依靠尾 部摆动可以平游. 孵化出膜后大约一个月 , 中国大鲵幼苗前后肢 的伸长、分趾逐渐完成 , 腹部卵黄也会消耗殆尽. 随着生长发育 , 肺也逐渐发育 , 外鳃在出膜后大约 8 个月开始萎缩 , 最终完全消失而由肺成为唯一的 呼吸器官大约需要 1 —2 年的时间. 3 讨论 3. 1 关于中国大鲵的卵裂方式 之前有报道认为 : 中国大鲵卵子受精后形成白 色帽状胚盘 , 分裂仅限于胚盘 , 属于典型的盘状卵 裂[ 3 —5 ] . 作者近三年对大鲵早期胚胎的观察发现 : 1496 自然科学进展 第 17 卷 第 11 期 2007 年 11 月
自然科学进展第17卷第11期2007年11月 1497 (g) 02m 0.2 mm 0.4mm 图3中国大鲵胚胎发育组织显微图 (a)前肢芽期头部纵切切片,RB示菱脑,箭头示嗅窝,短箭头示视杯及晶状体;(b)前肢芽头部横切切片,A示听纟 短箭头示脑神经,可见空泡化的脊索;(c)前肢芽胸部横切切片,TG示甲状腺,P示咽,BB示鳃芽;(d)前肢芽胸部横切 切片,箭头示心脏,短箭头示鰓芽,I示肠;(e)前肢芽腹部横切切片,L示肝;(f)前肢芽腹部横切切片,箭头示神经嵴, 短箭头示肾管,HL示前肢芽;(g)前肢芽期腹部富含卵黄组织切片,箭头示细胞核,短箭头示卵黄颗粒;(h)鳃血循环期 部纵切切片;()鰓血循环期胸部横切切片,箭头示鰓芽及鳃丝,短箭头示脑神经;(鰓血循环期腹部横切切片,ST示 胃;(k)尾血循环期头部横切切片,箭头示透明的晶状体,OP示嗅窝,RB示发达的菱脑;(1)尾血循环期腹部横切切片 L示肝脏;(m)后肢期横切切片,箭头示背部皮肤腺;(n)后肢芽期后肢芽处横切切片,箭头示后肢芽;(o)后肢芽期肛门 处横切切片,箭头示肛门 501994-2009ChinaAcademicjOurnalElectronicPublishingHouseAlrightsreservedhttp://www.cnki.net
图 3 中国大鲵胚胎发育组织显微图 (a) 前肢芽期头部纵切切片 , RB 示菱脑 , 箭头示嗅窝 , 短箭头示视杯及晶状体 ; ( b) 前肢芽头部横切切片 , AV 示听囊 , 短箭头示脑神经 , 可见空泡化的脊索 ; (c) 前肢芽胸部横切切片 , TG示甲状腺 , P 示咽 , BB 示鳃芽 ; (d) 前肢芽胸部横切 切片 , 箭头示心脏 , 短箭头示鳃芽 , I 示肠 ; (e) 前肢芽腹部横切切片 , L 示肝 ; (f) 前肢芽腹部横切切片 , 箭头示神经嵴 , 短箭头示肾管 , FL 示前肢芽 ; (g) 前肢芽期腹部富含卵黄组织切片 , 箭头示细胞核 , 短箭头示卵黄颗粒 ; ( h) 鳃血循环期 头部纵切切片 ; (i) 鳃血循环期胸部横切切片 , 箭头示鳃芽及鳃丝 , 短箭头示脑神经 ; (j) 鳃血循环期腹部横切切片 , ST 示 胃 ; (k) 尾血循环期头部横切切片 , 箭头示透明的晶状体 , OP 示嗅窝 , RB 示发达的菱脑 ; (l) 尾血循环期腹部横切切片 , L 示肝脏 ; (m) 后肢期横切切片 , 箭头示背部皮肤腺 ; (n) 后肢芽期后肢芽处横切切片 , 箭头示后肢芽 ; (o) 后肢芽期肛门 处横切切片 , 箭头示肛门 自然科学进展 第 1497 17 卷 第 11 期 2007 年 11 月
l49 自然科学进展第17卷第11期2007年11月 中国大鲵卵子受精后,并未见明显的胚盘样隆起.卵裂方式是介于鱼类和两栖类之间的一种过渡类 受精卵分裂时,分裂沟自动物极端向下延伸至植物型.中国大鲵与施氏鲟早期卵裂过程十分相似,表 半球.在囊胚期的植物半球上可观察到一些浅龟裂明中国大鲵在进化上可能与硬骨鱼类存在有密切关 状的分裂沟,这一现象曾有过报道.中国大鲵系 胚胎没有出现卵黄囊结构,囊胚腔顶壁细胞中含有 在20℃水温下,从受精卵发育至囊胚早期多数 大量的卵黄,囊胚腔下方植物半球中可见许多细胞硬骨鱼类仅3h,黑斑蛙约6h,东方蝾螈约 核.同时,在神经胚、尾芽期、鳃板期和前肢芽期24h,而中国大鲵则需要约70h.中国大鲵早期 胚胎的外胚层来源细胞中均存在有丰富的卵黄颗胚胎细胞分裂速度非常缓慢,从而导致整个胚胎发 粒.盘状卵裂类型的分裂沟局限于胚盘,卵黄不参育持续时间长(约700h).在中国大鲵人工繁育生产 与胞质的分割η.观察结果表明,中国大鲵早期胚实践中,控制孵化温度、孵化密度,提高溶氧量 胎发育卵裂类型不是盘状卵裂,而与黑斑蛙、东方保持水体清洁和防止微生物侵染是提高中国大鲵孵 蝾螈的不等全裂方式更为相似.在中国大鲵早期胚化率的一个重要保证 胎切片中,特别在那些卵黄很丰富的组织中,细胞 界限不清晰,只能观察到大量的细胞核。我们注意3.2中国大鲵在器官发生发育上的特点 到,那些卵黄较少的外胚层组织比较容易分辨细胞 中国大鲵在脑的分化,眼、嗅窝、听囊、肾管 和生殖嵴的发生发育过程上与东方蝾螈口基本相同 界限,而随着卵黄持续消耗,那些原本分界模糊的 内胚层来源的组织其细胞界限也逐渐清晰起来.然(图4).在鳃板期二者都出现了心房心室,心脏搏 而中国大鲵早期胚胎细胞界限不清晰究竟是因为细 动血液循环也都是在前肢芽早期开始的,但中国大 胞质中卵黄对细胞结构观察的影响,抑或是由于丰 鲵心脏原基的出现要稍稍晩于东方蝾螈.中国大鲵 富卵黄对分裂面的阻遏作用,导致细胞质的分裂滞 在消化系统的发生发育上与东方蝾螈存在有较大的 后于核分裂,还需要进一步的深入研究 差异:东方蝾螈在神经管期、尾芽期和鳃板期分化 中国大鲵第一、二次卵裂均为经裂,第三次卵 出咽、肝脏和甲状腺,并且形成了肛门;而中国大 鲵在神经管期有咽和肠的形成,在此之后的较长时 裂仍为经裂,第四次卵裂为不规则的纬裂.这与黑 斑蛙与东方蝾螈前两次卵裂是经裂,第三次卵裂则 间内消化道没有明显发育变化,直到前肢芽期才形 为纬裂,第四次分裂是经裂存在着明显差异. 成肝脏和甲状腺,孵化期出现肛门.中国大鲵胚胎 施氏鲟( Acipenser Schrenckii)是一种以不等全裂方消化系统发育缓慢的特点可能与其胚胎细胞含有丰 式进行卵裂的硬骨鱼类,施氏鲟前三次卵裂为经富的卵黄密切相关.孵化出膜中国大鲵幼苗的组织 裂,第四次为纬裂,刘洪柏等认为施氏鲟的这种细胞中仍然含有大量卵黄,这些卵黄的存在为胚后 A.davidianus-HBheart TG Corientalis heart TG OP 神经管期尾芽期鳃板期前肢早期前肢芽晚期鳃循环早期鳃循环晚期尾血循环期后肢芽期 图4中国大鲵与东方蝾螈在相对应的发育时期出现的器官的比较图 PH咽;OV视泡;FB前脑;HB后脑;heat心脏;AT心房;VT心室;OP嗅窝;AV听囊; liver 肝脏;lens晶状体;TG甲状腺;ST胃;MD下颌;anus肛门 501994-2009ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouse.Allrightsreservedhtp//www.cnki.net
中国大鲵卵子受精后 , 并未见明显的胚盘样隆起. 受精卵分裂时 , 分裂沟自动物极端向下延伸至植物 半球. 在囊胚期的植物半球上可观察到一些浅龟裂 状的分裂沟 , 这一现象曾有过报道[4 ,5 ] . 中国大鲵 胚胎没有出现卵黄囊结构 , 囊胚腔顶壁细胞中含有 大量的卵黄 , 囊胚腔下方植物半球中可见许多细胞 核. 同时 , 在神经胚、尾芽期、鳃板期和前肢芽期 胚胎的外胚层来源细胞中均存在有丰富的卵黄颗 粒. 盘状卵裂类型的分裂沟局限于胚盘 , 卵黄不参 与胞质的分割[7 ] . 观察结果表明 , 中国大鲵早期胚 胎发育卵裂类型不是盘状卵裂 , 而与黑斑蛙、东方 蝾螈的不等全裂方式更为相似. 在中国大鲵早期胚 胎切片中 , 特别在那些卵黄很丰富的组织中 , 细胞 界限不清晰 , 只能观察到大量的细胞核. 我们注意 到 , 那些卵黄较少的外胚层组织比较容易分辨细胞 界限 , 而随着卵黄持续消耗 , 那些原本分界模糊的 内胚层来源的组织其细胞界限也逐渐清晰起来. 然 而中国大鲵早期胚胎细胞界限不清晰究竟是因为细 胞质中卵黄对细胞结构观察的影响 , 抑或是由于丰 富卵黄对分裂面的阻遏作用 , 导致细胞质的分裂滞 后于核分裂 , 还需要进一步的深入研究. 中国大鲵第一、二次卵裂均为经裂 , 第三次卵 裂仍为经裂 , 第四次卵裂为不规则的纬裂. 这与黑 斑蛙与东方蝾螈前两次卵裂是经裂 , 第三次卵裂则 为纬裂 , 第四次分裂是经裂[1 ,6 ] 存在着明显差异. 施氏鲟( A ci penser S chrenckii) 是一种以不等全裂方 式进行卵裂的硬骨鱼类 , 施氏鲟前三次卵裂为经 裂 , 第四次为纬裂 , 刘洪柏等[8 ] 认为施氏鲟的这种 卵裂方式是介于鱼类和两栖类之间的一种过渡类 型. 中国大鲵与施氏鲟早期卵裂过程十分相似 , 表 明中国大鲵在进化上可能与硬骨鱼类存在有密切关 系. 在 20 ℃水温下 , 从受精卵发育至囊胚早期多数 硬骨鱼类仅 3 h [9 ] , 黑斑蛙约 6 h [ 10 ] , 东方蝾螈约 24 h [11 ] , 而中国大鲵则需要约 70 h. 中国大鲵早期 胚胎细胞分裂速度非常缓慢 , 从而导致整个胚胎发 育持续时间长(约 700 h) . 在中国大鲵人工繁育生产 实践中 , 控制孵化温度、孵化密度 , 提高溶氧量 , 保持水体清洁和防止微生物侵染是提高中国大鲵孵 化率的一个重要保证. 3. 2 中国大鲵在器官发生发育上的特点 中国大鲵在脑的分化 , 眼、嗅窝、听囊、肾管 和生殖嵴的发生发育过程上与东方蝾螈[ 1 ] 基本相同 (图 4) . 在鳃板期二者都出现了心房心室 , 心脏搏 动血液循环也都是在前肢芽早期开始的 , 但中国大 鲵心脏原基的出现要稍稍晚于东方蝾螈. 中国大鲵 在消化系统的发生发育上与东方蝾螈存在有较大的 差异 : 东方蝾螈在神经管期、尾芽期和鳃板期分化 出咽、肝脏和甲状腺 , 并且形成了肛门 ; 而中国大 鲵在神经管期有咽和肠的形成 , 在此之后的较长时 间内消化道没有明显发育变化 , 直到前肢芽期才形 成肝脏和甲状腺 , 孵化期出现肛门. 中国大鲵胚胎 消化系统发育缓慢的特点可能与其胚胎细胞含有丰 富的卵黄密切相关. 孵化出膜中国大鲵幼苗的组织 细胞中仍然含有大量卵黄 ,这些卵黄的存在为胚后 图 4 中国大鲵与东方蝾螈在相对应的发育时期出现的器官的比较图 PH 咽 ; OV 视泡 ; FB 前脑 ; HB 后脑 ; heart 心脏 ; A T 心房 ; V T 心室 ; OP 嗅窝 ; AV 听囊 ; liver 肝脏 ; lens 晶状体 ; TG甲状腺; ST 胃; MD 下颌; anus 肛门 1498 自然科学进展 第 17 卷 第 11 期 2007 年 11 月
自然科学进展第17卷第11期2007年11月 1499 发育提供营养.大鲵幼苗细胞中的卵黄大约在孵化 出膜后30d左右消耗殆尽,此时消化系统也已基本 2 Gao KQ, Shubin NH. Earliest known crowrgroup salama 发育完善,方可开始投喂饵料.刚孵化的大鲵幼苗 ders. Nature,2003,422:424-428 3阳爱生,卞伟,刘运清,等.大鲵胚胎发育的初步研究.动物 虽然已经开口、具有吞咽食物的能力,但若立即喂 学报,1983,29(1):42-47 食,则会导致幼苗死亡 鉴毅,林锡芝,杨焱清,等.大鲵早期胚胎发育观察.动物学 大多数两栖动物胚胎孵化后在其头部发生一类 杂志,1994,29(4):42-46 临时性的器官:东方蝾螈为平衡器,无尾类为口 等.大鲵胚胎发育的组织学研究.武 吸盘.平衡器为棒状突起.一般认为平衡器的存在 汉大学学报,1997,43(4) 6朱治平,施履吉.黑斑蛙正常发育表.解剖学报,1957,2:59 可以帮助幼苗在水中保持平衡;口吸盘则通过分泌 7张天荫.动物胚胎学.济南:山东科学技术出版社,1996,151 糖蛋白粘液,使蝌蚪粘附于水中的物体上12.在中 国大鲵幼苗中并未观察到有平衡器或口吸盘的出 刘洪伯,宋苏祥,孙大江,等.施氏鲟的胚胎及胚后发育研究 现.东方蝾螈幼苗体长约1.2cm,黑斑蛙幼苗约 中国水产科学,2000,7(3):5-10 1.cm,体型均较小,在水体中需要依靠平衡器 9张天荫.动物胚胎学.济南:山东科学技术出版社,1996,160 或口吸盘来维持身体平衡和稳定中国大鲵孵化时10张天荫,动物胚胎学。济南:山东科学技术出版社,196,95 体长约3.5cm,腹部呈勺状,体型较大,幼苗可以1耿家举,章菊明,蔡堡.东方蛛螈早期胚胎发育的初步观察 借助于一对长达1cm的发达外鳃来保持身体平衡 动物学报,1960,12(2):175-84 作者认为平衡棒和口吸盘这类临时性器官的缺失可12oxH.4 mphibian morph Genesis. New Jursey: Humana 能与中国大鲵的自身发育特点相适应 参考文献 1蔡堡。东方蝾螈胚胎发育图谱.上海:科学出版社,1978 201994-2009cHinaAcademicJournalElectronicPublishingHouseAllrightsreservedhttp:/wwwcnkinet
发育提供营养. 大鲵幼苗细胞中的卵黄大约在孵化 出膜后 30 d 左右消耗殆尽 , 此时消化系统也已基本 发育完善 , 方可开始投喂饵料. 刚孵化的大鲵幼苗 虽然已经开口、具有吞咽食物的能力 , 但若立即喂 食 , 则会导致幼苗死亡. 大多数两栖动物胚胎孵化后在其头部发生一类 临时性的器官 : 东方蝾螈为平衡器[1 ] , 无尾类为口 吸盘. 平衡器为棒状突起. 一般认为平衡器的存在 可以帮助幼苗在水中保持平衡 ; 口吸盘则通过分泌 糖蛋白粘液 , 使蝌蚪粘附于水中的物体上[12 ] . 在中 国大鲵幼苗中并未观察到有平衡器或口吸盘的出 现. 东方蝾螈幼苗体长约 1. 2 cm [1 ] , 黑斑蛙幼苗约 1. 1 cm [6 ] , 体型均较小 , 在水体中需要依靠平衡器 或口吸盘来维持身体平衡和稳定. 中国大鲵孵化时 体长约 3. 5 cm , 腹部呈勺状 , 体型较大 , 幼苗可以 借助于一对长达 1 cm 的发达外鳃来保持身体平衡. 作者认为平衡棒和口吸盘这类临时性器官的缺失可 能与中国大鲵的自身发育特点相适应. 参 考 文 献 1 蔡 堡. 东方蝾螈胚胎发育图谱. 上海 : 科学出版社 , 1978 , 27 —77 2 Gao KQ , Shubin N H. Earliest known crown2group salaman2 ders. Nature , 2003 , 422 : 424 —428 3 阳爱生 , 卞 伟 , 刘运清 , 等. 大鲵胚胎发育的初步研究. 动物 学报 , 1983 , 29 (1) : 42 —47 4 刘鉴毅 , 林锡芝 , 杨焱清 , 等. 大鲵早期胚胎发育观察. 动物学 杂志 , 1994 , 29 (4) : 42 —46 5 冯小荣 , 邓凤姣 , 刘 汀 , 等. 大鲵胚胎发育的组织学研究. 武 汉大学学报 , 1997 , 43 (4) : 500 —504 6 朱治平 , 施履吉. 黑斑蛙正常发育表. 解剖学报 , 1957 , 2 : 59 7 张天荫. 动物胚胎学. 济南 : 山东科学技术出版社 , 1996 , 151 — 152 8 刘洪伯 , 宋苏祥 , 孙大江 , 等. 施氏鲟的胚胎及胚后发育研究. 中国水产科学 , 2000 , 7 (3) : 5 —10 9 张天荫. 动物胚胎学. 济南 : 山东科学技术出版社 , 1996 , 160 — 161 10 张天荫. 动物胚胎学. 济南 : 山东科学技术出版社 , 1996 , 95 11 耿家举 , 章菊明 , 蔡 堡. 东方蝾螈早期胚胎发育的初步观察. 动物学报 , 1960 , 12 (2) : 175 —184 12 Fox H. A m p hibian morp h Genesis. New J ursey : Humana Press , 1984 自然科学进展 第 1499 17 卷 第 11 期 2007 年 11 月