第六章细胞内膜系统与蛋白质分选第五节膜泡运输细胞内部内膜系统各个部分之间的物质传递常常通过膜泡运输方式进行。如从内质网到高尔基体：高尔基体到溶酶体；细胞分泌物的外排，都要通过过渡性小泡进行转运。膜泡运输是一种高度有组织的定向运输，各类运输泡之所能够被准确地运到靶细胞器，主要是因为细胞器的胞质面具有特殊的膜标志蛋白。许多膜标志蛋白存在于不止一种细胞器，可见不同的膜标志蛋白组合，决定膜的表面识别特征。大多数运输小泡是在膜的特定区域以出芽的方式产生的。其表面具有一个笼子状的由蛋白质构成的衣被（coat）。这种衣被在运输小泡与靶细胞器的膜融合之前解体。衣被具有两个主要作用：①选择性的将特定蛋白聚集在一起，形成运输小泡；②如同模具一样决定运输小泡的外部特征，相同性质的运输小泡之所以具有相同的形状和体积，与衣被蛋白的组成有关。胞内膜泡运输沿微管或微丝运行，动力来自马达蛋白（motorproteins）。与膜泡运输有关的马达蛋白有3类：一类是动力蛋白（dynein），可向微管负端移动；另一类为驱动蛋白（kinesin），可牵引物质向微管的正端移动：第三类是肌球蛋白（myosin），可向微丝的正极运动。在马达蛋白的作用下，可将膜泡转运到特定的区域一、衣被类型已知三类具有代表性的衣被蛋白，即：笼形蛋白（clathrin）、COPI和COPII，个介导不同的运输途径（表2）。表2衣被小泡的类型与功能衣被类型GTP酶组成与衔接蛋白运输方向clathrinArfClathrin重链与轻链，质膜一内体AP2Clathrin 重链与轻链，高尔基体→内体AP1Clathrin重链与轻链，高尔基体→溶酶体AP3高尔基体→植物液泡COPIArfCOPaβBoel高尔基体→内质网Sar 1COP IISec23/Sec24复合体，Sec内质网高尔基体13/31复合体，Sec16，Sec 12
第六章 细胞内膜系统与蛋白质分选 第五节 膜泡运输 细胞内部内膜系统各个部分之间的物质传递常常通过膜泡运输方式进行。如从内质网到高 尔基体；高尔基体到溶酶体；细胞分泌物的外排，都要通过过渡性小泡进行转运。膜泡运输是 一种高度有组织的定向运输，各类运输泡之所能够被准确地运到靶细胞器，主要是因为细胞器 的胞质面具有特殊的膜标志蛋白。许多膜标志蛋白存在于不止一种细胞器，可见不同的膜标志 蛋白组合，决定膜的表面识别特征。 大多数运输小泡是在膜的特定区域以出芽的方式产生的。其表面具有一个笼子状的由蛋白 质构成的衣被（coat）。这种衣被在运输小泡与靶细胞器的膜融合之前解体。衣被具有两个主 要作用：①选择性的将特定蛋白聚集在一起，形成运输小泡；②如同模具一样决定运输小泡的 外部特征，相同性质的运输小泡之所以具有相同的形状和体积，与衣被蛋白的组成有关。 胞内膜泡运输沿微管或微丝运行，动力来自马达蛋白（motor proteins）。与膜泡运输有关 的马达蛋白有 3 类：一类是动力蛋白（dynein），可向微管负端移动；另一类为驱动蛋白 （kinesin），可牵引物质向微管的正端移动；第三类是肌球蛋白（myosin）,可向微丝的正极运 动。在马达蛋白的作用下，可将膜泡转运到特定的区域， 一、衣被类型 已知三类具有代表性的衣被蛋白，即：笼形蛋白（clathrin）、COPI 和 COPII，个介导不 同的运输途径（表 2）。 表 2 衣被小泡的类型与功能 衣被类型 GTP 酶 组成与衔接蛋白 运输方向 clathrin Arf Clathrin 重链与轻链， AP2 质膜→内体 Clathrin 重链与轻链， AP1 高尔基体→内体 Clathrin 重链与轻链， AP3 高尔基体→溶酶体 高尔基体→植物液泡 COP I Arf COPαββ’γδεζ 高尔基体→内质网 COP II Sar 1 Sec23/Sec24复合体，Sec 13/31 复合体， Sec 16， Sec 12 内质网→高尔基体
（一）笼形蛋白衣被小泡笼形蛋白衣被小泡是最早发现的衣被小泡，介导高尔基体到内体、溶酶体、植物液泡的运输，以及质膜到内膜区隔的膜泡运输。笼形蛋白分子由3个重链和3个轻链组成（图6-2），形成一个具有3个曲臂的形状（triskelion）。许多笼形蛋白的曲臂部分交织在一起，形成一个具有5边形网孔的笼子（图6-3）heavychaintonm图6-2笼形蛋白的结构，A电镜照片，B分子模型，C衣被模型引自MolecularBiologyoftheCell.4thed.2002
（一）笼形蛋白衣被小泡 笼形蛋白衣被小泡是最早发现的衣被小泡，介导高尔基体到内体、溶酶体、植物液泡的运 输，以及质膜到内膜区隔的膜泡运输。 笼形蛋白分子由 3 个重链和 3 个轻链组成（图 6-2），形成一个具有 3 个曲臂的形状 （triskelion）。许多笼形蛋白的曲臂部分交织在一起，形成一个具有 5 边形网孔的笼子（图 6- 3）。 图 6-2 笼形蛋白的结构，A 电镜照片，B 分子模型，C 衣被模型 引自 Molecular Biology of the Cell. 4th ed. 2002
0.2um图6-3笼形蛋白衣被小泡的形态笼形蛋白形成的衣被中还有衔接蛋白（adaptin）。它介于笼形蛋白与配体受体复合物之间，起连接作用（图6-4）。目前至少发现4种不同类型的衔接蛋白，可分别结合不同类型的受体，形成不同性质的转运小泡，如AP1参与高尔基体→内体的运输、AP2参与质膜→内体的运输、AP3参与高尔基体→溶酶体的运输。VESICLEFORMATION图6-4笼形衣被小泡的组成
图 6-3 笼形蛋白衣被小泡的形态 笼形蛋白形成的衣被中还有衔接蛋白（adaptin）。它介于笼形蛋白与配体受体复合物之 间，起连接作用（图 6-4）。目前至少发现 4 种不同类型的衔接蛋白，可分别结合不同类型的 受体，形成不同性质的转运小泡，如 AP1 参与高尔基体→内体的运输、AP2 参与质膜→内体的 运输、AP3 参与高尔基体→溶酶体的运输。 图 6-4 笼形衣被小泡的组成
当笼形蛋白衣被小泡形成时，可溶性蛋白动力素（dynamin）聚集成一圈围绕在芽的颈部（图6-5），将小泡柄部的膜尽可能地拉近（小于1.5nm），从而导致膜融合，掐断（pinchoff）衣被小泡。动力素是一种GTP酶，调节小泡以出芽形式脱离膜的速率。动力素可以召集其它可溶性蛋白在小泡的颈部聚集，通过改变膜的形状和膜脂的组成，促使小跑颈部的膜融合形成衣被小泡。blocked bydyominnutations(A)dynaminandassociatedproteins图6-5Clathrin衣被小泡的掐断过程引自MolecularBiologyoftheCell.4thed.2002当衣被小泡从膜上释放后，衣被很快就解体，属于hsp70家族的一种分子伴侣（moleculalchaperone）充当衣被解体的ATP酶，一种辅蛋白（auxillin）可以激活这种ATP酶。(二）COPI衣被小泡负责回收、转运内质网逃逸蛋白（escapedproteins）返回内质网（图6-6、7）。起初发现于高尔基体碎片，在含有ATP的溶液中温育时，能形成非笼形蛋白包被的小泡。进一步的研究发现这种衣被蛋白复合体包含多达7种肽链。内质网向高尔基体输送运输小泡时，一部分自身的蛋白质也不可避免的被运送到了高尔基体，如不进行回收则内质网因为磷脂和某些蛋白质的乏而停止工作。内质网通过两种机制维持蛋白质的平衡：一是转运泡将应被保留的驻留蛋白排斥在外，例如有些驻留蛋白参与形成大的复合物，因而不能被包装在出芽形成的转运泡中，结果被保留下来；二是通过对逃逸蛋白的回收机制，使之返回它们正常驻留的部位。内质网的正常驻留蛋白，不管在腔中还是在膜上，它们在C端含有一段回收信号序列（retrievalsignals），如果它们被意外地逃逸进入转运泡从内质网运至高尔基体cis面，则cis面的膜结合受体蛋白将识别井结合逃逸蛋的回收信号，形成COPI衣被小泡将它们返回内质网。内质网腔中的蛋白，如蛋白二硫键异构酶和协助折叠的分子伴侣，均具有典型的回收信号
当笼形蛋白衣被小泡形成时，可溶性蛋白动力素（dynamin）聚集成一圈围绕在芽的颈部 （图 6-5），将小泡柄部的膜尽可能地拉近（小于 1.5nm），从而导致膜融合，掐断（pinch off）衣被小泡。动力素是一种 GTP 酶，调节小泡以出芽形式脱离膜的速率。动力素可以召集其 它可溶性蛋白在小泡的颈部聚集，通过改变膜的形状和膜脂的组成，促使小跑颈部的膜融合， 形成衣被小泡。 图 6-5 Clathrin 衣被小泡的掐断过程 引自 Molecular Biology of the Cell. 4th ed. 2002 当衣被小泡从膜上释放后，衣被很快就解体，属于 hsp70 家族的一种分子伴侣（molecular chaperone）充当衣被解体的 ATP 酶，一种辅蛋白（auxillin）可以激活这种 ATP 酶。 （二）COP I 衣被小泡 负责回收、转运内质网逃逸蛋白（escaped proteins）返回内质网（图 6-6、7）。起初发现 于高尔基体碎片，在含有 ATP 的溶液中温育时，能形成非笼形蛋白包被的小泡。进一步的研究 发现这种衣被蛋白复合体包含多达 7 种肽链。 内质网向高尔基体输送运输小泡时，一部分自身的蛋白质也不可避免的被运送到了高尔基 体，如不进行回收则内质网因为磷脂和某些蛋白质的匮乏而停止工作。内质网通过两种机制维 持蛋白质的平衡 ：一是转运泡将应被保留的驻留蛋白排斥在外，例如有些驻留蛋白参与形成大 的复合物，因而不能被包装在出芽形成的转运泡中，结果被保留下来；二是通过对逃逸蛋白的 回收机制，使之返回它们正常驻留的部位。 内质网的正常驻留蛋白，不管在腔中还是在膜上，它们在 C 端含有一段回收信号序列 （retrieval signals），如果它们被意外地逃逸进入转运泡从内质网运至高尔基体 cis 面，则 cis 面的膜结合受体蛋白将识别并结合逃逸蛋白的回收信号，形成 COPI 衣被小泡将它们返回内质 网。内质网腔中的蛋白，如蛋白二硫键异构酶和协助折叠的分子伴侣，均具有典型的回收信号
Lys-Asp-Glu-Leu（KDEL，图6-8）。内质网的膜蛋白（如SRP受体）在C端有一个不同的回收信号，通常是Lys-Lys-X-X（KKXX，X：任意氨基酸），同样可保证它们的回收。COP衣被小泡还可以介导高尔基体不同区域间的蛋白质运输。图6-6COPI衣被小泡的形态microtubuleomotorCOPll coatprotein0+0cis GolgiERnetworkvesiculartubularCOPIclustercoatretrievaltransport(B)图6-7COPI和COPII衣被小泡引自MolecularBiologyoftheCell:4thed.2002
Lys-Asp-Glu-Leu（KDEL，图 6-8）。内质网的膜蛋白（如 SRP 受体）在 C 端有一个不同的回 收信号，通常是 Lys-Lys-X-X（KKXX，X：任意氨基酸），同样可保证它们的回收。 COP I 衣被小泡还可以介导高尔基体不同区域间的蛋白质运输。 图 6-6 COP I 衣被小泡的形态 图 6-7 COPI 和 COPII 衣被小泡 引自 Molecular Biology of the Cell. 4th ed. 2002
soluble ERresident proteinCLKDELCemptyKDELreceptorCOPIcoat图6-8KDEL序列引自MolecularBiologyoftheCell4thed.2002（三）COPⅡ衣被小泡介导从内质网到高尔基体的物质运输。最早发现于酵母ER在ATP存在的细胞质液中温育时，ER膜上能形成类似于COPI的衣被小泡，某些温度敏感型的酵母，由于COPII衣被蛋白发生变异，在特定温度下会在内质网中积累蛋白质。COPII衣被由多种蛋白质构成（参见表2），其中Sar1GTP酶与Sec23/Sec24复合体结合在一起，形成紧紧包围着膜的一层衣被，Sec13/Sec31复合体形成覆盖在外围的一层衣被Sec16推测可能是一种骨架蛋白，Sec12是Sar1的鸟苷酸交换因子。真核生物的COPII衣被蛋白亚单位具有一些横向同源物（Paralog）[1]，这些同源物可能介导不同的蛋白质转运，具有不同的调节机制。在实验条件下，纯化的Sarl、Sec23/Sec24、Sec13/Sec31等5种成分足以在人工脂质体上形成小泡，说明这些成分具有改变膜的形状和掐断运输小泡的功能。COPⅡI衣被小泡形成与内质网的特殊部位，称为内质网出口（exitsites），这些部位没有核糖体，由交织在一起的管道和囊泡组成网络结构。由内质网到高尔基体的蛋白转运中，大多数跨膜蛋白是直接结合在COPII衣被上，但是少数跨膜蛋白和多数可溶性蛋白通过受体与COPII衣被结合，这些受体在完成转运后，通过COPI衣被小泡返回内质网。COPII衣被所识别的分选信号位于跨膜蛋白胞质面的结构域，形式多样，有些包含双酸性基序[DE]X[DE]（D为Asp，E为Glu，X为任何一种氨基酸），如Asp-X-Glu序列，其他一些具有短的疏水基序，如FF，YYM，FY，LL，IL等等（其中F为Phe，Y为Tyr，M为Met，L为Leu，1为Ile）。二、衣被的形成
图 6-8 KDEL 序列 引自 Molecular Biology of the Cell. 4th ed. 2002 （三）COPⅡ衣被小泡 介导从内质网到高尔基体的物质运输。最早发现于酵母 ER 在 ATP 存在的细胞质液中温育 时，ER 膜上能形成类似于 COP I 的衣被小泡，某些温度敏感型的酵母，由于 COP II 衣被蛋白 发生变异，在特定温度下会在内质网中积累蛋白质。 COP II 衣被由多种蛋白质构成（参见表 2），其中 Sar1GTP 酶与 Sec23/Sec24 复合体结合 在一起，形成紧紧包围着膜的一层衣被，Sec13/Sec31 复合体形成覆盖在外围的一层衣被， Sec16 推测可能是一种骨架蛋白，Sec12 是 Sar1 的鸟苷酸交换因子。真核生物的 COP II 衣被蛋 白亚单位具有一些横向同源物（Paralog）[1]，这些同源物可能介导不同的蛋白质转运，具有不 同的调节机制。在实验条件下，纯化的 Sar1、Sec23/Sec24、Sec13/Sec31 等 5 种成分足以在人 工脂质体上形成小泡，说明这些成分具有改变膜的形状和掐断运输小泡的功能。 COP II 衣被小泡形成与内质网的特殊部位，称为内质网出口（exit sites），这些部位没有 核糖体，由交织在一起的管道和囊泡组成网络结构。 由内质网到高尔基体的蛋白转运中，大多数跨膜蛋白是直接结合在 COP II 衣被上，但是 少数跨膜蛋白和多数可溶性蛋白通过受体与 COP II 衣被结合，这些受体在完成转运后，通过 COP I 衣被小泡返回内质网。 COP II 衣被所识别的分选信号位于跨膜蛋白胞质面的结构域，形式多样，有些包含双酸性 基序[DE]X[DE]（D 为 Asp，E 为 Glu，X 为任何一种氨基酸），如 Asp-X-Glu 序列，其他一些 具有短的疏水基序，如 FF，YYM，FY，LL，IL 等等（其中 F 为 Phe，Y 为 Tyr，M 为 Met，L 为 Leu，I 为 Ile）。 二、衣被的形成
衣被是在一类叫作衣被召集GTP酶（coat-recruitmentGTPase）作用下形成的。衣被召集GTP酶通常为单体GTP酶（monomericGTPase），也叫G蛋白，起分子开关的作用，结合GDP的形式没有活性，位于细胞质中，结合GTP而活化，转位至膜上，能与衣被蛋白结合，促进核化和组装。G蛋白具有两类重要的调节蛋白，即：鸟苷酸交换因子（guanine-nucleotideexchangefactor,GEF）和GTP酶激活蛋白（GTPaseactivatingprotein,GAP）。GEF的作用是使G蛋白释放GDP，结合GTP而激活。GAP的作用是激活G蛋白的酶活性，使GTP水解，G蛋白失活，G蛋白本身的GTP酶活性不高。除单体G蛋白以外，三聚体G蛋白也起分子开关的作用，控制衣被小泡的形成。衣被召集GTP酶包括Arf蛋白和Sar1蛋白（图6-9），Arf参与高尔基体上笼形蛋白衣被与COPI衣被的形成，Sar1参与内质网上COPIⅡI衣被的形成，两者的作用方式大体相似。质膜上笼形蛋白衣被的形成也与GTP酶有关，但其成分尚不明确。衣被召集GTP酶大量存在于细胞质中，但处于结合GDP的失活状态。当内质网上要形成COPI衣被小泡时，Sar1释放GDP结合GTP而激活，激活的Sar1暴露出一条脂肪酸的尾巴，插入内质网膜，然后开始召集衣被蛋白，以衣被蛋白为模型形成运输小泡。活化的衣被召集GTP酶还可以激活磷脂酶D（phospholipaseD），将一些磷脂水解，使形成衣被的蛋白质牢固地结合在膜上。衣被召集GTP酶对衣被的形成其动态调节作用，当多数衣被召集GTP酶处于结合GTP的状态时，它催化衣被的形成；反之当多数衣被召集GTP酶处于结合GDP的状态时，它催化衣被的解体。因此衣被的形成过程是边形成便解体的动态过程，只有在组装速率大于解体速率时，才能形成衣被小泡。Sec13p-Sec31pCytosolSartp-GDPSec24pSec23p福Sec12pp-GTPCargoProteinsLumen
衣被是在一类叫作衣被召集 GTP 酶（coat-recruitment GTPase）作用下形成的。衣被召集 GTP 酶通常为单体 GTP 酶（monomeric GTPase），也叫 G 蛋白，起分子开关的作用，结合 GDP 的形式没有活性，位于细胞质中，结合 GTP 而活化，转位至膜上，能与衣被蛋白结合， 促进核化和组装。 G 蛋白具有两类重要的调节蛋白，即：鸟苷酸交换因子（guanine-nucleotide exchange factor, GEF）和 GTP 酶激活蛋白（GTPase activating protein, GAP）。GEF 的作用是使 G 蛋白释 放 GDP，结合 GTP 而激活。GAP 的作用是激活 G 蛋白的酶活性，使 GTP 水解，G 蛋白失活， G 蛋白本身的 GTP 酶活性不高。除单体 G 蛋白以外，三聚体 G 蛋白也起分子开关的作用，控 制衣被小泡的形成。 衣被召集 GTP 酶包括 Arf 蛋白和 Sar 1 蛋白（图 6-9），Arf 参与高尔基体上笼形蛋白衣被 与 COP I 衣被的形成，Sar 1 参与内质网上 COP II 衣被的形成，两者的作用方式大体相似。质 膜上笼形蛋白衣被的形成也与 GTP 酶有关，但其成分尚不明确。 衣被召集 GTP 酶大量存在于细胞质中，但处于结合 GDP 的失活状态。当内质网上要形成 COPII 衣被小泡时，Sar 1 释放 GDP 结合 GTP 而激活，激活的 Sar 1 暴露出一条脂肪酸的尾 巴，插入内质网膜，然后开始召集衣被蛋白，以衣被蛋白为模型形成运输小泡。活化的衣被召 集 GTP 酶还可以激活磷脂酶 D（phospholipase D），将一些磷脂水解，使形成衣被的蛋白质牢 固地结合在膜上。 衣被召集 GTP 酶对衣被的形成其动态调节作用，当多数衣被召集 GTP 酶处于结合 GTP 的 状态时，它催化衣被的形成；反之当多数衣被召集 GTP 酶处于结合 GDP 的状态时，它催化衣 被的解体。因此衣被的形成过程是边形成便解体的动态过程，只有在组装速率大于解体速率 时，才能形成衣被小泡
图6-9COPII衣被小泡的组装引自JuanS.Bonifacino等2004三、膜泡运输的定向机制衣被小泡沿着细胞内的微管被运输到靶细胞器，马达蛋白水解ATP提供运输的动力。各类运输小泡之所以能够被准确地和靶膜融合，是因为运输小泡表面的标志蛋白能被靶膜上的受体识别，其中涉及识别过程的两类关键性的蛋白质是SNAREs（solubleNSFattachmentproteinreceptor）和Rabs（targetingGTPase）。其中SNARE介导运输小泡特异性停泊和融合，Rab的作用是使运输小泡靠近靶膜。(-) SNAREsSNAREs的作用是保证识别的特异性和介导运输小泡与目标膜的融合，动物细胞中已发现20多种SNAREs，分别分布于特定的膜上，位于运输小泡上的叫作v-SNAREs，位于靶膜上的叫作t-SNAREs（图6-10）。V-SNAREs和t-SNAREs都具有一个螺旋结构域，能相互缠绕形成跨SNAREs复合体（trans-SNAREscomplexes，图6-11），并通过这个结构将运输小泡的膜与靶膜拉在一起，实现运输小泡特异性停泊和融合。实验证明包含了SNARE的脂质体和包含匹配SNARE的脂质体间可发生融合，尽管速度较慢。这说明除了SNARE之外，还有其他的蛋白参与运输泡与目的膜的融合。COMPARTMENTAISNAREV-SNAFEDOCKINFUSIONISNARECOMPARTMENTB图6-10t-和v-SNARE引自MolecularBiologyoftheCell.4thed.2002
图 6-9 COP II 衣被小泡的组装 引自 Juan S. Bonifacino 等 2004 三、膜泡运输的定向机制 衣被小泡沿着细胞内的微管被运输到靶细胞器，马达蛋白水解 ATP 提供运输的动力。各 类运输小泡之所以能够被准确地和靶膜融合，是因为运输小泡表面的标志蛋白能被靶膜上的受 体识别，其中涉及识别过程的两类关键性的蛋白质是 SNAREs（soluble NSF attachment protein receptor）和 Rabs（targeting GTPase）。其中 SNARE 介导运输小泡特异性停泊和融合，Rab 的 作用是使运输小泡靠近靶膜。 （一）SNAREs SNAREs 的作用是保证识别的特异性和介导运输小泡与目标膜的融合，动物细胞中已发现 20 多种 SNAREs，分别分布于特定的膜上，位于运输小泡上的叫作 v-SNAREs，位于靶膜上的 叫作 t-SNAREs（图 6-10）。v-SNAREs 和 t-SNAREs 都具有一个螺旋结构域，能相互缠绕形成 跨 SNAREs 复合体（trans-SNAREs complexes，图 6-11），并通过这个结构将运输小泡的膜与 靶膜拉在一起，实现运输小泡特异性停泊和融合。实验证明包含了 SNARE 的脂质体和包含匹 配 SNARE 的脂质体间可发生融合，尽管速度较慢。这说明除了 SNARE 之外，还有其他的蛋白 参与运输泡与目的膜的融合。 图 6-10 t-和 v-SNARE 引自 Molecular Biology of the Cell. 4th ed. 2002
synapticvesicloCYTOSOLV-SNAREI-SNARE(synaptobrevin)(Snap26)I-SNARE(syntaxin)nervecellplasmamembrane图6-11SNARE复合体引自MolecularBiologyoftheCell.4thed.2002在SNAREs接到新一轮的运输小泡停泊之前，SNAREs必须以分离的状态存在，NSF（N-ethylmaleimide-sensitivefusionprotein,NSF）催化SNAREs的分离，它是一种类似分子伴娘的ATP酶，能够利用ATP作为能量通过插入几个适配蛋白（adaptorprotein）将SNAREs复合体的螺旋缠绕分开（图6-12）。NSFadaptorproteinsATPADP·?fusionSNAREdissociationdocking图6-12SNARE复合体的解离引自MolecularBiologyoftheCell4thed.2002在神经细胞中SNAREs负责突触小泡的停泊和融合，破伤风毒素和肉毒素等细菌分泌的神经性毒素实际上是一类特殊的蛋白酶，能够选择性地降解SNAREs，从而阻断神经传导。精卵的融合、成肌细胞的融合均涉及SNAREs，另外病毒融合蛋白的工作原理与SNAREs相似，介导病毒与宿主质膜的融合（图6-13）
图 6-11 SNARE 复合体 引自 Molecular Biology of the Cell. 4th ed. 2002 在 SNAREs 接到新一轮的运输小泡停泊之前，SNAREs 必须以分离的状态存在，NSF（Nethylmaleimide-sensitive fusion protein, NSF）催化 SNAREs 的分离，它是一种类似分子伴娘的 ATP 酶，能够利用 ATP 作为能量通过插入几个适配蛋白（adaptor protein）将 SNAREs 复合体 的螺旋缠绕分开（图 6-12）。 图 6-12 SNARE 复合体的解离 引自 Molecular Biology of the Cell. 4th ed. 2002 在神经细胞中 SNAREs 负责突触小泡的停泊和融合，破伤风毒素和肉毒素等细菌分泌的神 经性毒素实际上是一类特殊的蛋白酶，能够选择性地降解 SNAREs，从而阻断神经传导。 精卵的融合、成肌细胞的融合均涉及 SNAREs，另外病毒融合蛋白的工作原理与 SNAREs 相似，介导病毒与宿主质膜的融合（图 6-13）
HIVfusiorproteinGp120CDEXTRACELLULARSPACECYTOSOLchemokinreceptorCHEMOKINERECEPTORMEMBRANEFUSIONCD4ATTACHMENTBINDINGINSERTION图6-13病毒融合蛋白的工作原理引自MolecularBiologyoftheCell4thed.2002(二) RabsRab也叫targetingGTPase，属于单体GTP酶，结构类似于Ras，已知30余种。不同膜上具有不同的Rab，每一种细胞器至少含有一种以上的Rab。Rabs的作用是促进和调节运输小泡的停泊和融合。与衣被召集GTP酶相似的是，起分子开关作用，结合GDP失活，位于细胞质中，结合GTP激活，位于细胞膜、内膜和运输小泡膜上，调节SNAREs复合体的形成。Rabs的调节蛋白与其它G蛋白的相似。Rabs还有许多效应因子（effector），其作用是帮助运输小泡聚集和靠近靶膜，触发SNAREs释放它的抑制因子（图6-14）。许多运输小泡只有在包含了特定的Rabs和SNAREs之后才能形成
图 6-13 病毒融合蛋白的工作原理 引自 Molecular Biology of the Cell. 4th ed. 2002 （二）Rabs Rab 也叫 targeting GTPase，属于单体 GTP 酶，结构类似于 Ras，已知 30 余种。不同膜上 具有不同的 Rab，每一种细胞器至少含有一种以上的 Rab。Rabs 的作用是促进和调节运输小泡 的停泊和融合。与衣被召集 GTP 酶相似的是，起分子开关作用，结合 GDP 失活，位于细胞质 中，结合 GTP 激活，位于细胞膜、内膜和运输小泡膜上，调节 SNAREs 复合体的形成。Rabs 的调节蛋白与其它 G 蛋白的相似。Rabs 还有许多效应因子（effector），其作用是帮助运输小 泡聚集和靠近靶膜，触发 SNAREs 释放它的抑制因子（图 6-14）。许多运输小泡只有在包含了 特定的 Rabs 和 SNAREs 之后才能形成