实训三 细菌的简单染色和革兰 氏染色 微生物与发酵工艺
实训三 细菌的简单染色和革兰 氏染色 微生物与发酵工艺
微生物中的细菌，其细胞小而透明，用压滴片或 悬滴片在光学显微镜下观察时，菌体和背景没有明 显的明暗差，不易看清其形态，更难以识别它们的 结构。因此，需要对菌体进行染色，借助于染料使 菌体着色后颜色的反衬作用，观察细菌的形状、基 本结构(壁、膜、细胞质、核及内含物)及附属结 构(荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢等)
微生物中的细菌，其细胞小而透明，用压滴片或 悬滴片在光学显微镜下观察时，菌体和背景没有明 显的明暗差，不易看清其形态，更难以识别它们的 结构。因此，需要对菌体进行染色，借助于染料使 菌体着色后颜色的反衬作用，观察细菌的形状、基 本结构(壁、膜、细胞质、核及内含物)及附属结 构(荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢等)
1.学习微生物的涂片染色的操作技术。 2.掌握微生物的简单染色、革兰氏染色 的基本原理和方法。 一、实验目的
1.学习微生物的涂片染色的操作技术。 2.掌握微生物的简单染色、革兰氏染色 的基本原理和方法。 一、实验目的
微生物（尤其是细菌）的机体是无色透 明的。在显微镜下，微生物体与其背景反 差小，不易看清微生物的形态和结构。若 增加反差。则微生物的形态皆可以看清楚。 通常用染料将菌体染上颜色以增加反差， 便于观察。 二、实验原理
微生物（尤其是细菌）的机体是无色透 明的。在显微镜下，微生物体与其背景反 差小，不易看清微生物的形态和结构。若 增加反差。则微生物的形态皆可以看清楚。 通常用染料将菌体染上颜色以增加反差， 便于观察。 二、实验原理
微生物细胞是由蛋白质、核酸等两性电 解质及其他化合物组成，所以微生物细胞 表现出两性电解质的性质。经测定，细菌 的等电点在pH2—5之间，故细菌在中性、 碱性或偏酸性的环境中，都体现酸性，带 负电荷，容易与带负电荷的碱性染料结合， 从而使菌体染色。菌体染色分为简单染色 和复染. 二、实验原理
微生物细胞是由蛋白质、核酸等两性电 解质及其他化合物组成，所以微生物细胞 表现出两性电解质的性质。经测定，细菌 的等电点在pH2—5之间，故细菌在中性、 碱性或偏酸性的环境中，都体现酸性，带 负电荷，容易与带负电荷的碱性染料结合， 从而使菌体染色。菌体染色分为简单染色 和复染. 二、实验原理
简单染色又称单染，只用一种染料使菌体 着色。若仅为在显微镜下看清细菌形态，用 单染即可。 复染是指用两种或多种染料染细菌，目 的是鉴别不同性质的细菌，主要方法有革兰 氏染色法和抗酸性染色法。 二、实验原理
简单染色又称单染，只用一种染料使菌体 着色。若仅为在显微镜下看清细菌形态，用 单染即可。 复染是指用两种或多种染料染细菌，目 的是鉴别不同性质的细菌，主要方法有革兰 氏染色法和抗酸性染色法。 二、实验原理
革兰氏染色步骤是：先用草酸铵结晶紫染色， 经媒染剂碘-碘化钾溶液处理后用乙醇脱色，最 后用沙黄染液（也称蕃红染液）复染。如细菌 能保持草酸铵结晶紫与碘的复合物而不被脱色， 用蕃红液复染后仍呈紫色，则该细菌称为革兰 氏阳性菌（G +）；被乙醇脱色用蕃红复染后呈现 红色，则称为革兰氏阴性菌（G -）。现在已知， 革兰氏染色结果与细菌细胞壁的结构组成有关。 二、实验原理
革兰氏染色步骤是：先用草酸铵结晶紫染色， 经媒染剂碘-碘化钾溶液处理后用乙醇脱色，最 后用沙黄染液（也称蕃红染液）复染。如细菌 能保持草酸铵结晶紫与碘的复合物而不被脱色， 用蕃红液复染后仍呈紫色，则该细菌称为革兰 氏阳性菌（G +）；被乙醇脱色用蕃红复染后呈现 红色，则称为革兰氏阴性菌（G -）。现在已知， 革兰氏染色结果与细菌细胞壁的结构组成有关。 二、实验原理
1.菌种 大肠杆菌(Escherichiacoli) 金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus) 枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis) 普通变形杆菌(Proteusvulgaris) 三、实验材料和用具
1.菌种 大肠杆菌(Escherichiacoli) 金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus) 枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis) 普通变形杆菌(Proteusvulgaris) 三、实验材料和用具
2.染液 ①简单染液：齐氏石炭酸复红染液 ②革兰氏染液 草酸铵结晶紫染液(染液) 卢戈氏碘液(媒染剂) 95％乙醇或丙酮(脱色剂) 沙黄乙醇溶液(复染剂) 吕氏美蓝染液。 三、实验材料和用具
2.染液 ①简单染液：齐氏石炭酸复红染液 ②革兰氏染液 草酸铵结晶紫染液(染液) 卢戈氏碘液(媒染剂) 95％乙醇或丙酮(脱色剂) 沙黄乙醇溶液(复染剂) 吕氏美蓝染液。 三、实验材料和用具
3.用具 显微镜、酒精灯、接种环、无菌水、香柏 油、二甲苯、牙签、载玻片、纱布、滤纸、 镜头纸、镊子、染色缸、火柴、玻片架、 烧杯等。 三、实验材料和用具
3.用具 显微镜、酒精灯、接种环、无菌水、香柏 油、二甲苯、牙签、载玻片、纱布、滤纸、 镜头纸、镊子、染色缸、火柴、玻片架、 烧杯等。 三、实验材料和用具