实训四 微生物细胞数的计数 微生物与发酵工艺
实训四 微生物细胞数的计数 微生物与发酵工艺
使用血球计数板计数单细胞微生 物的数量。 一、实验目的
使用血球计数板计数单细胞微生 物的数量。 一、实验目的
血球计数板是一块比普通载玻片厚的特 制玻片制成。玻片中央刻有四条槽，中央两 条槽之间的平面比其它平面略低，中央有一 小槽，槽的两边的平面上各刻有9个大方格。 中间的一个大方格为计数室，它的长、宽各 为1mm，深度为0.1mm,容积为0.1mm3。计数室 有两种规格，一种是把大方格分成16个中格， 每一中格分成25小格，共计400小格；另一种 规格是把大方格分成25中格，每一中格分成 16小格，总共也是400小格。 二、实验原理
血球计数板是一块比普通载玻片厚的特 制玻片制成。玻片中央刻有四条槽，中央两 条槽之间的平面比其它平面略低，中央有一 小槽，槽的两边的平面上各刻有9个大方格。 中间的一个大方格为计数室，它的长、宽各 为1mm，深度为0.1mm,容积为0.1mm3。计数室 有两种规格，一种是把大方格分成16个中格， 每一中格分成25小格，共计400小格；另一种 规格是把大方格分成25中格，每一中格分成 16小格，总共也是400小格。 二、实验原理
血细胞 计数板 正面、 侧面与 正面方 格放大 示意图
血细胞 计数板 正面、 侧面与 正面方 格放大 示意图
因此，在计算上可按下列两种公式进行： 1. 16×25计数板的计算： 细胞数/mL= （100小格内的细胞数/100）×400 ×10000 ×稀释倍数 2. 25X16计数板的计算： 细胞数/mL= （80小格内的细胞数/80）×400 ×10000 × 稀释倍数 式中，400为计数板的小格总数； 10000为由计数室0.1mm3换算成lmL体积的 系数 二、实验原理
因此，在计算上可按下列两种公式进行： 1. 16×25计数板的计算： 细胞数/mL= （100小格内的细胞数/100）×400 ×10000 ×稀释倍数 2. 25X16计数板的计算： 细胞数/mL= （80小格内的细胞数/80）×400 ×10000 × 稀释倍数 式中，400为计数板的小格总数； 10000为由计数室0.1mm3换算成lmL体积的 系数 二、实验原理
1.材料 酵母菌悬液 2.用具 显微镜、血球计数板 三、实验材料和用具
1.材料 酵母菌悬液 2.用具 显微镜、血球计数板 三、实验材料和用具
四、实验方法 1.取清洁干燥的血球计数板，在计数室 上面加盖玻片。在显微镜下找到计数室。 2.取酵母菌液，摇匀，用滴管由盖玻片 边缘滴一小滴(不宜过多)。菌液可自行渗 入计数室。计数室不得有气泡，然后置高 倍镜下计数
四、实验方法 1.取清洁干燥的血球计数板，在计数室 上面加盖玻片。在显微镜下找到计数室。 2.取酵母菌液，摇匀，用滴管由盖玻片 边缘滴一小滴(不宜过多)。菌液可自行渗 入计数室。计数室不得有气泡，然后置高 倍镜下计数
3.样品浓度要求每小格内有5～10个菌体为宜。 4.计数时，用16×25的计数板要按对角线方位， 取左上、左下、右上，右下四个中方格(即100 小格)计数酵母菌液，用25×16的计数板，除 计数上述对角线的四个方格外，还需数中央一 个方格的酵母菌数(即80小格)。 四、实验方法
3.样品浓度要求每小格内有5～10个菌体为宜。 4.计数时，用16×25的计数板要按对角线方位， 取左上、左下、右上，右下四个中方格(即100 小格)计数酵母菌液，用25×16的计数板，除 计数上述对角线的四个方格外，还需数中央一 个方格的酵母菌数(即80小格)。 四、实验方法
5.每个样品重复计数2～3次，取其平均值， 按上述公式计算每毫升菌液所含的酵母细 胞数。 6.计数完毕，将计数板在水龙头上冲洗，切 勿用硬物洗刷，自行晾干或吹风机吹干， 或用擦镜头纸轻轻擦拭。 四、实验方法
5.每个样品重复计数2～3次，取其平均值， 按上述公式计算每毫升菌液所含的酵母细 胞数。 6.计数完毕，将计数板在水龙头上冲洗，切 勿用硬物洗刷，自行晾干或吹风机吹干， 或用擦镜头纸轻轻擦拭。 四、实验方法
使用血球计数板对样品酵母菌液进行计 数，并计算菌液浓度。 五、实验内容
使用血球计数板对样品酵母菌液进行计 数，并计算菌液浓度。 五、实验内容