实训五 培养基的制备与灭菌 微生物与发酵工艺
实训五 培养基的制备与灭菌 微生物与发酵工艺
一、实验目的 1.学会一般培养基的制备原理、方法。 2.掌握培养基及器皿的灭菌方法
一、实验目的 1.学会一般培养基的制备原理、方法。 2.掌握培养基及器皿的灭菌方法
培养基是根据微生物生长繁殖的营养需要，用 人工方法配制而成的基质,其中含有水、碳源、 氮源、无机盐及各种生长因子。培养基可为微生 物的生长提供能源、组成菌体的原料，调节代谢 活动。 二、实验原理
培养基是根据微生物生长繁殖的营养需要，用 人工方法配制而成的基质,其中含有水、碳源、 氮源、无机盐及各种生长因子。培养基可为微生 物的生长提供能源、组成菌体的原料，调节代谢 活动。 二、实验原理
不同微生物对营养物质的要求各不相同。 因此，配制培养基要根据微生物的营养特点。 一般，培养细菌常用牛肉膏蛋白胨培养基， 培养放线菌常用淀粉培养基，培养霉菌常用 马铃薯培养基，培养酵母菌常用麦芽汁培养 基(或麦芽糖、蛋白胨培养基)。 二、实验原理
不同微生物对营养物质的要求各不相同。 因此，配制培养基要根据微生物的营养特点。 一般，培养细菌常用牛肉膏蛋白胨培养基， 培养放线菌常用淀粉培养基，培养霉菌常用 马铃薯培养基，培养酵母菌常用麦芽汁培养 基(或麦芽糖、蛋白胨培养基)。 二、实验原理
培养基除了要满足微生物生长所要求的各 种营养物质外，还应保证微生物所需要的其 他生活条件，如适宜的酸碱度，渗透压等， 因此，根据不同种类微生物的要求，应将培 养基调节到一定的pH范围，如细菌培养基中 性偏碱，放线菌培养基偏碱，霉菌、酵母菌 培养基偏酸。 二、实验原理
培养基除了要满足微生物生长所要求的各 种营养物质外，还应保证微生物所需要的其 他生活条件，如适宜的酸碱度，渗透压等， 因此，根据不同种类微生物的要求，应将培 养基调节到一定的pH范围，如细菌培养基中 性偏碱，放线菌培养基偏碱，霉菌、酵母菌 培养基偏酸。 二、实验原理
根据研究的不同，可以将培养基制成固 体、半固体和液体三种形式，固体培养基的 成分与液体培养基相同，仅在液体培养基中 加入凝固剂作支持物，通常加入1.5～2.0％ 的琼脂，半固体培养基加入0.3～0.5％琼脂 作支持物，有时也可用明胶或硅胶作为凝固 剂。 二、实验原理
根据研究的不同，可以将培养基制成固 体、半固体和液体三种形式，固体培养基的 成分与液体培养基相同，仅在液体培养基中 加入凝固剂作支持物，通常加入1.5～2.0％ 的琼脂，半固体培养基加入0.3～0.5％琼脂 作支持物，有时也可用明胶或硅胶作为凝固 剂。 二、实验原理
1.材料 马铃薯、蔗糖、牛肉膏、蛋白胨、 可溶性淀粉、琼脂、K2HP04、MgS04·7H2O、 FeS04·7H20、NaOH、HCl。 2.用具 试管、三角烧瓶、漏斗、量筒、吸 管、烧杯、纱布、棉花、玻璃棒、pH试纸、铁 架台、漏斗架、止水夹、电炉、台秤、硫酸纸、 药匙、牛皮纸、线绳、标签纸、剪刀、解剖刀、 镊子、白瓷盘、(比色盘)铁丝筐。 三、实验材料和用具
1.材料 马铃薯、蔗糖、牛肉膏、蛋白胨、 可溶性淀粉、琼脂、K2HP04、MgS04·7H2O、 FeS04·7H20、NaOH、HCl。 2.用具 试管、三角烧瓶、漏斗、量筒、吸 管、烧杯、纱布、棉花、玻璃棒、pH试纸、铁 架台、漏斗架、止水夹、电炉、台秤、硫酸纸、 药匙、牛皮纸、线绳、标签纸、剪刀、解剖刀、 镊子、白瓷盘、(比色盘)铁丝筐。 三、实验材料和用具
1.培养基的制作方法 (1)称量 按照培养基的配方，准确称取各成分 于烧杯中。 (2)溶解、加热 向上述烧杯中加入所需要水量， 搅动，然后加热使其溶解。用马铃薯、豆芽等配制 的培养基，须先将马铃薯或豆芽按其配方的浓度加 热煮沸0.5h (马铃薯须先削皮)并用纱布过滤，然 后加入其他成分继续加热使其溶化，补足水量，如 果配方中含有淀粉，则需先将淀粉加热煮融，再加 人其他药品，并补足水量。 四、实验方法
1.培养基的制作方法 (1)称量 按照培养基的配方，准确称取各成分 于烧杯中。 (2)溶解、加热 向上述烧杯中加入所需要水量， 搅动，然后加热使其溶解。用马铃薯、豆芽等配制 的培养基，须先将马铃薯或豆芽按其配方的浓度加 热煮沸0.5h (马铃薯须先削皮)并用纱布过滤，然 后加入其他成分继续加热使其溶化，补足水量，如 果配方中含有淀粉，则需先将淀粉加热煮融，再加 人其他药品，并补足水量。 四、实验方法
(3)调节pH值 初制备好的培养基往往不能符合所 要求的pH值，故需用酸度计，pH试纸或用氢离子浓 度比色计来矫正，用0.1mol/L NaOH或lmol/L HCl 调至合适的范围。 (4)过滤 用滤纸或双层纱布(中间夹一层脱脂棉 花)趁热过滤。 (5)分装 根据不同的需要，可将制好的培养基 分装入试管或三角烧瓶内，管(瓶)口塞上棉塞(或 硅胶泡沫塞)，用牛皮纸包扎管(瓶)口。 四、实验方法
(3)调节pH值 初制备好的培养基往往不能符合所 要求的pH值，故需用酸度计，pH试纸或用氢离子浓 度比色计来矫正，用0.1mol/L NaOH或lmol/L HCl 调至合适的范围。 (4)过滤 用滤纸或双层纱布(中间夹一层脱脂棉 花)趁热过滤。 (5)分装 根据不同的需要，可将制好的培养基 分装入试管或三角烧瓶内，管(瓶)口塞上棉塞(或 硅胶泡沫塞)，用牛皮纸包扎管(瓶)口。 四、实验方法
培养基的分装
培养基的分装