第十七章PCR基因扩增仪 页 习题 习题参考答案 习题 名词解释选择题简答题 一、名词解释 1.PCR技术 2.TaqDNA聚合酶 3.水浴锅PCR基因扩增仪 4.压缩机PCR基因扩增仪 5.overshooting 6.undershooting 7.半导体PCR基因扩增仪 8.离心式空气加热PCR基因扩增仪 9.梯度PCR仪 10.原位PCR仪 11.原位PCR技术 12.荧光实时定量PCR技术 13。位置的边缘效应 14.模块温控模式 15.反应管温控模式 二、选择题 【A型题】在五个选项中选出一个最符合题意的答案(最佳答案) 1.以下哪种物质在PCR反应中不需要() A.Taq DNA聚合 B.dNTPs C.Mg
1 第十七章 PCR 基因扩增仪 首 页 习 题 习题参考答案 习题 名词解释 选择题 简答题 一、名词解释 1.PCR 技术 2.TaqDNA 聚合酶 3.水浴锅 PCR 基因扩增仪 4.压缩机 PCR 基因扩增仪 5.overshooting 6.undershooting 7.半导体 PCR 基因扩增仪 8.离心式空气加热 PCR 基因扩增仪 9.梯度 PCR 仪 10.原位 PCR 仪 11.原位 PCR 技术 12.荧光实时定量 PCR 技术 13.位置的边缘效应 14.模块温控模式 15.反应管温控模式 二、选择题 【A 型题】 在五个选项中选出一个最符合题意的答案(最佳答案)。 1.以下哪种物质在 PCR 反应中不需要( ) A.Taq DNA 聚合酶 B.dNTPs C.Mg2+
D.RNA酶 E.合适pH缓冲液 2.以下哪种酶可耐高温() A.Taq DNA聚合酯 B.HindⅢ C.T4连接酶 D.RNA酶 E.Klenow片段 3.PCR反应正确过程应为() A.退火一变性一延伸 B.变性一退火一延伸 C.退火一延伸一变性 D.变性一延伸一退火 E.延伸一变性→退火 4.PCR技术的本质是() A.核酸杂交技术 B。核酸重组技术 C.核酸扩增技术 D.核酸变性技术 E。核酸连接技术 5.Taq DNA聚合酶酶促反应最适温度为() A.37℃ B.50℃~55℃ C.70℃~75℃ D.80℃-85℃ E.94℃~95C 6.温度均一性较好的PCR仪为() A.水浴锅PCR基因扩增仪和压缩机PCR基因扩增仪 B.半导体PCR基因扩增仪和离心式空气加热PCR基因扩增仪 C,压缩机PCR基因扩增仪和半导体PCR基因扩增仪 2
2 D.RNA 酶 E.合适 pH 缓冲液 2.以下哪种酶可耐高温( ) A.Taq DNA 聚合酶 B.Hind Ⅲ C.T4 连接酶 D.RNA 酶 E.Klenow 片段 3.PCR 反应正确过程应为( ) A.退火→变性→延伸 B.变性→退火→延伸 C.退火→延伸→变性 D.变性→延伸→退火 E.延伸→变性→退火 4. PCR 技术的本质是( ) A. 核酸杂交技术 B. 核酸重组技术 C. 核酸扩增技术 D. 核酸变性技术 E. 核酸连接技术 5.Taq DNA 聚合酶酶促反应最适温度为( ) A.37℃ B.50℃~55℃ C.70℃~75℃ D.80℃~85℃ E.94℃~95℃ 6.温度均一性较好的 PCR 仪为( ) A.水浴锅 PCR 基因扩增仪和压缩机 PCR 基因扩增仪 B.半导体 PCR 基因扩增仪和离心式空气加热 PCR 基因扩增仪 C.压缩机 PCR 基因扩增仪和半导体 PCR 基因扩增仪
D.压缩机PCR基因扩增仪和离心式空气加热PCR基因扩增仪 E.水浴锅PCR基因扩增仪和离心式空气加热PCR基因扩增仪 7.一步就可以摸索出最适合反应条件的PCR仪为() A.普通PCR仪 B.梯度PCR仪 C.原位PCR仪 D.荧光PCR仪 E.实时PCR仪 8.能在细胞内进行PCR扩增的PCR仪为() A.普通PCR仪 B.梯度PCR仪 C.原位PCR仪 D.荧光PCR仪 E.实时PCR仪 9.SteadyS1loe技术是下列哪一家公司的专利技术() A.eppendorf公司 B.MJ公司 C.Cepheid公司 D.Roche公司 E.ABI公司 10.应用SteadySlope技术的是哪种PCR仪() A.普通PCR仪 B.梯度PCR仪 C.原位PCR仪 D.荧光PCR仪 E.实时PCR仪 11.在下列哪种PCR仪扩增样品可以了解样品中DNA原始拷贝数() A.普通PCR仪 B.梯度PCR仪 C.原位PCR仪
3 D.压缩机 PCR 基因扩增仪和离心式空气加热 PCR 基因扩增仪 E.水浴锅 PCR 基因扩增仪和离心式空气加热 PCR 基因扩增仪 7.一步就可以摸索出最适合反应条件的 PCR 仪为( ) A.普通 PCR 仪 B.梯度 PCR 仪 C.原位 PCR 仪 D.荧光 PCR 仪 E.实时 PCR 仪 8.能在细胞内进行 PCR 扩增的 PCR 仪为( ) A.普通 PCR 仪 B.梯度 PCR 仪 C.原位 PCR 仪 D.荧光 PCR 仪 E.实时 PCR 仪 9.SteadySlope 技术是下列哪一家公司的专利技术( ) A.eppendorf 公司 B.MJ 公司 C.Cepheid 公司 D.Roche 公司 E.ABI 公司 10.应用 SteadySlope 技术的是哪种 PCR 仪( ) A.普通 PCR 仪 B.梯度 PCR 仪 C.原位 PCR 仪 D.荧光 PCR 仪 E.实时 PCR 仪 11.在下列哪种 PCR 仪扩增样品可以了解样品中 DNA 原始拷贝数( ) A.普通 PCR 仪 B.梯度 PCR 仪 C.原位 PCR 仪
D.荧光实时PCR仪 E.定性PCR仪 12.以下是经过PCR扩增后得到的Ct值,哪个样品的DNA原始拷贝数最多() A.样品A,Ct=20 B.样品A,Ct=22 C.样品A,Ct=24 D.样品A,Ct=26 E.样品A,Ct=28 13.以空气为加热介质的PCR仪是() A.金属板式实时定量PCR仪 B.96孔板式实时定量PCR仪 C.离心式实时定量PCR仪 D.各孔独立控温的定量PCR仪 E.荧光实时定量PCR仪 14.以下哪个PCR扩增仪的PCR扩增样品槽被设计为离心转子() A.ABI 7500 B.ABI 7900 C.Light Cycle D.SmartCyclerⅡ E.RG3000 15.以下哪个PCR扩增仪使用的是同一个激发光源和检测器() A.ABI 7500 B.ABI 7900 C.Light Cycle D.SmartCyclerⅡ E.RG3000 I6.可以在同一台定量PCR仪上分别进行不同条件定量PCR反应的是() A.ABI 7500 B.ABI 7900 C.Light Cycle
4 D.荧光实时 PCR 仪 E.定性 PCR 仪 12.以下是经过 PCR 扩增后得到的 Ct 值,哪个样品的 DNA 原始拷贝数最多( ) A.样品 A,Ct = 20 B.样品 A,Ct = 22 C.样品 A,Ct = 24 D.样品 A,Ct = 26 E.样品 A,Ct = 28 13.以空气为加热介质的 PCR 仪是( ) A.金属板式实时定量 PCR 仪 B.96 孔板式实时定量 PCR 仪 C.离心式实时定量 PCR 仪 D.各孔独立控温的定量 PCR 仪 E.荧光实时定量 PCR 仪 14.以下哪个 PCR 扩增仪的 PCR 扩增样品槽被设计为离心转子( ) A.ABI 7500 B.ABI 7900 C.Light CycleTM D.SmartCyclerⅡ E.RG3000 15.以下哪个 PCR 扩增仪使用的是同一个激发光源和检测器( ) A.ABI 7500 B.ABI 7900 C.Light CycleTM D.SmartCyclerⅡ E.RG3000 16.可以在同一台定量 PCR 仪上分别进行不同条件定量 PCR 反应的是( ) A.ABI 7500 B.ABI 7900 C.Light CycleTM
D.SmartCycler II E.RG3000 17.拥有独立智能升降温模块的是() A.ABI 7500 B.ABI 7900 C.Light CycleT D.SmartCycler ll E.RG3000 18.容纳样品量大,无需特殊耗材的是() A.ABI 7500 B.ABI 7900 C.Light Cycle" D.SmartCyclerⅡ E.RG3000 19.PCR基因扩增仪最关键的部分是() A.温度控制系统 B.荧光检测系统 C.软件系统 D.热盖 E.样品基座 20.“位置的边缘效应”是指() A.温度的准确性欠佳 B.温度的均一性欠佳 C.边缘升降温速度快 D.边缘升降温速度慢 E。梯度模式和标准模式温度不一致 21.PCR扩增仪升降温速度快有很多优点,以下哪一项应除外() A,缩短反应时间 B.提高工作效率 C.消除位置的边缘效应
5 D.SmartCyclerⅡ E.RG3000 17.拥有独立智能升降温模块的是( ) A.ABI 7500 B.ABI 7900 C.Light CycleTM D.SmartCyclerⅡ E.RG3000 18.容纳样品量大,无需特殊耗材的是( ) A.ABI 7500 B.ABI 7900 C.Light CycleTM D.SmartCyclerⅡ E.RG3000 19.PCR 基因扩增仪最关键的部分是( ) A.温度控制系统 B.荧光检测系统 C.软件系统 D.热盖 E.样品基座 20.“位置的边缘效应”是指( ) A.温度的准确性欠佳 B.温度的均一性欠佳 C.边缘升降温速度快 D.边缘升降温速度慢 E.梯度模式和标准模式温度不一致 21.PCR 扩增仪升降温速度快有很多优点,以下哪一项应除外( ) A.缩短反应时间 B.提高工作效率 C.消除位置的边缘效应
D.缩短非特异性反应时间 E.提高反应特异性 22。在梯度模式下得出最佳反应条件,并以此条件在标准模式下单独做,但结果却不如人意,最有可能 的原因是() A.样品孔温度与设定温度不一致 B.样品孔间的温度有差异 C,样品孔位置的边缘效应较高 D.升降温速度不够快 E.不同模式温度特性有差异 23.定量PCR扩增仪的关机次序一般为() A.关软件一关PCR仪一关电脑 B.关软件一关电脑一关PCR仪 C.关PCR仪→关软件一关电脑 D.关PCR仪一关电脑→关软件 E.关电脑一关PCR仪一关软件 【X型题】每题的备选答案中有两个或者两个以上正确答案 1.PCR技术每一个循环均包含以下哪些环节() A.酶切 B.变性 C.退火 D.延伸 E.连接 2.以下哪些酶可用于PCR反应() A.Klenow B.Hind I C.Taq DNA聚合南 D.RNase E.DNase 3.目前常用的PCR基因扩增仪控温方式有()
6 D.缩短非特异性反应时间 E.提高反应特异性 22.在梯度模式下得出最佳反应条件,并以此条件在标准模式下单独做,但结果却不如人意,最有可能 的原因是( ) A.样品孔温度与设定温度不一致 B.样品孔间的温度有差异 C.样品孔位置的边缘效应较高 D.升降温速度不够快 E.不同模式温度特性有差异 23.定量 PCR 扩增仪的关机次序一般为( ) A.关软件→关 PCR 仪→关电脑 B.关软件→关电脑→关 PCR 仪 C.关 PCR 仪→关软件→关电脑 D.关 PCR 仪→关电脑→关软件 E.关电脑→关 PCR 仪→关软件 【X 型题】 每题的备选答案中有两个或者两个以上正确答案。 1.PCR 技术每一个循环均包含以下哪些环节( ) A.酶切 B.变性 C.退火 D.延伸 E.连接 2.以下哪些酶可用于 PCR 反应( ) A.Klenow B.Hind Ⅲ C.Taq DNA 聚合酶 D.RNase E.DNase 3.目前常用的 PCR 基因扩增仪控温方式有( )
A.水浴锅控温 B.压缩机控温 C.半导体控温 D.离心式空气控酒 E.金属控温 4.普通PCR基因扩增仪除通常的定性PCR仪外,还包括() A.水浴式PCR仪 B.梯度PCR仪 C.原位PCR仪 D.变温金属块式PCR仪 E.变温气流式PCR仪 5.按变温方式不同,PCR基因扩增仪可分为() A.水浴式PCR仪 B.梯度PCR仪 C.原位PCR仪 D.变温金属块式PCR仪 E.变温气流式PCR仪 6.目前市场上实时光定量PCR仪一般有哪些类别() A.金属板式实时定量PCR仪 B.梯度定量PCR仪 C.原位定量PCR仪 D.离心式实时定量PCR仪 E.各孔独立控温的定量PCR仪 7.下列产品哪些属于金属板式实时定量PCR仪() A.Light Cycle"荧光定量PCR仪 B.ABI7500荧光定量PCR仪 C.M灯公司Chromo4荧光定量PCR仪 D.Bio-rad公司iCycler荧光定量PCR仪 E.Rotor-Gene30O0荧光定量PCR仪 8.下列产品哪些属于离心式实时定量PCR仪() 2
7 A.水浴锅控温 B.压缩机控温 C.半导体控温 D.离心式空气控温 E.金属控温 4.普通 PCR 基因扩增仪除通常的定性 PCR 仪外,还包括( ) A.水浴式 PCR 仪 B.梯度 PCR 仪 C.原位 PCR 仪 D.变温金属块式 PCR 仪 E.变温气流式 PCR 仪 5.按变温方式不同,PCR 基因扩增仪可分为( ) A.水浴式 PCR 仪 B.梯度 PCR 仪 C.原位 PCR 仪 D.变温金属块式 PCR 仪 E.变温气流式 PCR 仪 6.目前市场上实时荧光定量 PCR 仪一般有哪些类别( ) A.金属板式实时定量 PCR 仪 B.梯度定量 PCR 仪 C.原位定量 PCR 仪 D.离心式实时定量 PCR 仪 E.各孔独立控温的定量 PCR 仪 7.下列产品哪些属于金属板式实时定量 PCR 仪( ) A.Light CycleTM 荧光定量 PCR 仪 B.ABI 7500 荧光定量 PCR 仪 C.MJ 公司 Chromo 4 荧光定量 PCR 仪 D.Bio-rad 公司 iCycler 荧光定量 PCR 仪 E.Rotor-Gene 3000 荧光定量 PCR 仪 8.下列产品哪些属于离心式实时定量 PCR 仪( )
A.Light Cycle"荧光定量PCR仪 B.ABI7500荧光定量PCR仪 C.MU公司Chromo4荧光定量PCR仪 D.Bio-rad公司iCycler荧光定量PCR仪 E.Rotor-Gene3000荧光定量PCR仪 9.PCR基因扩增仪的温度控制主要是指() A。温度的准确性控制 B.温度的均一性控制 C.退火温度控制 D.升降温速度控制 E.延伸温度控制 10.荧光定量PCR仪的荧光检测系统主要包括() A.发光二极管 B.激发光源 C.检测器 D.光度计 E,光电倍增管 11.荧光定量PCR仪的荧光强度减弱或不稳定,可能的原因有() A.滤光片发霉 B.光源损耗 C.半导体模块故障 D.荧光染料污染 E.光电倍增管灵敏度下降 三、简答题 1.什么是聚合酶链反应(PCR)技术? 2.PCR基因扩增仪的工作关键是什么?经历了怎样一个发展过程? 3.PCR基因扩增仪按照变温方式的不同可分哪几类?分别有什么特点 4.什么是梯度CR仪?它有什么优点?
8 A.Light CycleTM 荧光定量 PCR 仪 B.ABI 7500 荧光定量 PCR 仪 C.MJ 公司 Chromo 4 荧光定量 PCR 仪 D.Bio-rad 公司 iCycler 荧光定量 PCR 仪 E.Rotor-Gene 3000 荧光定量 PCR 仪 9.PCR 基因扩增仪的温度控制主要是指( ) A.温度的准确性控制 B.温度的均一性控制 C.退火温度控制 D.升降温速度控制 E.延伸温度控制 10.荧光定量 PCR 仪的荧光检测系统主要包括( ) A.发光二极管 B.激发光源 C.检测器 D.光度计 E.光电倍增管 11.荧光定量 PCR 仪的荧光强度减弱或不稳定,可能的原因有( ) A.滤光片发霉 B.光源损耗 C.半导体模块故障 D.荧光染料污染 E.光电倍增管灵敏度下降 三、简答题 1.什么是聚合酶链反应(PCR)技术? 2.PCR 基因扩增仪的工作关键是什么?经历了怎样一个发展过程? 3.PCR 基因扩增仪按照变温方式的不同可分哪几类?分别有什么特点。 4.什么是梯度 PCR 仪?它有什么优点?
5.何谓荧光实时定量PCR(RQ-PCR)技术? 6.实时荧光定量PCR仪有哪些种类,各有什么特点? 7.PCR基因扩增仪的温度控制包括哪些方面? 8.为什么反应管温控比模块温控更准确 9.实时荧光定量PCR扩增仪的荧光检测系统主要由哪两部分组成? 10.PCR扩增仪的热盖有什么作用?使用时有何注意点? 1L,简述PCR扩增仪的操作规程。 12.定量PCR扩增仪常见故障有哪些,如何解决? 13.简述PCR基因扩增仪的实际应用。 习题参考答案 一、名词解释 L.PCR技术:通过加热使双链DNM解开螺旋,在退火温度条件下引物同模板DNM杂交,在Taq DNA 聚合酶,TPs,Mg2+和合适pH缓冲液存在条件下延伸引物,重复上述过程至25-40个循环,达到体外 扩增核酸序列的目的。 2.TaqDNA聚合酶 一种从嗜热水生菌(Thermus aquaticus)分离得到的热稳定DWNA依赖的DN聚 合酶。 3.水浴锅PCR基因扩增仪:属于第一代PCR基因扩增仪,以不同温度的水浴锅串联成一个控温体 系。 4.压缩机PCR基因扩增仪:属于第二代PCR基因扩增仪,由压缩机自动控温,金属导热 5.Overshooting:指升温过程中,由于一些加热元件,比如半导体、金属块本身会积蓄能量,虽 然温度探头探测到温度到达了设定温度,但半导体、金属块上积蓄的能量仍然会传给PCR体系,造成实 际的温度高于设定的温度。 6.Undershooting:在降温过程中出现一个降温惯性,从而造成实际温度会短时间的低于设定的温 度。 7.半导体PCR基因扩增仪:属于第三代PCR基因扩增仪,由半导体自动控温,金属导热。 8.离心式空气加热PCR基因扩增仪:属于第三代PCR基因扩增仪,由金属线圈加热,采用空气作 为导热媒介。 9
9 5.何谓荧光实时定量 PCR(RQ-PCR)技术? 6.实时荧光定量 PCR 仪有哪些种类,各有什么特点? 7.PCR 基因扩增仪的温度控制包括哪些方面? 8.为什么反应管温控比模块温控更准确? 9.实时荧光定量 PCR 扩增仪的荧光检测系统主要由哪两部分组成? 10.PCR 扩增仪的热盖有什么作用?使用时有何注意点? 11.简述 PCR 扩增仪的操作规程。 12.定量 PCR 扩增仪常见故障有哪些,如何解决? 13.简述 PCR 基因扩增仪的实际应用。 习 题 参 考 答 案 一、名词解释 1.PCR 技术:通过加热使双链 DNA 解开螺旋,在退火温度条件下引物同模板 DNA 杂交,在 Taq DNA 聚合酶,dNTPs,Mg2+和合适 pH 缓冲液存在条件下延伸引物,重复上述过程至 25-40 个循环,达到体外 扩增核酸序列的目的。 2.TaqDNA 聚合酶:一种从嗜热水生菌(Thermus aquaticus)分离得到的热稳定 DNA 依赖的 DNA 聚 合酶。 3.水浴锅 PCR 基因扩增仪:属于第一代 PCR 基因扩增仪,以不同温度的水浴锅串联成一个控温体 系。 4.压缩机 PCR 基因扩增仪:属于第二代 PCR 基因扩增仪,由压缩机自动控温,金属导热。 5.Overshooting:指升温过程中,由于一些加热元件,比如半导体、金属块本身会积蓄能量,虽 然温度探头探测到温度到达了设定温度,但半导体、金属块上积蓄的能量仍然会传给 PCR 体系,造成实 际的温度高于设定的温度。 6.Undershooting:在降温过程中出现一个降温惯性,从而造成实际温度会短时间的低于设定的温 度。 7.半导体 PCR 基因扩增仪:属于第三代 PCR 基因扩增仪,由半导体自动控温,金属导热。 8.离心式空气加热 PCR 基因扩增仪:属于第三代 PCR 基因扩增仪,由金属线圈加热,采用空气作 为导热媒介
9.梯度PCR仪:带梯度PCR功能的基因扩增仪,在反应过程中每个孔的温度控制条件可以在指定 范围内按照梯度变化,根据结果,一步就可以摸索出最适合的反应条件。 IO.原位PCR仪:带原位扩增功能的基因扩增仪。 IL.原位PCR技术:即在细胞内进行PCR扩增,组织细胞的形态不被破坏,是原位杂交与PCR技术 结合而形成的新技术。 12.荧光实时定量PCR技术:在PR反应体系中加入特异性的荧光染料或探针,通过检测荧光信号, 实时监测整个CR反应过程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析。 13.位置的边缘效应:指PC基因扩增仪最外周的样品孔温度与中间的样品孔有差异,不均一,从 而导致外周样品孔的PC扩增效率不佳,该效应称为“位置的边缘效应”。 14.模块温控模式:仪器根据探测器直接探测承载样品金属基座的温度进行控制,该模式适用于长 时间的静态孵有,如连接、酶切、去磷酸化等 15.反应管温控模式:仪器根据探测器所探测到的温控模块的温度由计算机计算出样品管内或PCR 板孔内样品液的温度来进行控制。 二、选择题 【A型题】 1.D2.A3.B 4.C5.C6.E7.B8.C9.A10.B11.D 12.A13.C14.C15.C 16.D17.D18.B19.A20.B21.C22.E23.A 【X型题】 1.BCD 2.AC 3.CD 4.BC 5.ADE 6.ADE 7.BCD 8.AE 9.ABD 10.BC 11.ABE 三、简答题 1.什么是聚合酶链反应(PCR)技术? 答:PCR技术的本质是核酸扩增技术,通过加热使双链DNA解开螺旋,在退火温度条件下引物同模 板DNA杂交,在Taq DNA聚合酶,dNTPs,Mg2+和合适pH缓冲液存在条件下延伸引物,重复上述“变性 一退火一引物延伸”过程至25-40个循环,呈指数级扩大待测样本中的核酸拷贝数,可以在体外对目的 核酸进行大量复制
10 9.梯度 PCR 仪:带梯度 PCR 功能的基因扩增仪,在反应过程中每个孔的温度控制条件可以在指定 范围内按照梯度变化,根据结果,一步就可以摸索出最适合的反应条件。 10.原位 PCR 仪:带原位扩增功能的基因扩增仪。 11.原位 PCR 技术:即在细胞内进行 PCR 扩增,组织细胞的形态不被破坏,是原位杂交与 PCR 技术 结合而形成的新技术。 12.荧光实时定量 PCR 技术:在 PCR 反应体系中加入特异性的荧光染料或探针,通过检测荧光信号, 实时监测整个 PCR 反应过程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析。 13.位置的边缘效应:指 PCR 基因扩增仪最外周的样品孔温度与中间的样品孔有差异,不均一,从 而导致外周样品孔的 PCR 扩增效率不佳,该效应称为“位置的边缘效应”。 14.模块温控模式:仪器根据探测器直接探测承载样品金属基座的温度进行控制,该模式适用于长 时间的静态孵育,如连接、酶切、去磷酸化等。 15.反应管温控模式:仪器根据探测器所探测到的温控模块的温度由计算机计算出样品管内或 PCR 板孔内样品液的温度来进行控制。 二、选择题 【A 型题】 1.D 2.A 3.B 4.C 5.C 6.E 7.B 8.C 9.A 10.B 11.D 12.A 13.C 14.C 15.C 16.D 17.D 18.B 19.A 20.B 21.C 22.E 23.A 【X 型题】 1.BCD 2.AC 3.CD 4.BC 5.ADE 6.ADE 7.BCD 8.AE 9.ABD 10.BC 11.ABE 三、简答题 1.什么是聚合酶链反应(PCR)技术? 答:PCR 技术的本质是核酸扩增技术,通过加热使双链 DNA 解开螺旋,在退火温度条件下引物同模 板 DNA 杂交,在 Taq DNA 聚合酶,dNTPs,Mg2+和合适 pH 缓冲液存在条件下延伸引物,重复上述“变性 →退火→引物延伸”过程至 25-40 个循环,呈指数级扩大待测样本中的核酸拷贝数,可以在体外对目的 核酸进行大量复制