实验 46 逆境对植物的伤害（电导仪法） 一、原理 植物细胞膜对维持细胞的微环境和正常的代谢起着重要的作用。在正常情况下，细胞膜对物质 具有选择透性能力。当植物受到逆境影响时，如高温、低温、干旱、盐渍或病原菌侵染后，细 胞膜遭到破坏，膜透性增大，从而使细胞内的电解质外渗，以致植物细胞浸提液的电导率增大。 膜透性增大的程度与逆境胁迫强度有关，也与植物抗逆性的强弱有关。这样，比较不同作物或 同一作物不同品种在相同胁迫温度下膜透性的增大程度，即可比较作物间或品种间的抗逆性强 弱，因此，电导法目前已成为作物抗性栽培、育种上鉴定植物抗逆性强弱的一个方法。 二、实验材料、试剂与仪器设备 （一）实验材料 植物叶片。 （二）试剂 NaCl 溶液。 （三）仪器设备 电导仪，天平，温箱，真空干燥器，抽气机，恒温水浴锅，注射器。 三、实验步骤 1. 制作标准曲线 如需定量测定透性变化，可用纯 NaCl 配成 0 、 10 、 20 、 40 、 60 、 80 、 100 μg/mL 的标准液，在 20 ～ 25 ℃恒温下用电导仪测定，可读出电导率。以电导 率为纵坐标， NaCl 量为横坐标做标准曲线。 2. 选取小麦或其他植物在一定部位上生长叶龄相似的叶子若干，剪下后，先用纱布拭净，称 取两份，各重 2 g 。 3. 一份插入小杯中放在 40 ℃恒温箱内萎蔫 0.5 ～ 1 h ，另一份插入水杯中放在室温下做 对照。处理后分别用蒸馏水冲洗两次，并用洁净滤纸吸干。然后剪成长约 1 cm 小段放入小烧 杯中（大小以能够容纳电极为度），并用玻棒或干净尼龙网压住，在杯中准确加入蒸馏水 20 mL ， 浸没叶片。 4. 放入真空干燥器，用抽气机抽气 7 ～ 8 min 以抽出细胞间隙中的空气。重新缓缓放入空 气，水即被压入组织中而使叶下沉。 5. 将抽过气的小烧杯取出，放在实验桌上静置 20 min ，然后用玻棒轻轻搅动叶片，在 20 ～ 25 ℃恒温下，用电导仪测定溶液电导率。 6. 测过电导率之后，再放入 100 ℃沸水浴中 15 min ，以杀死植物组织，取出放入自来水冷 却 10 min ，在 20 ～ 25 ℃恒温下测其煮沸电导率。 四、结果计算 伤害率可以用下列三种形式表示： 1. 2. 3. [ 注意事项 ] 1. 整个过程中，叶片接触的用具必须绝对洁净（全部器皿要洗净），也不要用手直接接触叶 片，以免污染
实验 46 逆境对植物的伤害（电导仪法） 一、原理 植物细胞膜对维持细胞的微环境和正常的代谢起着重要的作用。在正常情况下，细胞膜对物质 具有选择透性能力。当植物受到逆境影响时，如高温、低温、干旱、盐渍或病原菌侵染后，细 胞膜遭到破坏，膜透性增大，从而使细胞内的电解质外渗，以致植物细胞浸提液的电导率增大。 膜透性增大的程度与逆境胁迫强度有关，也与植物抗逆性的强弱有关。这样，比较不同作物或 同一作物不同品种在相同胁迫温度下膜透性的增大程度，即可比较作物间或品种间的抗逆性强 弱，因此，电导法目前已成为作物抗性栽培、育种上鉴定植物抗逆性强弱的一个方法。 二、实验材料、试剂与仪器设备 （一）实验材料 植物叶片。 （二）试剂 NaCl 溶液。 （三）仪器设备 电导仪，天平，温箱，真空干燥器，抽气机，恒温水浴锅，注射器。 三、实验步骤 1. 制作标准曲线 如需定量测定透性变化，可用纯 NaCl 配成 0 、 10 、 20 、 40 、 60 、 80 、 100 μg/mL 的标准液，在 20 ～ 25 ℃恒温下用电导仪测定，可读出电导率。以电导 率为纵坐标， NaCl 量为横坐标做标准曲线。 2. 选取小麦或其他植物在一定部位上生长叶龄相似的叶子若干，剪下后，先用纱布拭净，称 取两份，各重 2 g 。 3. 一份插入小杯中放在 40 ℃恒温箱内萎蔫 0.5 ～ 1 h ，另一份插入水杯中放在室温下做 对照。处理后分别用蒸馏水冲洗两次，并用洁净滤纸吸干。然后剪成长约 1 cm 小段放入小烧 杯中（大小以能够容纳电极为度），并用玻棒或干净尼龙网压住，在杯中准确加入蒸馏水 20 mL ， 浸没叶片。 4. 放入真空干燥器，用抽气机抽气 7 ～ 8 min 以抽出细胞间隙中的空气。重新缓缓放入空 气，水即被压入组织中而使叶下沉。 5. 将抽过气的小烧杯取出，放在实验桌上静置 20 min ，然后用玻棒轻轻搅动叶片，在 20 ～ 25 ℃恒温下，用电导仪测定溶液电导率。 6. 测过电导率之后，再放入 100 ℃沸水浴中 15 min ，以杀死植物组织，取出放入自来水冷 却 10 min ，在 20 ～ 25 ℃恒温下测其煮沸电导率。 四、结果计算 伤害率可以用下列三种形式表示： 1. 2. 3. [ 注意事项 ] 1. 整个过程中，叶片接触的用具必须绝对洁净（全部器皿要洗净），也不要用手直接接触叶 片，以免污染
2. 各处理和对照的待测液的体积要一样。 3. 测定后电极要清洗干净。 [ 思考题 ] 植物抗逆性与细胞膜透性有何关系 ? 用电导仪法定量测定细胞膜透性变化为什么要用纯 NaCl 做标准曲线 ? 【附注】 DDS-11A 型电导率仪的使用方法 1 ．未打开电源开关之前，电表指针应指零；否则，应调整表头螺丝使指针指零。 2 ．打开电源开关，指示灯即亮，预热至指针稳定为止。 3 ．把开关拨至“校正”挡，调节“调正”旋钮使指针停在最大刻度。 4 ．当被测物的电导率低于 300 μS/cm 时，将开关拨向“低周”；当被测物的电导率为 300 ～ 10 3 μS ／ cm 时，将开关拨向“高周”。 5 ．将量程开关打到所需范围。若初测不知测量范围大小，应先将量程开关打到最大位置，然 后逐格下降，以防过载，否则指针迅速摆动时易被打弯。 6 ．将电极插入电极插口内，旋紧插口上的紧固螺丝，同时把电极常数调节器调节在与之配用 的电极常数相应的位置上。（测量范围在 10 ～ 10 4 μS/cm 时，使用 DJS-I 型铂黑电极； 当被测物的电导率大于 10 4 μS ／ cm 时，则应选用 DJS-10 型铂黑电极，这时应调节在与 之所配用电极常数 1/10 的位置上，例如：电极常数为 9.8 ，则应调节在 0.98 位置上，但 要将测得的读数乘以 10 ，即为被测液的电导率）。 7 ．将电极完全浸入待测液中，把开关打到“测量”挡，从电表读数乘以量程开关所指的倍数 （量程开关指红色时，读表中的红色数字；指黑色时则读黑色数字），即为被测溶液的电导率。 8 ．每测完一个样品，必须用蒸馏水冲洗电极，然后用滤纸吸干水珠，再测另一个样品
2. 各处理和对照的待测液的体积要一样。 3. 测定后电极要清洗干净。 [ 思考题 ] 植物抗逆性与细胞膜透性有何关系 ? 用电导仪法定量测定细胞膜透性变化为什么要用纯 NaCl 做标准曲线 ? 【附注】 DDS-11A 型电导率仪的使用方法 1 ．未打开电源开关之前，电表指针应指零；否则，应调整表头螺丝使指针指零。 2 ．打开电源开关，指示灯即亮，预热至指针稳定为止。 3 ．把开关拨至“校正”挡，调节“调正”旋钮使指针停在最大刻度。 4 ．当被测物的电导率低于 300 μS/cm 时，将开关拨向“低周”；当被测物的电导率为 300 ～ 10 3 μS ／ cm 时，将开关拨向“高周”。 5 ．将量程开关打到所需范围。若初测不知测量范围大小，应先将量程开关打到最大位置，然 后逐格下降，以防过载，否则指针迅速摆动时易被打弯。 6 ．将电极插入电极插口内，旋紧插口上的紧固螺丝，同时把电极常数调节器调节在与之配用 的电极常数相应的位置上。（测量范围在 10 ～ 10 4 μS/cm 时，使用 DJS-I 型铂黑电极； 当被测物的电导率大于 10 4 μS ／ cm 时，则应选用 DJS-10 型铂黑电极，这时应调节在与 之所配用电极常数 1/10 的位置上，例如：电极常数为 9.8 ，则应调节在 0.98 位置上，但 要将测得的读数乘以 10 ，即为被测液的电导率）。 7 ．将电极完全浸入待测液中，把开关打到“测量”挡，从电表读数乘以量程开关所指的倍数 （量程开关指红色时，读表中的红色数字；指黑色时则读黑色数字），即为被测溶液的电导率。 8 ．每测完一个样品，必须用蒸馏水冲洗电极，然后用滤纸吸干水珠，再测另一个样品