实验 15 希尔反应的观察 (离体叶绿体对染料的还原作用) 一、原理 希尔反应( Hill reaction )是绿色植物的离体叶绿体在光下分解水,放出氧气,同时还原 电子受体的反应,它是光合作用反应中的重要现象。氧化剂 2,6 –二氯酚靛酚是一种蓝色染 料,接受电子和 H + 后被还原成无色,可以直接观察颜色的变化,也可用分光光度计对还原 量进行精确测定。 二、实验材料、试剂与仪器设备 (一)实验材料 菠菜或其他绿色植物新鲜叶片。 (二)试剂 0.1 % 2,6 –二氯酚靛酚。 (三)仪器设备 研钵,石英砂,小试管,试管架,漏斗,纱布,小烧杯,剪刀。 三、实验步骤 取新鲜的菠菜或其他植物叶片 0.5 g ,剪碎后放入研钵中,加少量石英砂,研磨成匀浆。加 50 mL 蒸馏水,通过 5 ~ 6 层纱布,过滤到小烧杯中,即得到叶绿体粗悬浮液。 取试管两支。每管中加入叶绿体悬浮液 5 mL , 0.1 % 2,6 –二氯酚靛酚溶液 5 ~ 6 滴, 摇匀。将其中一管置于直射光下,另一管置于暗处,注意日光下的试管液颜色变化。 5 ~ 8 min 后,将置于暗处的试管取出,比较两管溶液颜色变化,并解释原因。 [ 思考题 ] 试管中蓝色褪色的原因是什么 ? 与光照有什么关系 ?
实验 15 希尔反应的观察 (离体叶绿体对染料的还原作用) 一、原理 希尔反应( Hill reaction )是绿色植物的离体叶绿体在光下分解水,放出氧气,同时还原 电子受体的反应,它是光合作用反应中的重要现象。氧化剂 2,6 –二氯酚靛酚是一种蓝色染 料,接受电子和 H + 后被还原成无色,可以直接观察颜色的变化,也可用分光光度计对还原 量进行精确测定。 二、实验材料、试剂与仪器设备 (一)实验材料 菠菜或其他绿色植物新鲜叶片。 (二)试剂 0.1 % 2,6 –二氯酚靛酚。 (三)仪器设备 研钵,石英砂,小试管,试管架,漏斗,纱布,小烧杯,剪刀。 三、实验步骤 取新鲜的菠菜或其他植物叶片 0.5 g ,剪碎后放入研钵中,加少量石英砂,研磨成匀浆。加 50 mL 蒸馏水,通过 5 ~ 6 层纱布,过滤到小烧杯中,即得到叶绿体粗悬浮液。 取试管两支。每管中加入叶绿体悬浮液 5 mL , 0.1 % 2,6 –二氯酚靛酚溶液 5 ~ 6 滴, 摇匀。将其中一管置于直射光下,另一管置于暗处,注意日光下的试管液颜色变化。 5 ~ 8 min 后,将置于暗处的试管取出,比较两管溶液颜色变化,并解释原因。 [ 思考题 ] 试管中蓝色褪色的原因是什么 ? 与光照有什么关系 ?