常用的物转基因方法 按其是否需要通过组织培养、再生植株可分成 两大类,第一类需要通过组织培养再生植株, 常用的方法有农行菌介导转化法、基因抢法; 另一类方法不需要通过组织培养,目前比较成 熟的主要有花粉管通道法
常用的植物转基因方法 ◼ 按其是否需要通过组织培养、再生植株可分成 两大类，第一类需要通过组织培养再生植株， 常用的方法有农杆菌介导转化法、基因枪法； 另一类方法不需要通过组织培养，目前比较成 熟的主要有花粉管通道法
幸用的动物转基因技术 1.显微注射DNA的方法在显微镜下,用一根极细的瓌璃 针(直径1-2微米)直接将DNA注射到胚朎的细胞核内, 再把注射过DNA的胚胎移植到动物体内,使之发育成正常的 幼仔。用这种方法生产的动物约有十分之一是整合外源基因 的转基因动物 2.体细胞核移植方法先在体外培养的体细胞中进行基因 导入,筛选获得带转基因的细胞。然后,将带转基因体细胞 移植到去掉细胞核的卵细胞中,生产重构胚胎。重构胚胎经 移植到母体中,产生的仔畜百分之百是转基因动物
1．显微注射DNA的方法 在显微镜下，用一根极细的玻璃 针（直径1－2微米）直接将DNA注射到胚胎的细胞核内， 再把注射过DNA的胚胎移植到动物体内，使之发育成正常的 幼仔。用这种方法生产的动物约有十分之一是整合外源基因 的转基因动物。 2．体细胞核移植方法 先在体外培养的体细胞中进行基因 导入，筛选获得带转基因的细胞。然后，将带转基因体细胞 移植到去掉细胞核的卵细胞中，生产重构胚胎。重构胚胎经 移植到母体中，产生的仔畜百分之百是转基因动物。 常用的动物转基因技术
1.农杆菌介导转化法 ■农杆菌是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌 它能在自然条件下趋化性地感染大多数双子叶植物的 受伤部位,并诱导产生冠瘿瘤或发状根。根癌农杄菌 和发根农杆菌中细胞中分别含有Ti粒和R粒 其上有一段T-DNA,农杆菌通过侵染植物伤口进入 细胞后,可将T-DNA插入到植物基因组中。因此 农杆菌是一种天然的植物遗传转化体系。人们将目的 基因插入到经过改造的T-DNA区,借助农杆菌的感 染实现外源基因向植物细胞的转移与整合,然后通过 细胞和组织培养技术,再生出转基因植株
1．农杆菌介导转化法 ◼ 农杆菌是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌， 它能在自然条件下趋化性地感染大多数双子叶植物的 受伤部位，并诱导产生冠瘿瘤或发状根。根癌农杆菌 和发根农杆菌中细胞中分别含有 T i质粒和 R i质粒， 其上有一段 T－DNA，农杆菌通过侵染植物伤口进入 细胞后，可将 T－DNA插入到植物基因组中。因此， 农杆菌是一种天然的植物遗传转化体系。人们将目的 基因插入到经过改造的 T－DNA区，借助农杆菌的感 染实现外源基因向植物细胞的转移与整合，然后通过 细胞和组织培养技术，再生出转基因植株
2.基因枪介导转化法 利用火药爆炸或高压气体加速(这一加速设备 被称为基因枪),将包裹了带目的基因的DNA溶液 的高速微弹直接送入完整的植物组织和细胞中,然后 通过细胞和组织培养技术,再生出植株,选出其中转 基因阳性植株即为转基因植株。与农杆菌转化相比 基因枪法转化的一个主要优点是不受受体植物范围的 限制,而且其载体质粒的构建也相对简单,因此也是 目前转基因研究中应用较为广泛的一种方法
2．基因枪介导转化法 利用火药爆炸或高压气体加速（这一加速设备 被称为基因枪），将包裹了带目的基因的 D NA溶液 的高速微弹直接送入完整的植物组织和细胞中，然后 通过细胞和组织培养技术，再生出植株，选出其中转 基因阳性植株即为转基因植株。与农杆菌转化相比， 基因枪法转化的一个主要优点是不受受体植物范围的 限制，而且其载体质粒的构建也相对简单，因此也是 目前转基因研究中应用较为广泛的一种方法
3.花粉管通道法 在授粉后向子房注射含目的基因的DNA溶液,利用植物在开花、 受精过程中形成的花粉管通道,将外源DNA导入受精卵细跑 并进一步地被整合到受体细胞的基因组中,随着受精卵的发育而 成为带转基因的新个体。该方法于80年代初期由我国学者周光宇 提出,我国目前推广面积最大的转基因抗虫棉就是用花粉管通道 法培育岀来的。该法的最大优点是不依赖组织培养人工再生植株, 技术简单,不需要装备精良的实验室,常规育种工作者易于掌握
3．花粉管通道法 ◼ 在授粉后向子房注射含目的基因的 D NA溶液，利用植物在开花、 受精过程中形成的花粉管通道，将外源 D NA导入受精卵细胞， 并进一步地被整合到受体细胞的基因组中，随着受精卵的发育而 成为带转基因的新个体。该方法于80年代初期由我国学者周光宇 提出，我国目前推广面积最大的转基因抗虫棉就是用花粉管通道 法培育出来的。该法的最大优点是不依赖组织培养人工再生植株， 技术简单，不需要装备精良的实验室，常规育种工作者易于掌握
关于克隆 “克隆”是从英文“ clone音而来,在生物学领域有3个不同层次 的含义。 1.在分子水平,克隆一艘指DNA克隆也叫分子克隆。含义是将某 特定DNA片断通过重组DNA技术插入到一个载体(如质粒和病 毒等)中,然后在宿主细胞中进行自我复制所得到的大量完全相同 的该DNA片断的“群体”。 2.在细胞水平,克隆实质由一个单一的共同祖先细胞分裂所形成的 个细胞群体。其中每个细胞的基因都相同。比如,使一个细胞 在体外的培养液中分裂若干代所形成的一个遗传背景完全相同的 细胞集体即为一个细胞克隆。 3.在个体水平,克隆是指基因型完全相同的两个或更多的个体组成 的一个群体。比如,两个同卵双胞胎即为一个克隆!因为他(她) 们来自同一个卵细胞,所以遗传背景完全一样
关于克隆 “克隆”是从英文“clone”音译而来，在生物学领域有3个不同层次 的含义。 1．在分子水平，克隆一般指DNA克隆(也叫分子克隆)。含义是将某 一特定DNA片断通过重组DNA技术插入到一个载体(如质粒和病 毒等)中，然后在宿主细胞中进行自我复制所得到的大量完全相同 的该DNA片断的“群体” 。 2．在细胞水平，克隆实质由一个单一的共同祖先细胞分裂所形成的 一个细胞群体。其中每个细胞的基因都相同。比如，使一个细胞 在体外的培养液中分裂若干代所形成的一个遗传背景完全相同的 细胞集体即为一个细胞克隆。 3．在个体水平，克隆是指基因型完全相同的两个或更多的个体组成 的一个群体。比如，两个同卵双胞胎即为一个克隆！因为他（她） 们来自同一个卵细胞，所以遗传背景完全一样。 ＠