(1)PCR扩增目的基因红细胞生成因子nap基因部分片段； (2)掌握PCR扩增原理； (3)学习并熟悉PCR操作

实时荧光定量PCR的基本原理（掌握） 实时荧光定量PCR引物和探针的设计（熟悉） 实时荧光定量PCR反应体系和条件的优化（熟悉） 实时荧光定量PCR测定的数据分析（掌握） 临床基因扩增实验室的设置与人员资质要求（了解）

实验一 人类体细胞染色体标本制备与核型分析 Metaphase Chromosome Preparation and Analysis of Karyotype 实验二 X和Y染色质标本的制作与观察 X and Y Chromatin Preparation and Observation 实验三 姊妹染色单体交换实验 Sister Chromosome Exchange （SCE） 实验四 银染核仁形成区与近端着丝粒染色体随体联合 AgNO3 Staining NOR and Satellite Association of Acrocentric Chromosome 实验五 核酸提取 The Extraction of Nucleic Acid 实验六 DNA重组技术 Recombinant DNA 实验七 PCR－RFLP分析技术 Polymerase Chain Reaction –Restriction Fragment Length Polymorphism 实验八 PCR-SSCP Polymerase Chain Reaction-Single Strand Conformation Polymorphism 实验九 PCR-DGGE Polymerase Chain Reaction-Denaturing Gradient Gel Electrophoresis 实验十 PCR-DHPLC Polymerase Chain Reaction-Denatured High Performance Liquid Chromatography

一、PCR的基本原理 PCR的基本原理 变性、复性、半保留复制 PCR三步曲

The principle of the polymerase chain reaction (PCR) was first reported in 1971 (Kleppe et al., 1971), but it was only after the dis￾covery of the thermostable Taq DNA polymerase (Saiki et al., 1988; Lawyer et al., 1989) that this technology became easy to use

复旦大学：《生物化学》课程教学资源（实验讲稿）综合实验二 人乙醛脱氢酶2（ALDH2）多态性分析——PCR-APLP以及PCR产物电泳鉴定及结果分析

第一节 分子杂交与印迹技术 Molecular Hybridization and Blotting Technique 第二节 PCR技术的原理与应用 The Principle and Application of PCR Technology 第三节 基因文库 Gene Library 第四节 生物芯片技术 Biological Chip Technique

核酸的基本操作技术： 1）核酸的简介 2）基因组DNA提取 3）质粒DNA提取 4）真核细胞总RNA提取 5）琼脂糖凝胶电泳 6）核酸分子杂交 7）聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR) 8） RT-PCR

本书介绍组织病理学常用的多种技术。包括常见的技术，即福尔马林固定、石蜡包埋、HE染色技术，同时也介绍了常用的特殊染色技术，免疫组织化学技术，并简明地介绍了分子生物学技术的基本理论以及在组织病理学中的应用。 第一篇 石蜡切片技术 第一章 组织标本的处理 第一节 取材 第二节 组织的固定 第三节 大体标本的处理和固定 第四节 陈列标本的固定 第五节 脱钙 第六节 组织的冲洗 第二章 石蜡包埋技术 第一节 脱水 第二节 透明 第三节 浸蜡 第四节 包埋 第三章 切片技术 第一节 切片刀 第二节 切片机 第三节 石蜡切片的制作 第四节 特殊组织石蜡切片的制作 第五节 石蜡切片的异常及处理 第四章 染色与染色剂 第一节 染色的基本原理 第二节 染色剂染色的化学基础 第三节 染色剂的分类 第四节 常用染色剂及配制 第五节 苏木素—伊红染色法 第六节 封固剂 第五章 特殊染色技术 第一节 结缔组织染色法 第二节 脂类染色法 第三节 糖原及粘液染色法 第四节 色素染色法 第五节 神经组织染色法 第六节 核酸及核蛋白染色法 第七节 肌肉组织染色法 第八节 病原微生物染色法 第九节 特殊染色技术的应用 第二篇 免疫组织化学和亲和免疫组织化学技术 第一章 免疫组织化学技术 第一节 基本原理 第二节 染色步骤 第三节 常用试剂的配制 第二章 亲和免疫组织化学技术 第三篇 分子生物学技术 第一章 核酸原位杂交技术 第一节 核酸原位杂交的基本原理 第二节 核酸原位杂交的主要过程 第三节 核酸原位杂交的基本操作步骤 第四节 常用试剂的配制 第五节 核酸原位杂交的应用 第二章 原位PCR技术 第二节 基本类型 第三节 基本步骤 第四节 原位PCR技术的应用

1.了解某一特定组织或细胞某一特定mRNA转录量的变化,如 RT-PCR、 Northernblot等 2.了解某一特定组织或细胞全部mRNA转录量的变化,如 DD-PCR、基因芯片等。 3.获得某一特定组织或细胞全部mRNA,以便建立cDNA库等