中国农业大学：《发酵工程》课程教学资源（讲义）实验二 霉菌产蛋白酶发酵培养基条件的确定

实验一 细菌感受态的制备和质粒的转化. 2 实验二 碱变性法提取质粒 DNA . 6 实验三 水平式琼脂糖凝胶电泳法检测 DNA . 11 实验四 DNA 的限制性内切酶酶切 . 15 实验五 DNA 的回收与连接 . 18 实验六 基因的 PCR 扩增. 23 实验七 用温度敏感型启动子表达系统表达目的基因. 29 实验八 基因组合生物合成新化合物. 36 实验九 药用甘草片中甘草酸含量的分析及其质量评价. 47 实验十 牛奶中酪蛋白和乳蛋白素粗品的制备. 48 实验十一 固定化细胞法生产 L-天冬氨酸和 L-丙氨酸. 50 实验十二 重组水蛭素Ⅲ的制备. 57 实验十三 酸醇提取法制备猪胰岛素. 65 实验十四 多肽缩宫素的 Fmoc 固相合成法. 70 实验十五 酵母 RNA 的制备和单核苷酸的离子交换柱层析分析. 76 实验十六 单核苷酸衍生物制备. 82 实验十七 胰弹性蛋白酶的制备及活力测定. 85 实验十八 超氧化物歧化酶的分离纯化. 89 实验十九 重组门冬酰胺酶Ⅱ的纯化与分析. 97

山东师范大学：《微生物工程》课程教学资源（PPT课件）实验一 从土壤中分离纯化蛋白酶产生菌

实验室一些常用知识介绍 3 实验一：离子交换法分离氨基酸 7 实验二：垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质 9 实验三：马铃薯多酚氧化酶制备及性质实验13 实验四：碱性蛋白酶活力的测定 16 实验五: 植物组织中 DNA 和 RNA 的提取和鉴定 19 实验六：糖酵解中间产物的鉴定22 实验七：综合设计实验—蛋白质的制备及其含量测定24 实验八：还原糖和总糖的测定（3，5-二硝基水杨酸法） 35 实验九：发酵过程中无机磷的利用37 实验十：氨基酸的分离鉴定—纸层析法39 实验十一：细菌血栓溶解酶活性测定41 实验十二：可溶性糖的硅胶 G 薄层层析43 实验十三：植物材料中总黄酮的提纯与鉴定44 实验十四 ： IEF/SDS-PAGE双向电泳分离鉴定蛋白质

1.理解酶的定义、作用特点及影响酶促反应的因素； 2.了解食品加工中内源酶和外源酶的作用； 3.理解不同淀粉酶的作用特点、产物特点及应用； 4.了解蛋白酶的分类、来源、在食品加工中的应用； 5.了解果胶酶、多酚氧化酶及其它氧化还原酶类及其在食品工业中的应用。 6.了解固定化酶的特点，制备方法及其在食品工业中的应用

第一节 蛋白质的酶促降解 . 253 一、蛋白酶 . 253 二、肽酶 . 254 第二节 氨基酸的降解与转化 . 255 一、脱氨基作用 . 255 二、脱羧基作用 . 258 三、氨基酸分解产物的去向 . 260 第三节 氨基酸的生物合成 . 264 一、生物固氮 . 265 二、硝酸还原作用 . 267 三、氨的同化 . 268 四、氨基酸的生物合成 . 270

1. Allosteric Control 变构控制，别构控制 2. Multiple Forms of Enzymes. Isozymes, or isoenzymes 同功酶 3. Reversible Covalent Modification. 可逆共价修饰 4. Proteolytic Activation. 蛋白酶作用 5. Controlling the Amount of Enzyme Present. 控制酶量

第一节 氨基酸的生物合成 ➢ 还原性氨基化作用 ➢ 氨基转移作用 ➢ 氨基酸的相互转化作用 第二节 蛋白质的生物合成 ➢ 蛋白质合成体系的组成 ➢ 蛋白质的合成过程 ➢ 蛋白质合成后的定向输送与修饰 第三节 蛋白质的生物降解 ➢ 蛋白酶 ➢ 蛋白质的消化吸收 ➢ 食品蛋白质的营养价值 第四节 氨基酸的分解 ➢ 氨基酸的脱氨基作用 ➢ 氨基酸的转氨基作用 ➢ 联合脱氨基作用 ➢ 氨基酸的脱羧基作用 ➢ 氨基酸碳骨架的氧化途径 ➢ 含氮排泄物的形成 第五节 蛋白质代谢的调节 ➢ 遗传的控制 ➢ 酶的控制 ➢ 激素的调节

(1）习惯命名法: 根据其催化底物来命名(蛋白酶;淀粉酶) 根据所催化反应的性质来命名(水解酶;转氨酶 裂解酶等) 结合上述两个原则来命名(琥珀酸脱氢酶) 有时在这些命名基础上加上酶的来源或其它特点 (胃蛋白酶、胰蛋白酶、硷性磷酸脂酶和酸性磷 酸脂酶)

一、选择题:A型题(每题1分,共40分) 1.消化蛋白质所需的胰蛋白酶、糜蛋白酶是由哪个脏器分泌的? A.胃B.小肠C.胰腺D.肝脏E.胆囊 2.下列哪项运动形式是胃特有的? A.蠕动B.紧张性收缩C.容受性舒张D.分节运动E.袋状往返运动