1、蛋白质的化学组成、主要功能及分类； 2、氨基酸的结构、分类、理化性质及分离与分析； 3、蛋白质的分子结构； 4、蛋白质的结构与功能的关系； 5、蛋白质的性质； 6、蛋白质的分离纯化

第一章生物化学实验基本知识与操作 第一节生物化学实验基本知识 第二节 第二章分光光度技术 实验一双缩脲法测定蛋白质浓度 实验二 Folin-酚试剂法(Lowry 法)测定蛋白质浓度 实验三紫外分光光度法测定蛋白质浓度 实验四考马斯(Comessie)亮兰结合法测定蛋白质浓度 实验五BCA 法测定蛋白质浓度 实验六激素对血糖浓度的影响及血糖的测定 第三章生物大分子的提取、沉淀和离心分离技术 第一节生物材料的选取与预处理 第二节生物大分子的沉淀分离技术 第三节生物大分子离心分离技术 实验七鸡血SOD的提取、分离及活力测定 实验八碱性磷酸酶的制备及活力测定 实验九酪蛋白的制备 实验十动物肝脏中提取DNA 实验十一猪心肌细胞线粒体可溶性ATP合酶的提 第四章电泳技术 实验十二DNA 琼脂糖凝胶电泳 实验十三血浆脂蛋白琼脂糖凝胶电泳 实验十四聚丙烯酰胺凝胶电泳分离乳酸脱氢酶同工酶 实验十五蛋白质分子量的测定——SDS-聚丙烯凝胶电泳 实验十六聚丙烯酰胺等电聚焦电泳 第五章层析技术 第一节 层析技术概述 吸附层析 第三节 分配层析 第四节 离子交换层析 第五节 凝胶层析 第六节亲和层析 第七节 高效液相层析 实验十七氨基酸的纸上层析与氨基酸的转氨基作用 实验十八血清-球蛋白的分离纯化与鉴定 实验十九 亲和层析纯化胰蛋白酶 实验十二离子交换层析分离氨基酸 实验二十一蛋白质分子量测定——凝胶过滤层析法 第六章 分子生物学基本技术 核酸分子杂交 聚合酶链反应 第三节分子克隆 实验二十二Southern杂交分析 实验二十三 Northern 杂交分析 实验二十四 PCR 基因扩增 验二十五质粒DNA的提取及酶切 实验二十六 DNA重组实验 实验二十七大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 附录一常用缓冲液的配制方法 附录二易变质及需要特殊方法保存的试剂 附录三一般化学试剂的分级 附录四 English words in the lab

前言 第一部分 有机化学实验的一般常识 实验须知 实验室的安全 有机实验室常用仪器、装置及设备 玻璃仪器的清洗和干燥 实验预习、实验报告的基本要求及示例 第二部分 基本实验 实验一 简单玻璃工操作 实验二 回收乙醇的蒸馏及乙醇折光率的测定 实验三 熔点及沸点（微量法）测定 实验四 重结晶 实验五 脂肪烃及芳香烃的性质 实验六 萃取－绿色植物叶色素的提取 实验七 用柱色谱法分离绿色植物叶色素 实验八 石油醚的纯化 实验九 环己烯的制备 实验十 2-氯－2－甲基丙烷的小型制备 实验十一 正溴丁烷的制备 实验十二 卤代烃及醇、酚、醚的性质 实验十三 正丁醚的制备 实验十四 水蒸汽蒸馏 实验十五 减压蒸馏 实验十六 2－硝基－1,3－苯二酚的合成 实验十七 醛、酮、羧酸及其衍生物的性质 实验十八 食品抗氧剂TBHQ的合成 实验十九 己二酸的小型制备 实验二十 乙酸乙酯的合成 实验二十一 丁二酸二丁酯的制备 实验二十二 阿司匹灵（乙酰水杨酸）的小型制备 实验二十三 双烯合成反应－蒽和马来酸酐的加成 实验二十四 生长素“2,4－D”的小型制备 实验二十五 乙酰苯胺的简单合成 实验二十六 有机化合物的鉴别实验 实验二十七 糖的性质及旋光度测定 实验二十八 葡萄糖酯的制备（糖的酯化及异构化） 实验二十九 三组分混合物的分离 实验三十 酸性橙（II）〔2号橙〕染料的合成及织物的染色 实验三十一 薄层色谱 实验三十二 胺及氨基酸的性质 实验三十三 从茶叶提取咖啡因 第三部分 参考实验 实验三十四 7,7－二氯双环〔4.2.0〕庚烷的制备（相转移法） 实验三十五 三苯甲醇的制备 实验三十六 冬青油（水杨酸甲脂）的制备 实验三十七 乙酰乙酸乙酯的合成 实验三十八 邻氨基苯甲酸的制备 实验三十九 光化异构化和顺、反偶氮苯的鉴定 实验四十 从头发（或猪毛）提取胱氨酸 实验四十一 从滤纸碎片制备CMC-Na 实验四十二 酸醇法从黄柏中提取黄连素 实验四十三 微型化实验：肉桂酸的制备、环己酮的制备 实验四十四 从红辣椒中分离红色素 实验四十五 外消旋苦杏仁酸的拆分

第一章 生物化学部分.1 实验一、双缩脲法测定血清蛋白质含量. 1 实验二、纸层析法观察转氨基作用. 2 实验三、血清醋酸纤维薄膜电泳. 4 实验四、血清丙氨酸氨基转移酶活性测定. 7 实验五、胰酶对蛋白质的消化和影响酶作用的因素. 10 实验六、酶的竞争性抑制作用. 13 实验七、血糖浓度的测定. 16 实验八、血清γ球蛋白的分离纯化与鉴定. 18 第二章 分子生物学部分.25 实验一、质粒 DNA 的提取制备与检测. 25 实验二、PCR 技术. 28 实验三、DNA 的限制性酶切与电泳. 31 实验四、DNA 连接实验. 38 实验五、重组 DNA 转化与篮白斑筛选. 41 实验六、SDS-PAGE 测定蛋白质的相对分子量. 44

在学习了饲料常规成分分析的基础上,要求掌 握纤维素分析测定的 Van soest方案以及氨基 酸、常量元素与微量元素检测分析的基本原 理、方法和基本技能训练

实验七十三 酸碱标准溶液的配制和浓度比较 实验七十四 有机酸试剂纯度的测定 实验七十五 果蔬中总酸度的测定 实验七十六 甲醛值法测定果蔬汁饮料中氨基态氮 实验七十七 混合碱的测定 实验七十八 烟丝中尼古丁含量的测定 实验七十九自来水总硬度的测定 实验八十 混合阳离子含量的测定 （Ⅰ） Bi3+、Pb2+、Mg2+混合阳离子含量的测定 （Ⅱ） Fe3+、Al3+、Ca2+、Mg2+混合阳离子含量的测定 实验八十一 胃舒平药片中铝和镁的测定 实验八十二工业过氧化氢含量的测定 实验八十三 葡萄糖含量的测定 实验八十四 铜合金中铜含量的测定(碘量法) 实验八十五 废水中苯酚含量的测定 实验八十六白酒中总醛量的 实验八十七 氯化物中氯含量的测定（莫尔法） 实验八十八 沉淀重量法测定钡 （灼烧干燥恒重） 实验八十九 沉淀重量法测定钡（微波干燥恒重） 实验九十 三氯化钛-重铬酸钾法测定铁矿石中的铁 实验九十一 邻二氮菲分光光度法测定铁 实验九十二 分光光度法测定水中的氨态氮和亚硝酸态氮 综合篇 实验九十三蛋壳中Ca、Mg含量的测定 （络合滴定法，酸碱滴定法，氧化还原法） Ⅰ络合滴定法 Ⅱ 酸碱滴定法 Ⅲ 氧化还原法 实验九十四 茶叶中微量元素的鉴定与定量测定 实验九十五 三草酸合铁（III）络阴离子组成及电荷数的测定 实验九十六 三氯化六氨合钴的制备及其组成的确定 实验九十七 萃取分离-紫外分光光度法测定复方乙酰水杨酸药片中各组分的 含量 实验九十八 共沉淀分离测定纯铜中的铋 实验九十九水泥熟料中SiO2、Fe2O3、Al2O3、CaO和MgO含量的测定 实验一零零 离子交换法分离及分光光度法测定钴和镍 实验一零一 萃取光度法测定天然水中的挥发性酚

绪 论. 1 一 实验室规则. 1 二 实验室安全及防护知识. 2 三 实验记录与实验报告. 4 第一章 生物化学试验技术. 7 实验一 蛋白质的显色反应. 7 实验二 蛋白质的水解和氨基酸的纸层析法分离. 11 实验三 蛋白质的粗提及含量测定（考马斯亮蓝 G-250 法）. 14 实验四 还原糖和总糖含量的测定（3，5-二硝基水杨酸比色法）. 17 实验五 过氧化氢酶活性的测定——碘量法. 20 实验六 维生素 C 的定量测定 . 27 实验七 葡聚糖凝胶柱层析法基本训练. 29 第二章 组织学与胚胎学实验技术. 31 实验一 动物组织切片技术. 31 实验二 动物组织的鉴别和胚胎发育的比较. 44 第三章 生理学实验技术. 57 实验一 坐骨神经-腓肠肌标本的制备. 57 实验二 水产动物血液常规检测. 61 实验三 血液免疫学实验. 70 实验四 水产动物消化酶的测定. 73 实验五 水产动物耗氧率的测定. 76 实验六 水产动物应激状态生理学指标的测定. 80 实验七 植物呼吸作用和光合作用强度的测定. 89 第四章 遗传育种学实验技术. 95 实验一 鱼类肾细胞的染色体制作技术. 95 实验二 染色体核型分析方法. 98 实验三 鱼类肝脏酯酶同工酶的电泳分析. 102 实验四 鱼类 DNA 的简易提取法 . 105 实验五 DNA 浓度测定与纯度鉴定 . 107 实验六 聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR） . 109 实验七 DNA 的琼脂糖凝胶电泳 . 113

基础实验 实验一 酵母菌的分离和纯化. 1 实验二 乳酸菌的分离和鉴别. 4 实验三 发酵菌株的初筛 . 8 实验四 土壤中产醋酸菌种的分离筛选 . 11 实验五 枯草芽孢杆菌的紫外线诱变选育. 13 实验六 枯草芽孢杆菌生长曲线的测定 . 16 实验七 发酵培养基营养条件的优化 . 18 实验八 发酵罐的构造及空消. 20 实验九 淀粉的液化及糖化. 25 实验十 总糖和还原糖的测定──DNS 法 . 29 实验十一 固定化酵母酒精发酵. 32 综合实验 综合实验一 糯米甜酒的制备. 35 综合实验二 酸乳的制作 . 38 综合实验三 葡萄酒的酿造. 44 综合实验四 啤酒发酵 . 50 实验一 协定法糖化试验 . 51 实验二 啤酒酵母纯种分离. 54 实验三 啤酒酵母的计数 . 56 实验四 啤酒酵母的质量检查. 58 实验五 啤酒酵母的扩大培养. 61 实验六 麦芽汁的制备 . 62 实验七 糖度的测定 . 65 实验八 啤酒主发酵 . 69 实验九 总还原糖含量的测定（斐林试剂法）. 71 实验十 α –氨基氮含量的测定. 73 实验十一 酸度和 pH 的测定. 75 实验十二 比重的测定 . 77 实验十三 酒精度的测定及原麦汁浓度的计算. 80 实验十四 双乙酰含量的测定. 84 实验十五 色度的测定 . 86 实验十六 苦味质的测定 . 88 实验十七 二氧化碳含量的测定. 89 实验十八 后发酵. 90 实验十九 啤酒质量品评 . 91

第一部分 有机化学实验的一般知识 一、教学目的 二、实验室规则 三、有机化学实验室安全知识 四、有机化学实验室常用的仪器和装置 五、有机化学实验室常用设备和使用 六、实验预习、实验记录和实验报告的基本要求 第二部分 基础实验 实验一 简单玻璃工操作 实验二 重结晶 实验三 有机化合物的熔点和沸点的测定 实验四 常压蒸馏和分馏 实验五 萃取 实验六 薄层色谱 实验七 减压蒸馏 实验八 化合物性质试验一 实验九 化合物性质试验二 第三部分 综合实验 实验十 乙酰苯胺的制备 实验十一 乙酸乙酯的制备 实验十二 环己烯的制备 实验十三 1-溴丁烷的合成 实验十四 呋喃甲醇和呋喃甲酸的制备 实验十五 亚苄基乙酰苯的制备及其与溴的反应 实验十六 2-硝基-1，3-苯二酚的制备 实验十七 香豆素-3-羧酸的合成 实验十八 环己酮肟的贝克曼重排 实验十九 1-苯基-3-甲基-5-吡唑酮的制备 实验二十 甲基红的制备 第四部分 创新实验 实验二十一 苯甲酸的超声合成 实验二十二 肉桂酸的微波合成 实验二十三 安息香的辅酶法合成 实验二十四 葡萄糖酸-δ-内酯的合成 实验二十五 对氨基苯甲酸的合成 附 录 一、工具书及实验参考书 二、常用有机溶剂及纯化 三、常用试剂的配制 四、常用干燥剂的性能与应用范围 五、危险化学品的使用 六、实验报告格式

基础实验 实验一 酵母菌的分离和纯化. 1 实验二 乳酸菌的分离和鉴别. 4 实验三 发酵菌株的初筛 . 8 实验四 土壤中产醋酸菌种的分离筛选 . 11 实验五 枯草芽孢杆菌的紫外线诱变选育. 13 实验六 枯草芽孢杆菌生长曲线的测定 . 16 实验七 发酵培养基营养条件的优化 . 18 实验八 发酵罐的构造及空消. 20 实验九 淀粉的液化及糖化. 25 实验十 总糖和还原糖的测定──DNS 法 . 29 实验十一 固定化酵母酒精发酵. 32 综合实验 综合实验一 糯米甜酒的制备. 35 综合实验二 酸乳的制作 . 38 综合实验三 葡萄酒的酿造. 44 综合实验四 啤酒发酵 . 50 实验一 协定法糖化试验 . 51 实验二 啤酒酵母纯种分离. 54 实验三 啤酒酵母的计数 . 56 实验四 啤酒酵母的质量检查. 58 实验五 啤酒酵母的扩大培养. 61 实验六 麦芽汁的制备 . 62 实验七 糖度的测定 . 65 实验八 啤酒主发酵 . 69 实验九 总还原糖含量的测定（斐林试剂法）. 71 实验十 α –氨基氮含量的测定. 73 实验十一 酸度和 pH 的测定. 75 实验十二 比重的测定 . 77 实验十三 酒精度的测定及原麦汁浓度的计算. 80 实验十四 双乙酰含量的测定. 84 实验十五 色度的测定 . 86 实验十六 苦味质的测定 . 88 实验十七 二氧化碳含量的测定. 89 实验十八 后发酵. 90 实验十九 啤酒质量品评 . 91