三、饲料的纯养分分析 目的要求 ■在学习了饲料常规成分分析的基础上,要求掌 握纤维素分析测定的 Van soest方案以及氨基 酸、常量元素与微量元素检测分析的基本原 理、方法和基本技能训练 2020-8-28 Institute of Anim. Nutri
2020-8-28 Institute of Anim. Nutri. 1 三 、饲料的纯养分分析 目的要求 在学习了饲料常规成分分析的基础上，要求掌 握纤维素分析测定的Van Soest方案以及氨基 酸、常量元素与微量元素检测分析的基本原 理、方法和基本技能训练
(一)纤维素分析测定的 Van Soest方案 Van soest的NDF、ADF的测定方法 饲料样品 中性洗涤剂|pH0 中性洗涤可溶物(Ns)中性洗涤纤维(NDF) 酸性洗涤剂|NEso 酸性洗涤纤维(ADF)酸性洗涤可溶物(ADS) KMO处理,pH=3.0或72‰2S04处理 (半纤维素) 纤维素+矿物质木质素被氧化纤维素被溶解木质素+矿物质 2020-8-28 Institute of Anim. Nutri
2020-8-28 Institute of Anim. Nutri. 2 (一) 纤维素分析测定的Van Soest方案 Van Soest的NDF、ADF的测定方法 饲料样品 • 中性洗涤剂 pH=7.0 • 中性洗涤可溶物（NDS ） 中性洗涤纤维（NDF ） • 酸性洗涤剂 1N H 2SO 4 • • 酸性洗涤纤维（ADF) 酸性洗涤可溶物（ADS ） • KMnO 4处理，pH=3.0 或72%H 2SO 4处理 (半纤维素） • •纤维素+矿物质 木质素被氧化 纤维素被溶解 木质素+矿物质
(二)饲料氨基酸的分析测定 1.高效液相色谱法(HPLc)测定AA基本原理 >利用饲料样品中氨基酸在两相(固定相和流动相) 中的分配系数不同而进行分离,利用不同氨基酸 的出峰时间而定性,利用峰面积而定量 HPLC 933535 2020-8-28 Institute of Anim. Nutri
2020-8-28 Institute of Anim. Nutri. 3 （二）饲料氨基酸的分析测定 1. 高效液相色谱法（HPLC）测定AA基本原理 ¾利用饲料样品中氨基酸在两相（固定相和流动相） 中的分配系数不同而进行分离，利用不同氨基酸 的出峰时间而定性，利用峰面积而定量 HPLC
2.分析样品的准备与前处理 √酸水解 √碱水解——测定色氨酸 √过甲酸氧化水解—测定含硫氨基酸 酶水解 2020-8-28 Institute of Anim. Nutri
2020-8-28 Institute of Anim. Nutri. 4 2. 分析样品的准备与前处理 9酸水解 9碱水解——测定色氨酸 9过甲酸氧化水解——测定含硫氨基酸 9酶水解
3分析方法 柱前衍生、柱后衍生法 丹磺酰法(DNS) 异硫氰酸苯酯法(PITC) 邻苯二甲醛法(OPA) 9-芴基氯甲酸甲酸法(FMoC) 茚三酮 2020-8-28 Institute of Anim. Nutri
2020-8-28 Institute of Anim. Nutri. 5 3、分析方法 柱前衍生、柱后衍生法 丹磺酰法（DNS ） 异硫氰酸苯酯法（PITC ） 邻苯二甲醛法（OPA ） 9-芴基氯甲酸甲酸法（FMOC ） 茚三酮
高效液相色谱(HP1100)测定氨基酸 分林色谱图 WD1A WaelergtF3G8 TT(200187SDUXN106 还下 ga,NN 20 10 014 8 10 12 16 2020-8-28 Institute of Anim. Nutri
2020-8-28 Institute of Anim. Nutri. 6 高效液相色谱（HP1100）测定氨基酸 分析色谱图 2 4 6 8 10 12 14 16 mi n Norm. 0 10 20 30 40 VWD1 A, Wavelength=338 nm, TT (200187\SDJXN105. D) 1.133 - asp 1.771 - glu 5.161 - ser 6.289 - his 6.517 - gly 6.720 - thr 7.712 - arg 7.987 - ala 9.239 - tyr 11.060 - val 11.268 - met 12.467 - phe 12.666 - ile 13.294 - leu 13.672 - lys 17.222 - pro
高效液相色谱(HP1100)测定色氨酸 分析色谱图 WD1 A, Wavelength=338 nm, TT(2001322KYC20135. D) Norm 100 :三 80 60 40 0 4 6 8 10 12 14 16 18m 2020-8-28 Institute of Anim. Nutri 7
2020-8-28 Institute of Anim. Nutri. 7 高效液相色谱（HP1100）测定色氨酸 分析色谱图 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 m Norm. 0 20 40 60 80 100 VWD1 A, Wavelength=338 nm, TT (2001322\KYC20135.D) 11.899 - Trp
(三)饲料中常量元素分析 1、饲料中钙的测定(GB/T6436-2002) 测定原理 将试样中有机物破坏,钙变成溶于水的离 子,用草酸铵定量沉淀,用高猛酸钾法间接测定 2020-8-28 Institute of anim nutri 8
2020-8-28 Institute of Anim. Nutri. 8 （三）饲料中常量元素分析 1、饲料中钙的测定（GB/T 6436-2002 ） 测定原理 将试样中有机物破坏，钙变成溶于水的离 子，用草酸铵定量 沉淀，用高猛酸钾法间接测定
饲料中常量元素分析 2、饲料总磷量的测定(钼黄法)(GB/I6437-2002) 方法原理将试样的有机物破坏,使磷游离出 来,在酸性溶液中,用钒钼酸铵处理,生成黄色 的(NH4)3P0/NHO316MO3,在波长420nm下进 行比色测定 2020-8-28 Institute of Anim. Nutri
2020-8-28 Institute of Anim. Nutri. 9 饲料中常量元素分析 2、饲料总磷量的测定（钼黄法）（GB/T 6437-2002 ） 9 方法原理 将试样的有机物破坏，使磷游离出 来，在酸性溶液中，用钒钼酸铵处理，生成黄 色 的（N H 4 ） 3PO 4NH 4VO 3.16M O O 3，在波长4 2 0 n m下进 行比色测定
饲料中常量元素分析 3、饲料中水溶性氯化物的测定——饲料盐分 的估计(GB/T643992) >测定原理 在酸性条件下,加入过量硝酸银溶液使 样品中的氯化物形成氯化银沉淀,除去沉淀 后,用硫氰酸铵回滴过量的硝酸银,根据消耗 的硫氰酸铵的量,计算出氯化物的含量 2020-8-28 Institute of Anim. Nutri
2020-8-28 Institute of Anim. Nutri. 10 饲料中常量元素分析 3、饲料中水溶性氯化物的测定——饲料盐分 的估计 （GB/T 6439—92 ） ¾ 测定原理 在酸性条件下，加入过量硝酸银溶液使 样品中的氯化物形成氯化银沉淀，除去沉淀 后，用硫氰酸铵回滴过量的硝酸银，根据消耗 的硫氰酸铵的量，计算出氯化物的含量