饲料中有毒有害物质的检验 (一)概述 1、目的和意义 2、有毒有害物质的分类 (二)有毒有害物质的分析测定 ■1、无机有毒害物质:铅、砷、汞、镉、氟、铬 ■2、天然有毒害物质:棉酚、蛋白酶抑制剂、硫甙 ■3、霉菌及霉菌毒素:黄曲霉毒素、霉菌总数 4、饲料中违禁药物:喹乙醇、瘦肉精、黄胺类 2020-8-28 Institute of Anim. Nutri
2020-8-28 Institute of Anim. Nutri. 1 四、饲料中有毒有害物质的检验 （一）概述 1、目的和意义 2、有毒有害物质的分类 （二）有毒有害物质的分析测定 1、无机有毒害物质：铅、 砷、汞、镉、氟、铬 2、天然有毒害物质：棉酚、蛋白酶抑制剂、硫甙 3、霉菌及霉菌毒素：黄曲霉毒素、霉菌总数 4、饲料中违禁药物：喹乙醇、瘦肉精、黄胺类
1.饲料中总砷的测定(GB/T13079 1999) Determination of total arsenic in feeds 范围 适用于各种配合饲料,浓缩饲料,预混合饲料及饲料原料 原理 样品经酸消解或干灰化破坏有杋物,使砷呈离子态分布,经碘化钾、 氯化亚锡将高价砷还原为三价砷,然后被锌粒和酸产生的新生态氢还 原为砷化氢。在密闭装置中,被二乙氨基二硫代甲酸银( Ag-DDTC)的 三氯甲烷溶液吸收,形成黄色或棕红色银溶胶,其颜色深浅与砷含量 成正比,用分光光度计比色测定 AsH3+6Ag(DDTC) 6Ag+3H(DDTC)+AS(DDTC) 2020-8-28 Institute of Anim. Nutri
2020-8-28 Institute of Anim. Nutri. 2 1.饲料中总砷的测定（GB/T 13079- 1999） Determination of total arsenic in feeds ¾ 范围 适用于各种配合饲料，浓缩饲料，预混合饲料及饲料原料 ¾ 原理 样品经酸消解或干灰化破坏有机物，使砷呈离子态分布，经碘化钾、 氯化亚锡将高价砷还原为三价砷，然后被锌粒和酸产生的新生态氢还 原为砷化氢。在密闭装置中，被二乙氨基二硫代甲酸银(Ag-DDTC) 的 三氯甲烷溶液吸收，形成黄色或棕红色银溶胶，其颜色深浅与砷含量 成正比，用分光光度计比色测定. AsH 3+6Ag(DDTC) 6Ag+3H(DDTC)+ As(DDTC)
2游离棉酚含量的测定 原理在3-氨基-1-丙醇与正已烷的混合剂提 取游离棉酚。用苯胺使棉酚转化为苯胺棉 酚,在最大吸收波长440纳米处进行比色测 疋 ■仪器恒温水浴、振荡器、分光光度计 2020-8-28 Institute of Anim. Nutri
2020-8-28 Institute of Anim. Nutri. 3 2 游离棉酚含量的测定 原理 在3-氨基-1-丙醇与正已烷的混合剂提 取游离棉酚。用苯胺使棉酚转化为苯胺棉 酚，在最大吸收波长440纳米处进行比色测 定 仪器 恒温水浴、振荡器、分光光度计
试剂 ■异丙醇一正己烷混合溶液 ■溶剂A:吸取250毫升异丙醇一正己烷混合溶 剂置于500毫升容量瓶中,加入1毫升3—氨 基—1丙醇、4毫升冰乙酸、25毫升水,混匀 后用异丙醇一正己烷混合试剂稀释至刻度 2020-8-28 Institute of Anim. Nutri
2020-8-28 Institute of Anim. Nutri. 4 试剂 异丙醇 —正己烷混合溶液 溶剂 A：吸取250毫升异丙醇 —正己烷混合溶 剂置于500毫升容量瓶中，加入 1毫升 3 — 氨 基 — 1丙醇、 4毫升冰乙酸、25毫升水，混匀 后用异丙醇 —正己烷混合试剂稀释至刻度
操作方法 (1)称样、溶解、振荡、过滤 2)吸取等量两份滤液5毫升,用溶剂A稀释 至10毫升 (3)用异丙醇和溶剂A作参比溶液 (4)加苯胺,沸水浴上加热30分钟显色 ■(5)冷却、定容、摇匀、并静置1小时 (6)分光光度计测吸光度 2020-8-28 Institute of Anim. Nutri
2020-8-28 Institute of Anim. Nutri. 5 操作方法 （ 1）称样、溶解、振荡、过滤 （ 2）吸取等量两份滤液 5毫升，用溶剂 A稀释 至10毫升 （ 3）用异丙醇和溶剂 A作参比溶液 （ 4）加苯胺，沸水浴上加热30分钟显色 （ 5）冷却、 定容、摇匀、并静置 1小时 （ 6）分光光度计测吸光度
结果计算 游离棉酚(mg/kg) A×50×25×10 A×50×25×1000 K×mx×L×1000K×m×V×L A—校正吸光度 K——质量吸收系数,游离棉酚为62.5厘米-1克-11 m——试样质量,克 V—测定用滤液的体积,毫升 ■L—吸收池长度,厘米 2020-8-28 Institute of Anim. Nutri
2020-8-28 Institute of Anim. Nutri. 6 结果计算 A——校正吸光度 K——质量吸收系数，游离棉酚为62.5厘米-1 克-11 m——试样质量，克 V——测定用滤液的体积，毫升 L——吸收池长度，厘米 K m V L A K m V L A mg kg × × × × × × = × × × × × × × = 50 25 1000 1000 50 25 10 ( / ) 6 游离棉酚
■50—提取样品的提取液体积,毫升 25比色测定时的体积,毫升 ■106—由克/克换算为毫克/千克的系数 ■1000—由L换算为毫升的系数 a或者游离棉酚(%) A×1250 E m cm nE=625;其余代号同上 2020-8-28 Institute of Anim. Nutri 7
2020-8-28 Institute of Anim. Nutri. 7 50——提取样品的提取液体积，毫升 25——比色测定时的体积，毫升 106 —由克 /克换算为毫克 /千克的系数 1000—— 由 L换算为毫升的系数 或者 E ＝625； 其余代号同上 E m V A cm × × × = 1 % 1 1250 游离棉酚 (%)
质量评价 分析者对同一试样同时或快速连续地进行两次 测定,所得结果之间的差值: ■在液离棉酚含量750毫克/千克时,不得超过平均值 的10% 2020-8-28 Institute of Anim. Nutri 8
2020-8-28 Institute of Anim. Nutri. 8 质量评价 同一分析者对同一试样同时或快速连续地进行两次 测定，所得结果之间的差值： 在液离棉酚含量750毫克 /千克时，不得超过平均值 的10%
3黄曲霉毒素B1的高效液相色谱测定法 原理样品经提取、浓缩后,注入高效液相色谱仪 中,以三氯甲烷-丙酮溶液为流动相,用荧光检测 器测定标准溶液保留时间和峰面积,由标准曲线 法可求得其含量 ■高效液相色谱仪(带荧光检测器) n试剂 甲醇 n苯一乙腈 ■黄曲霉毒素B1标准溶液 2020-8-28 Institute of Anim. Nutri
2020-8-28 Institute of Anim. Nutri. 9 3 黄曲霉毒素B1的高效液相色谱测定法 原理 样品经提取、浓缩后，注入高效液相色谱仪 中，以三氯甲烷 -丙酮溶液为流动相，用荧光检测 器测定标准溶液保留时间和峰面积，由标准曲线 法可求得其含量 高效液相色谱仪（带荧光检测器） 试剂 甲醇 苯 —乙腈 黄曲霉毒素B1标准溶液
操作步骤 ■样品提取 ■标准曲线的绘制 样品测定 2020-8-28 Institute of Anim. Nutri
2020-8-28 Institute of Anim. Nutri. 10 操作步骤 样品提取 标准曲线的绘制 样品测定