第六章农药分析 第一节概述 农药是用于保护农作物等免受病虫害,以及促进植物生长、除草、灭鼠 杀菌的各种药剂之总称。自20世纪40年代以来,随着科技的进步和生产的不断 发展,人工合成的农药品种日益增多。目前,全世界农药有1200余种,常用的 约有250种。这些农药的应用,在农业、畜牧业及公共卫生等各方面都起到了积 极的作用。但随着农药的长期和大量使用,环境和饲料的农药污染日益严重,并 通过生物富集和食物链,可造成在动物体内蓄积而引起在畜禽产品中残留。农药 污染已成当前主要公害之 农药污染饲料的途径1、农药在作物中的残留2、粮库或饲料库内应用 农药防虫,使粮食及饲料残留农药。3、饲料在运输过程中受污染。 4、事故性污染5、生物富集与食物链 、兽医临床上农药中毒的原因1、用量过大。2、误用拌过或浸过农药的 种子作饲料。3、家畜采食喷洒过农药的农作物、蔬菜或牧草等。4、农药保存不 当或使用不按操作规程,污染了饲料或水源。5、报复投毒等等 三、常见农药中毒的机理及症状农药的种类繁多,大部分属于化学性农药, 常见的化学性农药按化学成分可分为:有机氯农药、有机磷农药、有机汞农药、 有机砷农药、有机氟农药和有机硫农药等。这些农药中毒的机理及症状如下: ()有机氯农药( Organochloric pesticides) 1、特点有机氯农药具有杀菌范围广、高效、急性毒性小,易于大量生产 价廉等优点,但由于性质稳定,残留时间长,累积浓度高,很容易污染环境、农 作物和畜产品,易引起人畜的慢性中毒。因此,目前国内外都已采取措施,停止 生产或控制应用一些残毒性较髙的有机氯农药。我国已于1983年停止生产、1984 年停止使用有机氯农药 2、品种常用的有机氯农药有DDT、六六六、艾氏剂、氯丹、毒杀芬等
1 第六章 农药分析 第一节 概述 农药是用于保护农作物等免受病虫害，以及促进植物生长、除草、灭鼠、 杀菌的各种药剂之总称。自 20 世纪 40 年代以来，随着科技的进步和生产的不断 发展，人工合成的农药品种日益增多。目前，全世界农药有 1200 余种，常用的 约有 250 种。这些农药的应用，在农业、畜牧业及公共卫生等各方面都起到了积 极的作用。但随着农药的长期和大量使用，环境和饲料的农药污染日益严重，并 通过生物富集和食物链，可造成在动物体内蓄积而引起在畜禽产品中残留。农药 污染已成当前主要公害之一。 一、农药污染饲料的途径 1、农药在作物中的残留 2、粮库或饲料库内应用 农药防虫，使粮食及饲料残留农药。3、饲料在运输过程中受污染。 4、事故性污染 5、生物富集与食物链 二、兽医临床上农药中毒的原因 1、用量过大。2、误用拌过或浸过农药的 种子作饲料。3、家畜采食喷洒过农药的农作物、蔬菜或牧草等。4、农药保存不 当或使用不按操作规程，污染了饲料或水源。5、报复投毒等等。 三、常见农药中毒的机理及症状农药的种类繁多，大部分属于化学性农药， 常见的化学性农药按化学成分可分为：有机氯农药、有机磷农药、有机汞农药、 有机砷农药、有机氟农药和有机硫农药等。这些农药中毒的机理及症状如下： ㈠ 有机氯农药（Organochloric pesticides） 1、特点 有机氯农药具有杀菌范围广、高效、急性毒性小，易于大量生产， 价廉等优点，但由于性质稳定，残留时间长，累积浓度高，很容易污染环境、农 作物和畜产品，易引起人畜的慢性中毒。因此，目前国内外都已采取措施，停止 生产或控制应用一些残毒性较高的有机氯农药。我国已于 1983 年停止生产、1984 年停止使用有机氯农药。 2、品种 常用的有机氯农药有 DDT、六六六、艾氏剂、氯丹、毒杀芬等
这类农药曾经是应用最广、用量最大的农药,因此有机氯农药中毒是过去常见的 畜禽中毒病。 3、中毒机理根据对DDT和六六六的研究结果,认为有机氯农药能抑制 ATP酶和单胺氧化酶的活性以及乙酰胆碱酯酶的合成 4、中毒症状有机氯农药中毒的临床症状主要是神经系统。急性中毒表现 为听觉和感觉过敏、反射活动增强、兴奋性增高、肌肉震颤,牛羊出现流涎、腹 泻,猪出现呕吐。蓄积性中毒症状不明显。 白有机磷农药( Organophosphatic pesticides) 1、特点有机磷农药不仅具有高效、广谱的杀虫作用,而且在生物体内残 留时间短,残留量较少,因此是我国目前使用最广泛的杀虫剂,尤其在我国停止 使用有机氯农药以后,已上升为最主要的一类农药,因而畜禽中毒的机会较多。 2、品种有机磷农药是始创于20世纪30年代,在二次大战后广泛地用于 农业上,常用的有机磷农药有对硫磷(1605)、乐果、敌百虫、敌敌畏、马拉硫 磷(4049)、甲胺磷和稻瘟净等。 3、中毒机理有机磷农药的中毒机理是它与体内的胆碱酯酶(CHE)结合, 形成不易水解的磷酰化胆碱酯酶,使胆碱酯酶活性受抑制,分解乙酰胆碱的能力 降低,致使体内乙酰胆碱大量蓄积,从而出现一系列与胆碱能神经机能亢进的临 床症状 4、中毒症状中毒畜禽表现为流涎、呕吐、腹泻、瞳孔缩小、呼吸困难、 肌肉震颤、多汗等。 5、解毒方法解磷定、阿托品 白有机汞农药 1、特点有机汞农药主要用于防治农作物病毒危害。这类农药由于在外界 环境中残留时间长,且易在体内蓄积,毒性大,因此,70年代后,世界各国都 已禁止或限制使用。我国自1972年起已禁止生产、进口和使用。但是由于高效
2 这类农药曾经是应用最广、用量最大的农药，因此有机氯农药中毒是过去常见的 畜禽中毒病。 3、中毒机理 根据对 DDT 和六六六的研究结果，认为有机氯农药能抑制 ATP 酶和单胺氧化酶的活性以及乙酰胆碱酯酶的合成。 4、中毒症状 有机氯农药中毒的临床症状主要是神经系统。急性中毒表现 为听觉和感觉过敏、反射活动增强、兴奋性增高、肌肉震颤，牛羊出现流涎、腹 泻，猪出现呕吐。蓄积性中毒症状不明显。 ㈡ 有机磷农药（Organophosphatic pesticides） 1、特点 有机磷农药不仅具有高效、广谱的杀虫作用，而且在生物体内残 留时间短，残留量较少，因此是我国目前使用最广泛的杀虫剂，尤其在我国停止 使用有机氯农药以后，已上升为最主要的一类农药，因而畜禽中毒的机会较多。 2、品种 有机磷农药是始创于 20 世纪 30 年代，在二次大战后广泛地用于 农业上，常用的有机磷农药有对硫磷（1605）、乐果、敌百虫、敌敌畏、马拉硫 磷（4049）、甲胺磷和稻瘟净等。 3、中毒机理 有机磷农药的中毒机理是它与体内的胆碱酯酶（CHE）结合， 形成不易水解的磷酰化胆碱酯酶，使胆碱酯酶活性受抑制，分解乙酰胆碱的能力 降低，致使体内乙酰胆碱大量蓄积，从而出现一系列与胆碱能神经机能亢进的临 床症状。 4、中毒症状 中毒畜禽表现为流涎、呕吐、腹泻、瞳孔缩小、呼吸困难、 肌肉震颤、多汗等。 5、解毒方法 解磷定、阿托品 ㈢ 有机汞农药 1、特点 有机汞农药主要用于防治农作物病毒危害。这类农药由于在外界 环境中残留时间长，且易在体内蓄积，毒性大，因此，70 年代后，世界各国都 已禁止或限制使用。我国自 1972 年起已禁止生产、进口和使用。但是由于高效
的有机汞杀菌剂的禁用,给一些由种子传染的病毒性疾病(如麦类黑穗病等)的 防治造成很大的困难。因此,我国政府有关部门于1979年根据生产的实际情况, 对有机汞农药的使用问题重新加以考虑并作了新的规定,不再全面禁用,可限制 使用。 2、品种主要品种有西力生(氯化乙基汞)、赛力散(醋酸苯汞)、谷仁乐 生(磷酸二乙基汞)、富民隆(磺胺苯汞)等, 3、中毒机理有机汞农药属于高毒类农药①通过对局部的强烈刺激,造 成胃炎、肠炎;②易与蛋白质或其它活性物质中的一SH结合,使各种含SH 的酶活性抑制,蛋白质凝固,组织坏死,而呈现毒性作用。 4、中毒症状中毒家畜以消化道损害,肾损害及神经症状为特征,表现为 口唇糜烂、腹泻、蛋白尿、血尿、共济失调、感觉异常等。剖解可见消化道糜烂、 溃疡,肾溃疡 四有机硫农药 1、特点有机硫农药是近年来发展起来的一种新型杀菌剂,具有高效、低 毒之特点,正在替代汞制剂等在农业生产上起着重要作用。有机硫农药对人畜毒 性低,但家畜偶然大量偷食使用过有机硫农药不久的作物,也可引起中毒。 2、品种常用的有机硫农药有代森类(如代森锌、代森铵)和福美类(如 福美锌、福美铁等)。 3、中毒机理这类农药主要是通过干扰细胞的新陈代谢过程而产生毒性 4、中毒症状中毒家畜先出现呕吐、腹泻等消化系统症状,继而出现兴奋 不安,共济失调等神经症状,最后呼吸和循环衰竭而死亡 有机砷农药 1、特点这类农药为一类主要用于防治水稻纹枯病的杀菌剂,属中等毒或 低毒类。 2、品种常用的品种有稻脚青、退菌特、甲基硫砷、稻宁等
3 的有机汞杀菌剂的禁用，给一些由种子传染的病毒性疾病（如麦类黑穗病等）的 防治造成很大的困难。因此，我国政府有关部门于 1979 年根据生产的实际情况， 对有机汞农药的使用问题重新加以考虑并作了新的规定，不再全面禁用，可限制 使用。 2、品种 主要品种有西力生（氯化乙基汞）、赛力散（醋酸苯汞）、谷仁乐 生（磷酸二乙基汞）、富民隆（磺胺苯汞）等， 3、中毒机理 有机汞农药属于高毒类农药① 通过对局部的强烈刺激，造 成胃炎、肠炎；② 易与蛋白质或其它活性物质中的—SH 结合，使各种含 SH 的酶活性抑制，蛋白质凝固，组织坏死，而呈现毒性作用。 4、中毒症状 中毒家畜以消化道损害，肾损害及神经症状为特征，表现为 口唇糜烂、腹泻、蛋白尿、血尿、共济失调、感觉异常等。剖解可见消化道糜烂、 溃疡，肾溃疡。 ㈣ 有机硫农药 1、特点 有机硫农药是近年来发展起来的一种新型杀菌剂，具有高效、低 毒之特点，正在替代汞制剂等在农业生产上起着重要作用。有机硫农药对人畜毒 性低，但家畜偶然大量偷食使用过有机硫农药不久的作物，也可引起中毒。 2、品种 常用的有机硫农药有代森类（如代森锌、代森铵）和福美类（如 福美锌、福美铁等）。 3、中毒机理 这类农药主要是通过干扰细胞的新陈代谢过程而产生毒性。 4、中毒症状 中毒家畜先出现呕吐、腹泻等消化系统症状，继而出现兴奋 不安，共济失调等神经症状，最后呼吸和循环衰竭而死亡。 ㈤ 有机砷农药 1、特点 这类农药为一类主要用于防治水稻纹枯病的杀菌剂，属中等毒或 低毒类。 2、品种 常用的品种有稻脚青、退菌特、甲基硫砷、稻宁等
3、中毒机理有机砷化合物被动物吸收后,转化为无机的三价砷及衍生物, 与体内酶蛋白分子上的一SH结合,特别是与含双SH的酶(如丙酮酸氧化酶) 形成稳定的复合物,使酶失去活性,从而阻碍细胞的正常呼吸和代谢,导致细胞 死亡,故主要为慢性中毒或亚急性中毒。 4、中毒症状有机砷农药主要表现为消化系统和神经系统症状 6有机氟农药 1、品种有机氟农药的主要品种有氟乙酰胺、氟乙酸钠 2、中毒机理有机氟农药主要是通过阻断三羧酸循环而产生毒作用。 3、中毒症状中毒的食草家畜主要表现为心血管系统症状,如心跳过快、 节律不齐;肉食动物主要表现为神经症状,如兴奋不安,共济失调等;杂食动物 则心血管系统症状和神经症状均有。 以上叙述了常见农药中毒的机理和症状。一般来说,兽医临床上的农药中 毒多数是急性、亚急性中毒,但在长期少量摄入某些农药特别是有机氯农药和有 机汞农药时,动物也可表现为慢性中毒。另外,有些农药在体内蓄积,虽然没有 使动物在临床上表现中毒症状,但动物产品如肉、蛋、奶却带有一定程度的毒性。 有人发现,奶牛在采食含DDI7~8ppm的干草后,其乳汁中DDT含量可高达3ppm 之多,如果用这种严重带毒的乳汁或乳制品喂幼畜或食用,将有引起中毒的危险, 这是一个应予严重关注的问题
4 3、中毒机理 有机砷化合物被动物吸收后，转化为无机的三价砷及衍生物， 与体内酶蛋白分子上的—SH结合，特别是与含双 SH 的酶（如丙酮酸氧化酶）， 形成稳定的复合物，使酶失去活性，从而阻碍细胞的正常呼吸和代谢，导致细胞 死亡，故主要为慢性中毒或亚急性中毒。 4、中毒症状 有机砷农药主要表现为消化系统和神经系统症状。 ㈥ 有机氟农药 1、品种 有机氟农药的主要品种有氟乙酰胺、氟乙酸钠。 2、中毒机理 有机氟农药主要是通过阻断三羧酸循环而产生毒作用。 3、中毒症状 中毒的食草家畜主要表现为心血管系统症状，如心跳过快、 节律不齐；肉食动物主要表现为神经症状，如兴奋不安，共济失调等；杂食动物 则心血管系统症状和神经症状均有。 以上叙述了常见农药中毒的机理和症状。一般来说，兽医临床上的农药中 毒多数是急性、亚急性中毒，但在长期少量摄入某些农药特别是有机氯农药和有 机汞农药时，动物也可表现为慢性中毒。另外，有些农药在体内蓄积，虽然没有 使动物在临床上表现中毒症状，但动物产品如肉、蛋、奶却带有一定程度的毒性。 有人发现，奶牛在采食含 DDT7~8ppm 的干草后，其乳汁中 DDT含量可高达 3ppm 之多，如果用这种严重带毒的乳汁或乳制品喂幼畜或食用，将有引起中毒的危险， 这是一个应予严重关注的问题
第二节有机氯农药的分析 概述 ()种类 有机氯农在83年以前一直是我国主要的农药品种,占总用药量的50~70%。 最常用的有机氯农药有六六六、DDT、林丹(高丙体六六六)、氯丹、狄氏剂、 毒杀芬等。 白理化性质 多数有机氯农药对光、热、酸稳定,如DDT115-200℃加热15h不发生分 解,遇碱易失效。有机氯农药属脂溶性化合物,不溶于水,而易溶于多种有机溶 剂,如苯、二甲苯、氯仿、正已烷、石油醚等 残留 有机氯农药化学性质稳定,不易分解,在环境中的残留期长,例如六六六 喷施后一年,土壤残留量为65%,其残留期可达十年以上。DDT喷施后一年, 还有88%残留在土壤中,残留期长达15年之久。因而,此类农药可在空气、土 壤、水和动植物体内长期蓄积,并通过食物链进入畜禽体内蓄积,易引起畜禽慢 性中毒。我国己于1983年停止生产、1984年停止使用有机氯农药 四毒性作用 有机氯农药在体内可蓄积于脂肪组织、神经组织和肝、肾等器官中,动物 长期少量摄入有机氯农药可产生慢性中毒。轻度中毒畜禽表现为生产性能下降, 消瘦,精神沉郁,严重者表现为肌肉震颤、共济失调、衰竭等。无论是急性中毒, 还是慢性中毒,剖检均无特征性病变。 几种有机氯农药的口服LD50见表6-1。 表6-1几种有机氯农药的口服LD50 名称 动物 LDso(mg/Kg)
5 第二节 有机氯农药的分析 一、概述 ㈠ 种类 有机氯农在 83 年以前一直是我国主要的农药品种，占总用药量的 50~70%。 最常用的有机氯农药有六六六、DDT、林丹（高丙体六六六）、氯丹、狄氏剂、 毒杀芬等。 ㈡ 理化性质 多数有机氯农药对光、热、酸稳定，如 DDT 115~200℃加热 15h 不发生分 解，遇碱易失效。有机氯农药属脂溶性化合物，不溶于水，而易溶于多种有机溶 剂，如苯、二甲苯、氯仿、正已烷、石油醚等。 ㈢ 残留 有机氯农药化学性质稳定，不易分解，在环境中的残留期长，例如六六六 喷施后一年，土壤残留量为 65%，其残留期可达十年以上。DDT 喷施后一年， 还有 88%残留在土壤中，残留期长达 15 年之久。因而，此类农药可在空气、土 壤、水和动植物体内长期蓄积，并通过食物链进入畜禽体内蓄积，易引起畜禽慢 性中毒。我国已于 1983 年停止生产、1984 年停止使用有机氯农药。 ㈣ 毒性作用 有机氯农药在体内可蓄积于脂肪组织、神经组织和肝、肾等器官中，动物 长期少量摄入有机氯农药可产生慢性中毒。轻度中毒畜禽表现为生产性能下降， 消瘦，精神沉郁，严重者表现为肌肉震颤、共济失调、衰竭等。无论是急性中毒， 还是慢性中毒，剖检均无特征性病变。 几种有机氯农药的口服 LD50 见表 6-1。 表 6-1 几种有机氯农药的口服 LD50 名称 动物 LD50(mg/Kg)
DDT 多数动物 200~500 小白鼠 六六六 家兔 60~200 小白鼠 42.1 艾氏剂 家兔 25.1 小白鼠 41.1 狄氏剂 家兔 22.3 有机氯农药多为中等毒性农药,在现在已停止生产和使用的情况下,急性 和亚急性中毒几乎不再发生。但由于目前我国的土壤、水体等普遍受到有机氯农 药的污染,故此类农药慢性中毒仍有可能发生。 饲料中有机氯农药的卫生标准 我国国家饲料卫生标准中饲料原料和饲料中六六六、DDT的允许量标准见 表6-2、3 表6-2我国国家饲料卫生标准饲料原料和饲料品种中六六六允许量 饲料原料或饲料品种 允许量(mg/kg) 米糠、小麦麸 大豆饼、粕 ≤0.05 鱼 粉 ≤0.05 肉仔鸡、生长鸡配合饲料 ≤0.03 产蛋鸡配合饲料 ≤0.03 生长肥育猪配、混合饲料 ≤0.04 表6-3我国国家饲料卫生标准猪、鸡饲料中DDT允许量标准 饲料原料或饲料品种 充许量(mg/kg) 米糠、小麦麸 大豆、饼、粕、鱼粉 ≤0.02 鸡配合、猪混、配合饲料 ≤0.02 我国“食品中六六六,DDT残留量”国家标准(GB2763-81)见表6-4 表64我国粮食、蔬菜等食品中六六六、DDT允许量标准 6
6 DDT 多数动物 200～500 六六六 小白鼠 86 家兔 60～200 艾氏剂 小白鼠 42.1 家兔 25.1 狄氏剂 小白鼠 41.1 家兔 22.3 有机氯农药多为中等毒性农药，在现在已停止生产和使用的情况下，急性 和亚急性中毒几乎不再发生。但由于目前我国的土壤、水体等普遍受到有机氯农 药的污染，故此类农药慢性中毒仍有可能发生。 ㈤ 饲料中有机氯农药的卫生标准 我国国家饲料卫生标准中饲料原料和饲料中六六六、DDT 的允许量标准见 表 6-2、3。 表 6-2 我国国家饲料卫生标准饲料原料和饲料品种中六六六允许量 饲料原料或饲料品种 允许量（mg/kg） 米糠、小麦麸 ≤0.05 大豆饼、粕 ≤0.05 鱼 粉 ≤0.05 肉仔鸡、生长鸡配合饲料 ≤0.03 产蛋鸡配合饲料 ≤0.03 生长肥育猪配、混合饲料 ≤0.04 表 6-3 我国国家饲料卫生标准猪、鸡饲料中 DDT 允许量标准 饲料原料或饲料品种 充许量（mg/kg） 米糠、小麦麸 ≤0.02 大豆、饼、粕、鱼粉 ≤0.02 鸡配合、猪混、配合饲料 ≤0.02 我国“食品中六六六，DDT 残留量”国家标准（GB2763—81）见表 6—4。 表 6-4 我国粮食、蔬菜等食品中六六六、DDT 允许量标准
食品品种 允许量 六六六(mg/kg) DdT(mg/kg) 成品粮 ≤0.3 ≤0.2 蔬菜、水果 ≤0.2 鱼 ≤2 ≤1 二、提取、纯化和浓缩 1、提取 最常用的提取方法为振荡提取法和组织提取法。 常用的提取有机溶剂有正已烷、石油醚、乙腈、丙酮、苯或这些有机溶剂的 混合液。具体应用溶剂通常视样品的含水量不同进行选择。 (1)对含水量低的谷物、饲料,可用正已烷或石油醚直接提取 (2)对含水量高的蔬菜、牧草等,应先以亲水性溶剂丙酮或乙腈进行提取, 然后加硫酸钠溶液稀释,再以正已烷或石油醚萃取有机氯农药,以便纯化和浓缩。 加硫酸钠溶液的目的是增大丙酮或乙腈液的极性,降低农药在它们中的溶 解度,使其更完全地转移到正已烷或石油醚中,而水溶性杂质则留在丙酮层或乙 腈层弃去。 2、纯化和浓缩 提取液中常含有脂肪、色素、蜡质等杂质,干扰测定,故必须进行纯化。 由于多数有机氯农药对酸都极为稳定,所以可用磺化法纯化。 其操作方法是于100ml提取液中加10ml(即提取液的1/10的浓硫酸,振 摇lmin后,静置分层,弃去下层水溶液,上层溶液由分液漏斗上口倒置另一250ml 分液漏斗中,用少许石油醚洗原分液漏斗后,并入250ml分液漏斗中,加入100m 12%硫酸溶液振摇后,静置分层,弃去下层水溶液,用滤纸吸干分液漏斗颈外的 水。加硫酸钠溶液的目的是洗去沾附的硫酸,否则在样液浓缩后出现蓝色或黑色, 从而影响结果。 将石油醚经盛有约15g无水硫酸钠的漏斗过滤,并以少许石油醚洗涤盛有 7
7 食 品 品 种 允许量 六六六（mg/kg） DDT（mg/kg） 成 品 粮 ≤0.3 ≤0.2 蔬菜、水果 ≤0. 2 ≤0.1 鱼 ≤2 ≤1 二、提取、纯化和浓缩 1、 提取 最常用的提取方法为振荡提取法和组织提取法。 常用的提取有机溶剂有正已烷、石油醚、乙腈、丙酮、苯或这些有机溶剂的 混合液。具体应用溶剂通常视样品的含水量不同进行选择。 ⑴ 对含水量低的谷物、饲料，可用正已烷或石油醚直接提取。 ⑵ 对含水量高的蔬菜、牧草等，应先以亲水性溶剂丙酮或乙腈进行提取， 然后加硫酸钠溶液稀释，再以正已烷或石油醚萃取有机氯农药，以便纯化和浓缩。 加硫酸钠溶液的目的是增大丙酮或乙腈液的极性，降低农药在它们中的溶 解度，使其更完全地转移到正已烷或石油醚中，而水溶性杂质则留在丙酮层或乙 腈层弃去。 2、纯化和浓缩 提取液中常含有脂肪、色素、蜡质等杂质，干扰测定，故必须进行纯化。 由于多数有机氯农药对酸都极为稳定，所以可用磺化法纯化。 其操作方法是于 100ml 提取液中加 10ml（即提取液的 1/10）的浓硫酸，振 摇 1min 后，静置分层，弃去下层水溶液，上层溶液由分液漏斗上口倒置另一 250ml 分液漏斗中，用少许石油醚洗原分液漏斗后，并入 250ml 分液漏斗中，加入 100m l 2%硫酸溶液振摇后，静置分层，弃去下层水溶液，用滤纸吸干分液漏斗颈外的 水。加硫酸钠溶液的目的是洗去沾附的硫酸，否则在样液浓缩后出现蓝色或黑色， 从而影响结果。 将石油醚经盛有约 15g 无水硫酸钠的漏斗过滤，并以少许石油醚洗涤盛有
无水硫酸钠的漏斗数次,洗液并入滤液中,然后用减压浓缩至lml,供C用。 此外,提取液也可用柱层析或萃取法纯化。如果一种纯化方法不能达到纯 化要求时,可系数通过第二或第三种方法纯化 三、测定方法 有机氯农药定量分析的常用方法有GC和TLC法。前者已成为常规的检验 方法,后者操作简便,特别适合于一般实验室分析 1、吸附剂有机氯农药薄层定量的吸附剂有硅胶G和氧化铝G,其中氧化 铝薄层色谱的灵敏度较硅胶略高。 制备薄层时加入少量硝酸银溶液,可提高测量的灵敏度,更有效地对复杂 混合物进行分离。但硝酸银溶液应先与水混匀,再在乳钵中与氧化铝G一起研磨 若氧化铝G先加硝酸银溶液,往往造成局部硝酸银含量偏髙,使底板变黑而降低 灵敏度。 薄层板制备称取氧化铝G45g加1ml1%硝酸银和6ml水,研磨成糊状,立 即涂布于3块薄层板(5×20cm)上,厚度为0.25mm,于100℃活化0.5h,置干 燥器中,避光保存。 2、展开剂正已烷一丙酮(99:1)、石油醚一丙酮(99:1) 3、显色剂 有机氯农药的显色剂有两类: (1)硝酸银显色液是有机氯农药最常用的显色剂,其灵敏度较高,最低检 出量可达到0.01吧g,并且显色斑点稳定。 硝酸银显色液配制方法:称取硝酸银0.05g溶于数滴水中,加苯氧乙醇1Oml, 用丙酮稀释至100ml,加30%过氧化氢溶液10μl,混合后贮于棕色瓶中,放冰箱 内保存。 硝酸银的作用是与有机氯农药中的氯在紫外光照射下生成氯化银,并进一步 分解成氧化银的少量单质银的混合物,而显黑色斑点。 254nm mgC光解14 gc12Ag1gC+ gtAgCIO. Ag1AB0
8 无水硫酸钠的漏斗数次，洗液并入滤液中，然后用减压浓缩至 1ml，供 TLC 用。 此外，提取液也可用柱层析或萃取法纯化。如果一种纯化方法不能达到纯 化要求时，可系数通过第二或第三种方法纯化。 三、测定方法 有机氯农药定量分析的常用方法有 GC 和 TLC 法。前者已成为常规的检验 方法，后者操作简便，特别适合于一般实验室分析。 1、吸附剂 有机氯农药薄层定量的吸附剂有硅胶 G 和氧化铝 G，其中氧化 铝薄层色谱的灵敏度较硅胶略高。 制备薄层时加入少量硝酸银溶液，可提高测量的灵敏度，更有效地对复杂 混合物进行分离。但硝酸银溶液应先与水混匀，再在乳钵中与氧化铝 G 一起研磨。 若氧化铝 G 先加硝酸银溶液，往往造成局部硝酸银含量偏高，使底板变黑而降低 灵敏度。 薄层板制备 称取氧化铝 G45g 加 1ml1%硝酸银和 6ml 水，研磨成糊状，立 即涂布于 3 块薄层板（5×20cm）上，厚度为 0.25mm，于 100℃活化 0.5h，置干 燥器中，避光保存。 2、展开剂 正已烷—丙酮（99﹕1）、石油醚—丙酮（99﹕1） 3、显色剂 有机氯农药的显色剂有两类： ⑴ 硝酸银显色液 是有机氯农药最常用的显色剂，其灵敏度较高，最低检 出量可达到 0.01g，并且显色斑点稳定。 硝酸银显色液配制方法：称取硝酸银 0.05g 溶于数滴水中，加苯氧乙醇 10ml， 用丙酮稀释至 100ml，加 30%过氧化氢溶液 10l，混合后贮于棕色瓶中，放冰箱 内保存。 硝酸银的作用是与有机氯农药中的氯在紫外光照射下生成氯化银，并进一步 分解成氧化银的少量单质银的混合物，而显黑色斑点。 mAgCl 254nm 光解[O] AgCl2·AgCl·nAgCl2+Ag+AgclO·AgCl·AgO
苯氧乙醇可促使斑点迅速显色,提高灵敏度。加入过氧化氢可避免因硝酸银 还原成银而增加薄层板背景的颜色,但加入量过多又会使斑点模糊,故应掌握好 用量 (2)苯胺类显色剂如联苯胺、联邻甲苯胺、二苯胺等。这类显色剂灵敏度 较低,显色不稳定,且毒性较大。其优点:可使不同的有机氯农药显示出不同的 颜色,有助于定性鉴定。 联邻甲苯胺对集中有机氯农药的显色结果见表6-5。 表6-5联邻甲苯胺对集中有机氯农药的显色结果 不同农药量时斑点的颜色 农药名称最低检出量(μg) 002~0.2g02~2g25~10μg DDE 0.3 浅米黄 深米黄 DDT 0.02 黄 绿黄 叶黄 DDD 0.25 极弱棕 明棕 林丹 浅蓝 鲜蓝 蓝 艾氏剂 0.25 极弱黄绿 浅黄绿 六六六 0.02 极浅蓝 鲜蓝 深蓝 四、显色反应(快速定性分析 当饲料中有机氯农药含量较高,且只需作定性检验时,可用显色反应。最 常用的显色反应是荧光黄试纸快速法。 1、原理:有机氯农药被新生态的氢还原成氯化氢,又被氧化生成氯气,氯 气与溴化钠作用生成溴,溴与荧光黄反应生成四溴荧光黄,呈桃红色。 SO4+Zn Zn SO4+2H] C6H6 C16+12HH C6H12 +6HCI 2KMnO4 +3H2SO4 K2S04+2Mn SO4+5[OJ+ 3H20
9 苯氧乙醇可促使斑点迅速显色，提高灵敏度。加入过氧化氢可避免因硝酸银 还原成银而增加薄层板背景的颜色，但加入量过多又会使斑点模糊，故应掌握好 用量。 ⑵ 苯胺类显色剂 如联苯胺、联邻甲苯胺、二苯胺等。这类显色剂灵敏度 较低，显色不稳定，且毒性较大。其优点：可使不同的有机氯农药显示出不同的 颜色，有助于定性鉴定。 联邻甲苯胺对集中有机氯农药的显色结果见表 6-5。 表 6-5 联邻甲苯胺对集中有机氯农药的显色结果 农药名称 最低检出量(g) 不同农药量时斑点的颜色 0.02～0.2g 0.2～2.5g 2.5～10g DDE 0.3 — 浅米黄 深米黄 DDT 0.02 黄 绿黄 叶黄 DDD 0.25 — 极弱棕 明棕 林丹 0.02 浅蓝 鲜蓝 深蓝 艾氏剂 0.25 — 极弱黄绿 浅黄绿 六六六 0.02 极浅蓝 鲜蓝 深蓝 四、显色反应（快速定性分析） 当饲料中有机氯农药含量较高，且只需作定性检验时，可用显色反应。最 常用的显色反应是荧光黄试纸快速法。 1、原理：有机氯农药被新生态的氢还原成氯化氢，又被氧化生成氯气，氯 气与溴化钠作用生成溴，溴与荧光黄反应生成四溴荧光黄，呈桃红色。 H2SO4+Zn Zn SO4+2[H] C6H6 Cl6+12[H] C6H12 +6HCl 2KMnO4 +3H2SO4 K2SO4 +2Mn SO4+5[O]+ 3H2O
10HCI5OJ 5Ch+5H20 Ch+ 2NaBr 2NaCl+ Br2 +4Br2 COo OH 2、试剂 Br Br 荧光黄试纸:称取0lg荧光黄溶于少量乙醇中,另称取lg溴化钠溶于20ml 蒸馏水中,两液混合后加10%氢氧化钠2滴,摇匀。将滤纸条浸入,1~2分钟后 取出,晾干,备用 3、操作 取有机溶剂提取液5~10ml,加蒸馏水3ml,低温挥去溶剂,再加蒸馏水至 5ml,然后加0.5~lg锌粉,充分搅拌,加1.5ml硫酸,于50℃水浴上加热5min, 冷却后用湿润滤纸过滤至试管中,容器用水洗涤,洗液并入试管中,并使其体积 达1oml(如滤液仍浑浊,可用锌粉和硫酸再处理一次),然后加O.lg高锰酸钾和 l.5nl硫酸,混匀,迅速塞上装有荧光黄试纸的单孔塞,将试管放于50℃水浴中 l0min,如含有机氯农药,则试纸由原来的橙黄色变成桃红色 注意应排除无机氯的干扰,因此,所用的器皿、试纸、试剂均不得含氯离 子,同时以空白试验作对照,进行判定。 第三节有机磷农药分析 、概述 有机磷农药是一类高效、广谱的化学杀虫剂。它的优点是残效期短,分解 较快,在生物体内受酶作用而水解,不易产生蓄积,因此是目前农业上应用最广 泛的杀虫剂,尤其是我国停止使用有机氯农药以后,有机磷农药上升为最主要的 类农药。但其急性毒性强,易引起人畜中毒
10 10HCl+5[O] 5 Cl2 +5H2O Cl2+ 2NaBr 2NaCl+ Br2 2、试剂 荧光黄试纸：称取 0.1g 荧光黄溶于少量乙醇中，另称取 1g 溴化钠溶于 20ml 蒸馏水中，两液混合后加 10%氢氧化钠 2 滴，摇匀。将滤纸条浸入，1~2 分钟后 取出，晾干，备用。 3、操作 取有机溶剂提取液 5~10ml，加蒸馏水 3ml，低温挥去溶剂，再加蒸馏水至 5ml，然后加 0.5~1g 锌粉，充分搅拌，加 1.5ml 硫酸，于 50℃水浴上加热 5min， 冷却后用湿润滤纸过滤至试管中，容器用水洗涤，洗液并入试管中，并使其体积 达 10ml（如滤液仍浑浊，可用锌粉和硫酸再处理一次），然后加 0.1g 高锰酸钾和 1.5ml 硫酸，混匀，迅速塞上装有荧光黄试纸的单孔塞，将试管放于 50℃水浴中 10min，如含有机氯农药，则试纸由原来的橙黄色变成桃红色。 注意应排除无机氯的干扰，因此，所用的器皿、试纸、试剂均不得含氯离 子，同时以空白试验作对照，进行判定。 第三节 有机磷农药分析 一、概述 有机磷农药是一类高效、广谱的化学杀虫剂。它的优点是残效期短，分解 较快，在生物体内受酶作用而水解，不易产生蓄积，因此是目前农业上应用最广 泛的杀虫剂，尤其是我国停止使用有机氯农药以后，有机磷农药上升为最主要的 一类农药。但其急性毒性强，易引起人畜中毒。 o COOO +4Br2 OH O OH - COO o Br Br Br Br