常见风湿病实验检查 风湿病病因学检查 RA HLA-DRB10405 0409风险高达58.2% SLE HLA-DQB1(nRNP) DQa(SSA/SsB) DQW6(Sm DQB1(TCR). AS HLA-B27
3 2 1 常见风湿病实验检查 风湿病病因学检查. RA HLA-DRB10405 0409风险高达58.2%. SLE HLA-DQB1(nRNP), DQa(SSA/SSB), DQW6(Sm) DQB1(TCR). AS HLA-B27
BS HLA-B51 PM、DM LA-B8 DR3, DR1 HLA-DRB1, ancestral haplotype祖单倍体8 a-308A HLA-DR1,DR5,DRQI:P1A2/FN等位基因与 肺纤维化,SC-70的阳性呈正相 HLA-DR3.DRBI0602,03(与肾小管酸中毒 及SSB密切相关,DQAI0504,DQBI0202 RE LA-DR OA HLA-A1 B8
3 2 2 BS HLA-B51. PM\DM HLA-B8,DR3,DR1. HLA-DRB1 ，ancestral haplotype祖单倍体 8.1。TNF--308A SSC HLA-DR1,DR5,DRQI；P1A2/FN等位基因与 肺纤维化，Scl-70的阳性呈正相关。 SS HLA-DR3. DRBI0602，03（与肾小管酸中毒 及SSB密切相关，DQAI0504，DQBI0202。 RF HLA-DR4. OA HLA-A1,B8
HLA研究进展 HLA抗原基因的多态性,决定了其所表达 的HLA抗原分子的多态性,也决定了HLA系统 免疫应答的多样性与复杂性。近年来HLA基因 分型迅猛发展,使得HLA基因分型更加准确, 简便和实用。HLA基因分型目前大致分为: 限制性片段长度多态性方法PCR-RFLP (restriction fragment length polymo pisn)。 PCR-SSOP是以核酸杂交 为基础的分型技术。PCR扩增特定的基因片段, E(sequence specific oligonucleotide probes)序列特异性寡核苷酸探针杂交,进行 分析鉴定 基因芯片或微阵列技术( gene chip or DNA microarray)
3 2 3 HLA研究进展 ◆ HLA抗原基因的多态性，决定了其所表达 的HLA抗原分子的多态性， 也决定了HLA系统 免疫应答的多样性与复杂性。近年来HLA 基因 分型迅猛发展，使得HLA 基因分型更加准确， 简便和实用。 HLA 基因分型目前大致分为： 限制性片段长度多态性方法PCR- RFLP (restriction fragment length polymophism)。PCR- SSOP 是以核酸杂交 为基础的分型技术。 PCR扩增特定的基因片段， 与(sequence specific oligonucleotide probes)序列特异性寡核苷酸探针杂交，进行 分析鉴定。 ◆ 基因芯片或微阵列技术 (gene chip or DNA microarray)：
该技术其原理类似于反向斑点杂 指大规模集成电路控制的机器人在尼龙膜或硅 片等固相支持物的表面有规律地合成代表不同 基因的寡核苷酸探针,或液相合成探针后,通 过点样仪点样于固相支持物的表面。这些探针 放射性标记物或荧光素标记的样品的DNA或 CDNA互补核酸序列相结合,通过放射自显影 或荧光检测,对杂交结果进行计算机软件处理 分析,获得杂交信号的强度及分布模式图,反 映样品中基因表达的情况。 PCR-SSCP(single-strand conformation polymorphism)可检测DNA 片段中不同位置的点突变,而不必象PCR RFLP那样,必须选择合适的限制酶,使其认 别的位点正好位于等位基因的特异性核苷酸序 列处
3 2 4 ◆ 该技术其原理类似于反向斑点杂交。它是 指大规模集成电路控制的机器人在尼龙膜或硅 片等固相支持物的表面有规律地合成代表不同 基因的寡核苷酸探针，或液相合成探针后，通 过点样仪点样于固相支持物的表面。这些探针 与放射性标记物或荧光素标记的样品的DNA或 cDNA互补核酸序列相结合，通过放射自显影 或荧光检测，对杂交结果进行计算机软件处理 分析，获得杂交信号的强度及分布模式图，反 映样品中基因表达的情况。 ◆ PCR-SSCP(single-strand conformation polymorphism)可检测DNA 片段中不同位置的点突变，而不必象PCRRFLP 那样，必须选择合适的限制酶，使其识 别的位点正好位于等位基因的特异性核苷酸序 列处
PCR-SSPSEQUENCE SPECIFIC PRIMES)是近年唯一针对急诊和尸体器官移植 而设计的。其原理是通过序列特异性引物SSP, 持异的扩增目的DNA片段,再通过凝胶电泳 等手段,判断被扩增序列的存在。 ◆作为第3代遗传标记SNP单核苷酸多态位点 (single nucleotide polymorphism) 有MHC-SNP分型试剂盒面市。 ◇分子的超型及抗原结合肽超基序的发现,表明 可从功能上对类分子进行分类使得该技术更为 合理,简明和实用,对于疾病相关性的研究和 异体移植有重大意义
3 2 5 ◆ PCR- SSP(SEQUENCE SPECIFIC PRIMES)是近年唯一针对急诊和尸体器官移植 而设计的。其原理是通过序列特异性引物SSP ， 特异的扩增目的DNA 片段，再通过凝胶电泳 等手段，判断被扩增序列的存在。 ◆ 作为第3代遗传标记SNP单核苷酸多态位点 ◆ (single nucleotide polymorphism)。已 有MHC-SNP分型试剂盒面市。 ◆ 分子的超型及抗原结合肽超基序的发现，表明 可从功能上对类分子进行分类使得该技术更为 合理，简明和实用，对于疾病相关性的研究和 异体移植有重大意义
AS的相关遗传因素 1:HLA是一必需的致病基因,但其遗传风险为 16~50%。其亚型有23个之多,从 B2701~2723。与AS相关的是 2705、2704、2701等等。 ◆2:CYP2D6、LMP7和TNF308等TNF-的等位 基因; bosak报道HA-2、BW4、CW1/2、DR1 基因频率均高于健康人群。这提示HLA A、B、C、DR和DQ区域有与AS发病的易感基因 存在;HLA-B60增加了AS依赖HA-B27发病的 易感性
3 2 6 AS的相关遗传因素 ◆ 1：HLA是一必需的致病基因，但其遗传风险为 16~50%。其亚型有23个之多，从 B2701~2723。与AS相关的是 2705﹑2704﹑2701等等。 ◆ 2：CYP2D6﹑LMP7和TNF308等TNF-的等位 基因；bosak报道HLA-2﹑Bw4﹑Cw1/2﹑DR1 基因频率均高于健康人群。这提示HLAA﹑B﹑C﹑DR和DQ区域有与AS发病的易感基因 存在；HLA-B60增加了AS依赖HLA-B27发病的 易感性
◆链球菌感染的检测 1咽拭子培养 20~259 ◆Sz(链球菌酶)检 2AS>500 509 3DNA酶-B>210 85% 4ASK(抗链球菌激酶)>8 5AH(抗透明质酸酶)>128 6ANDS(抗核苷酸)<275 ◇抗EBV抗体 RA ◇PHS-2(福氏志贺菌) Reiter's 3◇肺炎克雷伯菌 AS
3 2 7 ◆ 链球菌感染的检测 ◆ 1 咽拭子培养 20~25% ◆ SZ(链球菌酶)检 ◆ 2ASO>500 50% ◆ 3DNA酶-B>210 85% ◆ 4ASK(抗链球菌激酶)>8 ◆ 5AH(抗透明质酸酶)>128 ◆ 6ANDS(抗核苷酸)<275 ◆ 抗EBV抗体 RA ◆ PHS-2(福氏志贺菌) Reiter's ◆ 肺炎克雷伯菌 AS 沙门菌,螺杆菌 ReA
炎性实验室指标 主要针对疾病活动性 ESRE CRP:2周内>80%,大于4周 <25% OTHER:1.白细胞及中性粒 细胞。2糖蛋白及粘蛋白等
3 2 8 炎性实验室指标 主要针对疾病活动性 ESR: CRP:2周内>80%, 大于4周 <25% OTHER:1.白细胞及中性粒 细胞. 2.糖蛋白及粘蛋白等
CRP 外伤 IL-1 血小板 免疫异常 IL-6 CRP 惑性增生物 TNFa ICAM-1 VCAM-1 E- SELECTIN颜 系统亢迷 BTG 白细胞 粘着游走 PF4
3 2 9 CRP IL-1 IL-6 TNFa TG PF4 白细胞 粘着游走 CRP 凝血纤溶 系统亢进 ICAM-1 VCAM-1 E-SELECTIN 血小板 凝集亢进 血小板 释放反应 感染 外伤 免疫异常 恶性增生物
CRP与炎症 ◆CRP是重要的炎性因子,其致炎作用包括:激活补 体、刺激细胞因子分泌、上调内皮细胞黏附分子 表达、抑制一氧化氮合成、增加纤溶酶原激活物 抑制剂-1的水平与活性、增强巨嚓细胞对低密度 脂蛋白的摄取及单核细胞化学趋化性、上调血管 紧张素Ⅱ-1型受体的表达等 ◆CRP与肥胖关系密切,而且脂肪细胞也可分泌CRP ◆CRP水平随年龄的增高而升高,女性较高,吸烟 感染和某些药物可使其增高;而饮酒和某些药物可 使其降低 10
3 2 10 CRP与炎症 ◆ CRP是重要的炎性因子,其致炎作用包括:激活补 体、刺激细胞因子分泌、上调内皮细胞黏附分子 表达、抑制一氧化氮合成、增加纤溶酶原激活物 抑制剂-1的水平与活性、增强巨噬细胞对低密度 脂蛋白的摄取及单核细胞化学趋化性、上调血管 紧张素Ⅱ-1型受体的表达等. ◆ CRP与肥胖关系密切,而且脂肪细胞也可分泌CRP. ◆ CRP水平随年龄的增高而升高,女性较高,吸烟、 感染和某些药物可使其增高;而饮酒和某些药物可 使其降低