《环境毒理学》第一章 环境毒理学概述

环境毒理学 第一章环境毒理学概述 毒理学( Toxicology) 毒理学:是研究物理、化学和生物因素,特别是化学因素对生物机体的损害作用及其机理的科学 环境毒理学:研究环境污染物,特别是化学污染物对生物有机体,尤其是对人体的损害作用及其机理的 由于环境污染物对人类之外其他生物种类包括动物、植物和微生物等的损害作用更加严重。环境毒理 学硏究已扩展到环境污染物对各种生物机体及其种群的损害作用规律及防治措施的范围。 环境生态毒理学:应用毒理学的观点和方法,从环境生态学角度研究环境污染物对生态系统及其组成 种群的影响规律的一门科学。 环境生态毒理学是应用毒理学的观点和方法,从环境生态学角度研究环境污染物对生态系统及其组成 种群影响规律的一门科学。是环境毒理学的一部分,也是环境生态学的分支学科。 环境生态毒理学主要研究对象不是生物个体的变化,而是生物群体的改变:不仅研究环境化学物对某 种群的损害,而且研究环境化学物对生态系统的影响 毒物:进入生物机体的外源性物质,累积到一定程度后,可以达到干扰机体生理平衡,导致其组织 器官或生理过程受到不良影响的程度 外源性化学物( Xenobiotics:是一类“外来生物活性物质",又可称为外来化学物,以区别于机体内代 谢过程中形成的产物和中间产物一内源化学物。超过800万种,常用65725种。工、商业应用;化妆 品;食品添加剂:农药:药品等 环境化学污染物通常简称为环境化学物,是由于人类的生产活动和生活活动人为地进入环境的化学物 质,它们属于外源化学物的范畴 毒理学发展简史 早在远古时代,人们对一些动植物的有毒作用就已有认识 550BC已有文献记载 在16世纪,瑞士著名医生 Paracelsus提出有毒物的剂量反应。 “ Everything is a poison… it is only the dose that makes it not a poison” 18世纪西班牙化学家和生理学家 Bonaventura orfila:现代毒理学的奠基人 组织和体液中的毒物的化学分析鉴别 --试验动物的系统应用 毒理学在19世纪得到快速发展

环境毒理学 第一章 环境毒理学概述 一、毒理学(Toxicology) 毒理学：是研究物理、化学和生物因素，特别是化学因素对生物机体的损害作用及其机理的科学。 环境毒理学:研究环境污染物，特别是化学污染物对生物有机体，尤其是对人体的损害作用及其机理的 科学。 由于环境污染物对人类之外其他生物种类包括动物、植物和微生物等的损害作用更加严重。环境毒理 学研究已扩展到环境污染物对各种生物机体及其种群的损害作用规律及防治措施的范围。 环境生态毒理学：应用毒理学的观点和方法，从环境生态学角度研究环境污染物对生态系统及其组成 种群的影响规律的一门科学。 环境生态毒理学是应用毒理学的观点和方法，从环境生态学角度研究环境污染物对生态系统及其组成 种群影响规律的一门科学。是环境毒理学的一部分，也是环境生态学的分支学科。 环境生态毒理学主要研究对象不是生物个体的变化，而是生物群体的改变；不仅研究环境化学物对某 一种群的损害，而且研究环境化学物对生态系统的影响。 毒物：进入生物机体的外源性物质，累积到一定程度后，可以达到干扰机体生理平衡，导致其组织、 器官或生理过程受到不良影响的程度。 外源性化学物(Xenobiotics): 是一类“外来生物活性物质”，又可称为外来化学物，以区别于机体内代 谢过程中形成的产物和中间产物——内源化学物。超过 800 万种，常用 65725 种。工、商业应用；化妆 品；食品添加剂；农药；药品等。 环境化学污染物通常简称为环境化学物,是由于人类的生产活动和生活活动人为地进入环境的化学物 质，它们属于外源化学物的范畴。 二、毒理学发展简史 早在远古时代，人们对一些动植物的有毒作用就已有认识。 1550 BC 已有文献记载。 在 16 世纪，瑞士著名医生 Paracelsus 提出有毒物的剂量反应。 “Everything is a poison…it is only the dose that makes it not a poison” 18 世纪西班牙化学家和生理学家 Bonaventura Orfila:现代毒理学的奠基人。 ---组织和体液中的毒物的化学分析鉴别 ---试验动物的系统应用 毒理学在 19 世纪得到快速发展

、毒理学的分类 按工作任务范围分: 按研究手段分 作毒理学; 分子毒理学; 环境毒理学; 细胞毒理学; 生态毒理学; 组织毒理学 法医毒理学; 遗传毒理学; 临床毒理学 免疫毒理学 按外源性化合物的类型分 食品毒理学 金属毒理学 药物毒理学; 放射毒理学 四、环境污染物 (一)环境污染物的种类 化学类 主要的有:重金属;有机染料;农用化学品;食品中毒素添加剂等:医用、日用污染物 目前日益受到重视的环境类激素(内分秘干扰物)可分3类:外源性雌激素、外源性雄激素、拟甲状腺 激素,特别是前者的作用更引起人们的关注。它可降低精子数,减少精液量,引发生殖发育异常.促发 些与激素有关的肿瘤如睾丸癌、乳腺癌等,从而引发环境雌性化,如多氧联苯、多环芳烃、二口恶英等 国际癌症研究所(IARC)到1995年为止,已出版了60多卷专集,共评述了800多种化学物质,按其致癌 程度,已确证人类致癌物或生产方式约有600种,如黄曲霉素、砷、石棉、联苯胺等。但当前人类所接触 到的化学物质数以10万计,而对其中绝太部分物质的致癌性仍缺乏了解。可见今后任务的艰巨性 2.物理类 主要有:滥用医源电离辐射x、υ射线,CT等等;环境电离辐射:如氡及其子体,建材中的放射性物 质;环境中紫外线的强化:;激光与电磁辐射场等。 辐射作为环境诱变剂,可诱发畸胎效应,如日本原爆幸存者胎内(妊娠8~15周)受到照射,可发生严 重智力障碍,IQ值下降、小头症等。这是由于受精卵至器官形成期对辐射敏感而发生畸形。 辐射诱发癌症包括白血病和实体癌。辐射致癌研究的历史较久,1945年在日本原子弹爆炸后,对10余 万幸存者进行终生观察,发现最主要医学后果是癌症发生 3生物类: 细菌、病毒等,以病毒为主,这些病毒诱发肿瘤亦为主要后果。现已发现有150泉种病毒可诱发肿瘤.肿 瘤病毒中有DNA病毒、RNA病毒。 肿瘤是环境因素、遗传因素和机能因素相互作用所致的多因素作用、多阶段发病和多基因参与的疾病。其 中环境因素占肿瘤病因学中的85%以上我国人口死因中,城市中占首位,每年死亡人数160万,造成社 会负担在200亿以上 (二)环境污染对机体作用的特点 1、接触剂量小:剂量环境污染对人类造成的影响,大多数是小剂量长期暴露,污染面广,污染对健 康的影响难以准确识别 2、长时间内反复接触甚至终生接触:既有急性效应(大量一次性摄入),但多数为远后效应,其中以 随机性效应中的致突、致癌为主,需要大人群、长时期的、通过流行病学的观察、分析才能确认,因此技 术难度大 3、多种污染物同时作用于机体:存在相加、拮抗、协同等联合作用

四、环境污染物 (一) 环境污染物的种类 1．化学类： 主要的有：重金属；有机染料；农用化学品；食品中毒素 添加剂等；医用、日用污染物 目前日益受到重视的环境类激素(内分秘干扰物)可分3类：外源性雌激素、外源性雄激素、拟甲状腺 激素，特别是前者的作用更引起人们的关注。它可降低精子数，减少精液量，引发生殖发育异常．促发一 些与激素有关的肿瘤如睾丸癌、乳腺癌等，从而引发环境雌性化，如多氧联苯、多环芳烃、二 口恶 英等。 国际癌症研究所(IARC)到1995年为止，已出版了6O多卷专集，共评述了800多种化学物质，按其致癌 程度，已确证人类致癌物或生产方式约有600种，如黄曲霉素、砷、石棉、联苯胺等。但当前人类所接触 到的化学物质数以l0万计，而对其中绝太部分物质的致癌性仍缺乏了解。可见今后任务的艰巨性。 2．物理类： 主要有：滥用医源电离辐射x、υ射线，CT等等；环境电离辐射：如氡及其子体，建材中的放射性物 质；环境中紫外线的强化；激光与电磁辐射场等。 辐射作为环境诱变剂，可诱发畸胎效应，如日本原爆幸存者胎内(妊娠8～15周)受到照射，可发生严 重智力障碍，IQ值下降、小头症等。这是由于受精卵至器官形成期对辐射敏感而发生畸形。 辐射诱发癌症包括白血病和实体癌。辐射致癌研究的历史较久，1945年在日本原子弹爆炸后，对1O余 万幸存者进行终生观察，发现最主要医学后果是癌症发生。 3 生物类： 细菌、病毒等，以病毒为主，这些病毒诱发肿瘤亦为主要后果。现已发现有150泉种病毒可诱发肿瘤．肿 瘤病毒中有DNA病毒、RNA病毒。 肿瘤是环境因素、遗传因素和机能因素相互作用所致的多因素作用、多阶段发病和多基因参与的疾病。其 中环境因素占肿瘤病因学中的85％ 以上 我国人口死因中，城市中占首位，每年死亡人数160万，造成社 会负担在200亿以上。 (二)环境污染对机体作用的特点 1、接触剂量小：剂量环境污染对人类造成的影响，大多数是小剂量长期暴露，污染面广，污染对健 康的影响难以准确识别。 2、长时间内反复接触甚至终生接触：既有急性效应(大量一次性摄入)，但多数为远后效应，其中以 随机性效应中的致突、致癌为主，需要大人群、长时期的、通过流行病学的观察、分析才能确认，因此技 术难度大。 3、多种污染物同时作用于机体：存在相加、拮抗、协同等联合作用 三、毒理学的分类 按工作任务范围分： 工作毒理学； 环境毒理学； 生态毒理学； 法医毒理学； 临床毒理学。 按外源性化合物的类型分： 食品毒理学； 金属毒理学； 药物毒理学； 放射毒理学。 按研究手段分： 分子毒理学； 细胞毒理学； 组织毒理学； 遗传毒理学； 免疫毒理学

4、接触人群的易感性差异较大:接触的人群既有青少年、成年,又有老幼病弱 (三)环境污染物与机体的交互作用 人的疾病/健康状态在本质上是由环境暴露、个体遗传易感性、个体的衰老过程,通过复杂的相互作 用而决定的。 编码功能蛋白:适应或代偿环墩因囊的不利影响 环境因子 信息传递通路 细胞基因组 错误应答:周期调摊失营 环境毒物对细胞及大分子的直接或间接作用和损害的信息,可通过信息传递通路传递给细胞基因组, 后者通过编码各种功能蛋白对环境因子所造成的应激做出应答,以适应或代偿环境因素对细胞或机体不利 影响,使细胞得以恢复。因这种适应是有限的,如负荷越过限度,细胞即会由代偿进入不正常失代偿状态, 引起细胞损伤或死亡:另一途径,细胞也可做岀错误应答,导致周期调控失常,异常增殖,永生化,产生 肿瘤或导致细胞损伤坏死 五、环境毒理学的研究对象、任务和内容 研究对象:对各种生物特别是对人体产生危害的各种环境污染物,包括物理性、化学性及生物性污染 物,其中以环境化学物为主要研究对象 环境污染物的种类繁多 ●物理性污染:电离辐射、电磁辐射及噪声污染等 ●生物性污染:细菌、病毒及生物毒素污染等; 化学污染物如工业化学品、农用化学品、日用化学品及染料等 研究内容和任务 (1)研究环境毒物与机体相互作用的一般规律 包括毒物接触机体后的吸收、分布、代谢转化、排泄等过程和毒作用机理,探求其对肌体健康损害的 早期反应指标(即用最灵敏的探测手段,找出环境污染物作用于机体后最初出现的生物学变化,以便及早 发现并设法排除),预测其对健康的潜在危害,以便及早防治 (2)研究环境毒物对机体影响的作用条件及其影响因素: 除主要通过动物实验外,还应结台现场调査,以观察环境毒物在环境中的浓度、分布、变迁、侵入方 式、接触时间以及其他作用条件对肌体反应的影响 (3)研究环境毒物及其转化产物的毒性和评定方法: 主要包括各种毒性试验,测定其急性、蓄积性、亚急性、亚慢性、慢性毒性和“三致性”,及多种 有毒物质共存时的联合毒性。从剂量一反应关系中得出对肌体作用的相对安全界限(最大无作用水平),为 制定环境卫生标准提供依据。 作用和意义: 1环境有毒物的毒理学评价:毒性鉴定、危险度评估 2.在环境监测和人群健康影响研究中的应用 3.在制定环境卫生基准中的应用

4、接触人群的易感性差异较大：接触的人群既有青少年、成年，又有老幼病弱 (三)环境污染物与机体的交互作用 人的疾病／健康状态在本质上是由环境暴露、个体遗传易感性、个体的衰老过程，通过复杂的相互作 用而决定的。 环境毒物对细胞及大分子的直接或间接作用和损害的信息，可通过信息传递通路传递给细胞基因组， 后者通过编码各种功能蛋白对环境因子所造成的应激做出应答，以适应或代偿环境因素对细胞或机体不利 影响，使细胞得以恢复。因这种适应是有限的，如负荷越过限度，细胞即会由代偿进入不正常失代偿状态， 引起细胞损伤或死亡；另一途径，细胞也可做出错误应答，导致周期调控失常，异常增殖，永生化，产生 肿瘤或导致细胞损伤坏死。 五、环境毒理学的研究对象、任务和内容 研究对象：对各种生物特别是对人体产生危害的各种环境污染物，包括物理性、化学性及生物性污染 物，其中以环境化学物为主要研究对象。 环境污染物的种类繁多 ： 物理性污染 :电离辐射、电磁辐射及噪声污染等； 生物性污染 :细菌、病毒及生物毒素污染等 ; 化学污染物 :如工业化学品、农用化学品、日用化学品及染料等。 研究内容和任务： (1)研究环境毒物与机体相互作用的一般规律: 包括毒物接触机体后的吸收、分布、代谢转化、排泄等过程和毒作用机理，探求其对肌体健康损害的 早期反应指标(即用最灵敏的探测手段，找出环境污染物作用于机体后最初出现的生物学变化，以便及早 发现并设法排除)，预测其对健康的潜在危害，以便及早防治 (2)研究环境毒物对机体影响的作用条件及其影响因素： 除主要通过动物实验外，还应结台现场调查，以观察环境毒物在环境中的浓度、分布、变迁、侵入方 式、接触时间以及其他作用条件对肌体反应的影响。 (3)研究环境毒物及其转化产物的毒性和评定方法： 主要包括各种毒性试验， 测定其急性、蓄积性、亚急性、亚慢性、慢性毒性和“三致性”， 及多种 有毒物质共存时的联合毒性。从剂量—反应关系中得出对肌体作用的相对安全界限(最大无作用水平)，为 制定环境卫生标准提供依据。 作用和意义： 1.环境有毒物的毒理学评价：毒性鉴定、危险度评估。 2.在环境监测和人群健康影响研究中的应用 3.在制定环境卫生基准中的应用 环境因子 信息传递通路 细胞基因组 编码功能蛋白：适应或代偿环境因素的不利影响 错误应答：周期调控失常

4.污染物处理 ③保护地球生物圈包括人类在内的各种生物的生存和持续发展 环境毒理学在环境监测中的应用: 目前,环境毒理学在环境监测中的应用.主要可分为以下两类: 1直接用于现场检测,以评价环境污染状况 有的国际组织推荐用紫露草四分体微核试验、紫露草雄蕊毛突变实验、蚕豆根尖细胞有丝分裂染色体 畸变试验建立全球性的生物监测网以监测大气和水体的污染。这些方法经济、简便、快速、测试结果有效 可靠,更重要的是可直接用于现场测试。国外现已分别或联合使用这些方法对机场、停车场、学校、田间 城市烟雾区、高速公路收费处、垃圾场、水库、水井及某些工作处的各种气态和液态污染物进行了监测 这些监测为环境污染状况提供了有说服力的科学依据,有的已引起管理部门的重视 2环境样品的生物测试 收集空气、水和固体废弃物等环境样品进行生物测试,以了解环境是否受污染 1986年,我国在北京、上海、天津、青岛等20个城市执行生物监测。至今,生物监测在我国各级环 境监测站中尚未很好地开展,影响了环境监测的深入发展。 比如现在死鱼污染纠纷较多,环保部门往往测定化学需氧量、溶解氧、重金属等项目,有时这些项目 都不超标却造成了死鱼事故,数据不能直接说明事故原因,给纠纷的处理带来一定困难如果能够开展生 物监测,进行鱼类毒性试验,找出某种毒物或工业废水对鱼类半致死浓度与安全浓度,则将给纠纷的处理 提供更科学的依据。 环境样品的生物测试方法很多.可以说现行毒理学的各种方法包括整体动物、体外培养细胞和器官等 都可用于测试,测试的重点包括一般毒性、免疫毒性、“三致性”、生殖和发育毒性或其他特异器官的毒性 等。目前多采用遗传毒理学方法进行测试。报道最多的有Ames试验、人体外周血淋巴细胞SCE和染色体 畸变分析、小鼠骨髓微核试验和染色体畸变分析、果蝇伴性隐性致死试验等。 我国不少地区都对水源水和饮用水的致突变性进行了监测和研究。如上海市“饮水与健康”协作组发 现黄浦江中有机物含量达700种。由于水中有机物常以混合方式联合作用于人体.而致癌物与致突变物之 间存在高度相关性.故可通过监测水中混合有机物致突变性来评价其致癌危险性 六、环境毒理学的研究方法 试验材料:根据研究目的可选用植物、微生物、非哺乳类动物及哺乳类动物。 环境生态毒理学硏究上主要对植物和非哺乳类动物群体进行研究,在环境生态毒理学上常常选用水漒 做毒性试验,也常常将收集到的毒理学资料通过数学和计算机科学的方法编制生态毒理模型,以预测未来 的生态毒理学现象。 在研究环境污染物对动物,尤其是对人体的生物学作用时,常以哺乳类动物为主要硏究材料进行体内 研究和体外实验 研究方法: 1.体内实验法:多在整体动物进行,也称整体动物实验 按人体可能接触的剂量和途径使实验动物在一定时间内接触环境污染物,然后观察动物出现的形态和 功能的变化。整体动物实验不仅可以反映环境污染物的综合生物学效应,而且可以反映在动物整体状态下 环境污染物的各种生物学效应。 实验动物( laboratory animal):指经人工培育,对其携带微生物实行控制,遗传背景明确,来源清楚,可 用于科学研究的动物。一般的实验动物有:狗、小鼠、大鼠、家兔、豚鼠、仓鼠

4.污染物处理 ®保护地球生物圈包括人类在内的各种生物的生存和持续发展 环境毒理学在环境监测中的应用： 目前，环境毒理学在环境监测中的应用．主要可分为以下两类： 1 直接用于现场检测，以评价环境污染状况 有的国际组织推荐用紫露草四分体微核试验、紫露草雄蕊毛突变实验、蚕豆根尖细胞有丝分裂染色体 畸变试验建立全球性的生物监测网以监测大气和水体的污染。这些方法经济、简便、快速、测试结果有效 可靠，更重要的是可直接用于现场测试。国外现已分别或联合使用这些方法对机场、停车场、学校、田间、 城市烟雾区、高速公路收费处、垃圾场、水库、水井及某些工作处的各种气态和液态污染物进行了监测。 这些监测为环境污染状况提供了有说服力的科学依据，有的已引起管理部门的重视 2 环境样品的生物测试 收集空气、水和固体废弃物等环境样品进行生物测试，以了解环境是否受污染。 1986 年，我国在北京、上海、天津、青岛等 20 个城市执行生物监测。至今，生物监测在我国各级环 境监测站中尚未很好地开展，影响了环境监测的深入发展。 比如现在死鱼污染纠纷较多，环保部门往往测定化学需氧量、溶解氧、重金属等项目，有时这些项目 都不超标却造成了死鱼事故，数据不能直接说明事故原因，给纠纷的处理带来一定困难 如果能够开展生 物监测，进行鱼类毒性试验，找出某种毒物或工业废水对鱼类半致死浓度与安全浓度，则将给纠纷的处理 提供更科学的依据。 环境样品的生物测试方法很多．可以说现行毒理学的各种方法包括整体动物、体外培养细胞和器官等 都可用于测试，测试的重点包括一般毒性、免疫毒性、“三致性”、生殖和发育毒性或其他特异器官的毒性 等。目前多采用遗传毒理学方法进行测试。报道最多的有 Ames 试验、人体外周血淋巴细胞 SCE 和染色体 畸变分析、小鼠骨髓微核试验和染色体畸变分析、果蝇伴性隐性致死试验等。 我国不少地区都对水源水和饮用水的致突变性进行了监测和研究。如上海市“饮水与健康”协作组发 现黄浦江中有机物含量达 700 种。由于水中有机物常以混合方式联合作用于人体．而致癌物与致突变物之 间存在高度相关性．故可通过监测水中混合有机物致突变性来评价其致癌危险性。 六、环境毒理学的研究方法 试验材料：根据研究目的可选用植物、微生物、非哺乳类动物及哺乳类动物。 环境生态毒理学研究上主要对植物和非哺乳类动物群体进行研究，在环境生态毒理学上常常选用水溞 做毒性试验，也常常将收集到的毒理学资料通过数学和计算机科学的方法编制生态毒理模型，以预测未来 的生态毒理学现象。 在研究环境污染物对动物，尤其是对人体的生物学作用时，常以哺乳类动物为主要研究材料进行体内 研究和体外实验。 研究方法: 1. 体内实验法：多在整体动物进行，也称整体动物实验。 按人体可能接触的剂量和途径使实验动物在一定时间内接触环境污染物，然后观察动物出现的形态和 功能的变化。整体动物实验不仅可以反映环境污染物的综合生物学效应，而且可以反映在动物整体状态下 环境污染物的各种生物学效应。 实验动物（laboratory animal）：指经人工培育，对其携带微生物实行控制，遗传背景明确，来源清楚，可 用于科学研究的动物。一般的实验动物有:狗、小鼠 、大鼠、家兔、豚鼠、仓鼠

实验动物的毒理学实验资料外推到人群接触的安全性时的不确定性 实验动物和人对外源化学物的反应敏感性不同,有时甚至存在着质的差别 2高剂量向低剂量外推的不确定性 3小数量实验动物到大量人群外推的不确定性 4成年健康动物向年老体弱及患病个体外推的不确定性 描述毒理学试验的基本原则 化学物在实验动物产生的作用,可以外推于人。基本假设①人是最敏感的动物物种;②人和实验 动物的生物学过程与体重(或体表面积)相关 2实验动物必须暴露于高剂量,这是发现对人潜在危害的必需的和可靠的方法 3成年的健康(雄性和雌性未孕)实验动物和人可能的暴露途径基本一致 按照染毒时间的长短可分为:急性毒性试验 acute toxicity),一次或24小时;亚急性毒性试验( subacute rIcity),15-30天;亚慢性毒性试验 subchronic toxicity),1-3个月;慢性毒性试验( chronic toxicity),6个 月-2年,低剂量反复染毒 按照实验目的的不同可分为:繁殖实验、蓄积实验、代谢实验及“三致实验”(即致癌变、致畸变和致 突变实验)。 2体外试验:植物、微生物、动物体外试验(器官、组织、细胞、亚细胞、分子水平试验) 可利用器官灌流技术,将受试化学物经过血管流经特定的脏器,观察环境污染物在脏器内的代谢转化 和毒性作用。也可以将某种脏器从体内取出再制成原代游离细胞,进行环境污染物对细胞毒性作用的研究。 还可以利用经过在体外多次传代的细胞株,例如Hela细胞、CHO细胞、V79细胞等对外来化学物进 行一般毒性和特殊毒性研究 采用离心技术,可将细胞器或组分,例如内质网、线粒体等分离纯化,研究环境污染物对这些亚细胞 组分的毒性作用 3调查研究:以已有试验结果、已有知识为基础,采用医学流行病学的调查方法 近代环境毒理学还将生物化学和分子生物学的最新技术引用到实验硏究中;将有关酶、核酸、蛋白 质的理论和方法渗透到环境毒理学的多个领域 ˉPCR基因扩增、DNA序列分析、以及单克隆抗体技术等分子生物学的概念和方法已成为环境毒理学 研究的重要工具,形成了环境生化与分子毒理学分支 近年来,随着人类基因组、小鼠基因组及水稻基因组的测定和完成,随着各种动、植物基因组学和蛋 白质组学的研究进展,环境基因组学、环境蛋白质组学及环境酶学正在兴起。在不久的将来,这些研究领 域的迅速发展,将使环境毒理学的面貌为之一新

实验动物的毒理学实验资料外推到人群接触的安全性时的不确定性 1 实验动物和人对外源化学物的反应敏感性不同，有时甚至存在着质的差别 2 高剂量向低剂量外推的不确定性 3 小数量实验动物到大量人群外推的不确定性 4 成年健康动物向年老体弱及患病个体外推的不确定性 描述毒理学试验的基本原则 1 化学物在实验动物产生的作用，可以外推于人。基本假设 ①人是最敏感的动物物种；②人和实验 动物的生物学过程与体重 (或体表面积)相关。 2 实验动物必须暴露于高剂量，这是发现对人潜在危害的必需的和可靠的方法。 3 成年的健康(雄性和雌性未孕)实验动物和人可能的暴露途径基本一致。 按照染毒时间的长短可分为：急性毒性试验(acute toxicity)，一次或 24 小时；亚急性毒性试验(subacute toxicity)，15-30 天；亚慢性毒性试验(subchronic toxicity)，1-3 个月；慢性毒性试验(chronic toxicity)，6 个 月-2 年，低剂量反复染毒 按照实验目的的不同可分为：繁殖实验、蓄积实验、代谢实验及“三致实验”（即致癌变、致畸变和致 突变实验）。 2.体外试验：植物、微生物、动物体外试验（器官、组织、细胞、亚细胞、分子水平试验）； 可利用器官灌流技术，将受试化学物经过血管流经特定的脏器，观察环境污染物在脏器内的代谢转化 和毒性作用。也可以将某种脏器从体内取出再制成原代游离细胞，进行环境污染物对细胞毒性作用的研究。 还可以利用经过在体外多次传代的细胞株，例如 HeLa 细胞、CHO 细胞、V79 细胞等对外来化学物进 行一般毒性和特殊毒性研究。 采用离心技术，可将细胞器或组分，例如内质网、线粒体等分离纯化，研究环境污染物对这些亚细胞 组分的毒性作用。 3.调查研究：以已有试验结果、已有知识为基础，采用医学流行病学的调查方法 •近代环境毒理学还将生物化学和分子生物学的最新技术引用到实验研究中； 将有关酶、核酸、蛋白 质的理论和方法渗透到环境毒理学的多个领域； •PCR 基因扩增、DNA 序列分析、以及单克隆抗体技术等分子生物学的概念和方法已成为环境毒理学 研究的重要工具，形成了环境生化与分子毒理学分支。 •近年来，随着人类基因组、小鼠基因组及水稻基因组的测定和完成，随着各种动、植物基因组学和蛋 白质组学的研究进展，环境基因组学、环境蛋白质组学及环境酶学正在兴起。在不久的将来，这些研究领 域的迅速发展，将使环境毒理学的面貌为之一新

毒理学研究方法的优缺点 研究方法流行病学研究 受控的临床研究 毒理学体内试验 毒理学体外试验 优点·真实的暴露条件 规定的限定暴露条件·易于控制暴露条件影响因素少,易于控 在各化学物之间发生相·在人群中测定反应能测定多种效应 互作用 对某组人群(如哮嘴)·能评价宿主特征的作用·可进行某些深入的研 测定在人群的作用 的研究是有力的 (如:性别、齡、遗究(如:机制,代谢) 表示全部的人敏感性·能测定效应的强度传特征等和其他调控因·人力物力花费较少 亲饮食等) 能评价机制 缺点耗资、耗时多 耗资多 动物暴露与人桑露相关·不能全面反映馨作用 多为回顾性,无健康较低浓度和较短时的不确定性 不能作为拿性评价和 保护 间的暴露 受控的饲养条件与人的危险性评价的最后依 难以确定暴露,有混杂·限于较少量的人群实际情况不一致 暴露问题 (一般<50) 暴露的浓度和时间的模·滩以观察慢性毒作用 可检测的危险性增加必·限于暂时、微小 式显着地不同于人群的 需达到2倍以上 可逆的效应 露 测定指标较粗〔发病率,·一般不适于研究最 敏惑的人群 基因水平上的研究 1、识别易感基因 环境应答基因(环境易感基因):对环境因子具有特定的反应,影响人体对有害环境因子 (特别是环境化学物)易感性的基因 人类对环境因素易感的基因非常之多,总称为环境基因组。 易感性形成的原因:①代谢酶的遗传多态性;②修复能力的差异;③受体因素;④宿 主因素等多方面 2、以癌前病变为主,寻找相关的标志物,为癌的早期诊断、早期预测、早期治疗提供依据 环境基因组: 人类的某些基因对环境因子具有特定的反应,这些反应影响着人体对有害环境因子(特别是环境化学 物)的易感性。这些基因被称为环境应答基因或环境易感基因。人类对环境因素易感的基因非常之多,总 称为环境基因组。 然而,环境易感基因是如何与环境相互作用的,环境易感基因的结构或其多态性与人类疾病之间是如 何联系的,迄今知之甚少,开展环境基因组学的研究是摆在环境毒理学家面前的重要任务之 基因水平上的研究(切入点) 识别环境反应基因结构与功能的多态性一一易感基因,阐明个体对环境暴露作出不同反应的遗传学 基础,以更好地预测高危人群危险度及易感个体的判定,协助管理杋构发展环境保护政策。探究其原因, 找出易感基因,是从基因水平上研究的切入点。 毒性作用的易感性形成的原因是多方面的,有:①代谢酶的遗传多态性:②修复能力的差异;③受 体因素:④宿主因素等多方面。 2以癌前病变为主,寻找相关的标志物,为癌的早期诊断、早期预测、早期治疗提供依据 以肺癌为例,正常细胞经诱癌因子作用发展成瘤,要经历一系列组织病理学变化:化生、增生、不典

毒理学研究方法的优缺点 研究方法 流行病学研究 受控的临床研究 毒理学体内试验 毒理学体外试验 优点 · 真实的暴露条件 · 规定的限定暴露条件 · 易于控制暴露条件 · 影响因素少，易于控 · 在各化学物之间发生相 · 在人群中测定反应 · 能测定多种效应 制 互作用 · 对某组人群(如哮喘) · 能评价宿主特征的作用 · 可进行某些深入的研 · 测定在人群的作用 的研究是有力的 (如：性别、年龄、遗 究(如：机制，代谢) · 表示全部的人敏感性 · 能测定效应的强度 传特征等和其他调控因 · 人力物力花费较少 素饮食等) · 能评价机制 缺点 · 耗资、耗时多 · 耗资多 · 动物暴露与人暴露相关 · 不能全面反映毒作用 · 多为回顾性，无健康 · 较低浓度和较短时 的不确定性 不能作为毒性评价和 保护 间的暴露 · 受控的饲养条件与人的 危险性评价的最后依 · 难以确定暴露，有混杂 · 限于较少量的人群 实际情况不一致 据 暴露问题 (一般<50) · 暴露的浓度和时间的模 · 难以观察慢性毒作用 · 可检测的危险性增加必 · 限于暂时、微小、 式显著地不同于人群的 需达到 2 倍以上 可逆的效应 暴露 · 测定指标较粗(发病率， · 一般不适于研究最 死亡率) 敏感的人群 基因水平上的研究 1、识别易感基因 环境应答基因(环境易感基因)：对环境因子具有特定的反应，影响人体对有害环境因子 （特别是环境化学物）易感性的基因。 人类对环境因素易感的基因非常之多，总称为环境基因组。 易感性形成的原因：① 代谢酶的遗传多态性；② 修复能力的差异；③ 受体因素；④ 宿 主因素等多方面。 2、以癌前病变为主，寻找相关的标志物，为癌的早期诊断、早期预测、早期治疗提供依据。 环境基因组 ： 人类的某些基因对环境因子具有特定的反应，这些反应影响着人体对有害环境因子（特别是环境化学 物）的易感性。这些基因被称为环境应答基因或环境易感基因。人类对环境因素易感的基因非常之多，总 称为环境基因组。 然而，环境易感基因是如何与环境相互作用的，环境易感基因的结构或其多态性与人类疾病之间是如 何联系的，迄今知之甚少，开展环境基因组学的研究是摆在环境毒理学家面前的重要任务之一。 基因水平上的研究(切入点) 1 识别环境反应基因结构与功能的多态性——易感基因，阐明个体对环境暴露作出不同反应的遗传学 基础，以更好地预测高危人群危险度及易感个体的判定，协助管理机构发展环境保护政策。探究其原因， 找出易感基因，是从基因水平上研究的切入点。 毒性作用的易感性形成的原因是多方面的，有：① 代谢酶的遗传多态性；② 修复能力的差异；③ 受 体因素；④ 宿主因素等多方面。 2 以癌前病变为主，寻找相关的标志物，为癌的早期诊断、早期预测、早期治疗提供依据。 以肺癌为例，正常细胞经诱癌因子作用发展成瘤，要经历一系列组织病理学变化：化生、增生、不典

型性增生、严重不典型性增生,发展成癌时间约需10~30年 美国国家环境卫生科学研究院( NIEHS)1998年启动环境基因组计划(EGP)。EGP计划的两个主要目标: ①促进识别环境暴露后决定疾病危险差异的环境反应基因结构与功能上的多态性。 ②促进疾病病因学中基因环境交互作用的流行病学研究。 即在强调两者交互作用的基础上,首先研究1大类200种机体耐环境的反应基因 10类反应基因为:外源性物质代谢与解毒基因,激素代谢基因,受体基因,DNA修复基因,细胞周 期基因,控制细胞死亡基因,免疫及炎症反应传递基因,营养因子传导基因,氧化过程中包含的基因 及信号转导系统的基因。 通过交互作用研究,最终目标是绘制所有环境反应基因中易感基因的多态性结构变异谱并阐明各自 的功能,为疾病危险度的评价、病因学研究及痰病防治提供理论依据 环境毒理学的发展方向 1、探讨多种环境污染物同时对机体产生的联合作用:相加、拮抗、协同等联合作用 2、深入研究环境污染物在环境中的降解和转化产物及其引起的生物学变化 3、进一步研究致畸作用的机理,完善致突变作用的试验方法和致癌作用与致突变作用的确切关系 4、深入研究早期观察的敏感指标:环境污染物对动物神经功能、行为表现、免疫机能的影响往往出 现在一般毒性表现之前,有必要把这些影响作为早期观察的敏感指标,进行深入研究 5、环境污染物化学结构与毒性作用的关系:环境污染物化学结构与毒性作用的性质和强度有密切关 系,应深入硏究,找出规律,以便根据化学结构,作出毒性的估计,减少动物毒性试验,并为合成某些低 毒化合物提供依据 6、吸收分子生物学的最新成就,使环境毒理学的研究由细胞水平研究提高到分子水平

型性增生、严重不典型性增生，发展成癌时间约需 10～30 年。 美国国家环境卫生科学研究院(NIEHS)1998年启动环境基因组计划(EGP)。 EGP计划的两个主要目标： ① 促进识别环境暴露后决定疾病危险差异的环境反应基因结构与功能上的多态性。 ② 促进疾病病因学中基因环境交互作用的流行病学研究。 即在强调两者交互作用的基础上，首先研究l大类200种机体耐环境的反应基因。 1O类反应基因为：外源性物质代谢与解毒基因，激素代谢基因，受体基因，DNA修复基因，细胞周 期基因，控制细胞死亡基因，免疫及炎症反应传递基因，营养因子传导基因，氧化过程中包含的基因 及信号转导系统的基因。 通过交互作用研究，最终目标是绘制所有环境反应基因中易感基因的多态性结构变异谱并阐明各自 的功能，为疾病危险度的评价、病因学研究及痰病防治提供理论依据。 环境毒理学的发展方向 1、探讨多种环境污染物同时对机体产生的联合作用：相加、拮抗、协同等联合作用 2、深入研究环境污染物在环境中的降解和转化产物及其引起的生物学变化 3、进一步研究致畸作用的机理，完善致突变作用的试验方法和致癌作用与致突变作用的确切关系 4、深入研究早期观察的敏感指标：环境污染物对动物神经功能、行为表现、免疫机能的影响往往出 现在一般毒性表现之前，有必要把这些影响作为早期观察的敏感指标，进行深入研究。 5、环境污染物化学结构与毒性作用的关系：环境污染物化学结构与毒性作用的性质和强度有密切关 系，应深入研究，找出规律，以便根据化学结构，作出毒性的估计，减少动物毒性试验，并为合成某些低 毒化合物提供依据。 6、吸收分子生物学的最新成就，使环境毒理学的研究由细胞水平研究提高到分子水平

第二章环境毒理学的基本原理 第一节环境有毒物的接触和暴露方式 概述 环境化学物对于生物体的毒害或风险取决于: 1、物质的性质 该物质在环境中的去向: 3、该物质在机体中的作用和行为 暴露( Exposure) 环境潜在有害物以任何方式与生物机体接触或进入机体。分定性和定量方面。 环境有害物从产生到危害发生的过程: 1、污染物的产生阶段 2、环境动力学阶段 3、暴露阶段 致毒动力学阶段( Toxicokinetic phase) 5、毒效阶段( Toxicodynamic phase 、暴露方式和途径 暴露方式:污染物接触生物机体的状态和方式 生物体在的环境(大气、土壤、水体) 污染物的物理状态(气、液、颗粒) 污染物的物理化学性质(水溶性、脂溶性); ●接触特点:单次、多次 2、暴露谂径: 通过肠胃道系统( Gastrointestinal tract)/经口 食物:天然毒素:有毒蛋白质、生物碱等 人为污染:生产、加工过程,如农药、重金属、药物、食品添加剂,NO3盐、色素 饮用水和天然水: ●通过呼吸道系统( Respiration tract) 大气污染物:气溶胶及其吸附的各种污染物、可吸入颗粒物、各种有害气体 ●皮肤接触吸收: 各种脂溶性化合物: 皮肤损伤。 ●其它途径 静脉注射 吸收速度: 静脉注射最快,其他一般依次为 呼吸道,腹腔注射,肌肉注射,经口,经皮 三、暴露水平的定量 1、确定暴露水平所需人体生理参数(EPA): 平均寿命:75岁; 平均体重:男70kg、女60kg;2-5岁儿童13.2kg、6岁儿童20.8kg 食物摄入量:1.5-kgFW/d 饮水量:14Ld:<10kg儿童Ld

第二章环境毒理学的基本原理 第一节 环境有毒物的接触和暴露方式 一、概述 环境化学物对于生物体的毒害或风险取决于： 1、物质的性质； 2、该物质在环境中的去向； 3、该物质在机体中的作用和行为。 暴露（Exposure)： 环境潜在有害物以任何方式与生物机体接触或进入机体。分定性和定量方面。 环境有害物从产生到危害发生的过程： 1、污染物的产生阶段 2、环境动力学阶段 3、暴露阶段 4、致毒动力学阶段（Toxicokinetic phase) 5、毒效阶段（Toxicodynamic phase） 二、暴露方式和途径 1、暴露方式：污染物接触生物机体的状态和方式 ⚫ 生物体在的环境（大气、土壤、水体）； ⚫ 污染物的物理状态（气、液、颗粒）； ⚫ 污染物的物理化学性质（水溶性、脂溶性）； ⚫ 接触特点：单次、多次 2、暴露途径： ⚫ 通过肠胃道系统（Gastrointestinal tract)/经口: 食物：天然毒素：有毒蛋白质、生物碱等 人为污染：生产、加工过程，如农药、重金属、药物、食品添加剂，NO3 -盐、色素 饮用水和天然水： ⚫ 通过呼吸道系统（Respiration tract) 大气污染物：气溶胶及其吸附的各种污染物、可吸入颗粒物、各种有害气体 ⚫ 皮肤接触吸收： 各种脂溶性化合物： 皮肤损伤。 ⚫ 其它途径： 静脉注射 吸收速度： 静脉注射最快，其他一般依次为 呼吸道，腹腔注射，肌肉注射，经口，经皮。 三、暴露水平的定量 1、确定暴露水平所需人体生理参数(EPA)： ⚫ 平均寿命：75岁； ⚫ 平均体重：男70kg、女60kg；2-5岁儿童13.2kg、6岁儿童20.8kg ⚫ 食物摄入量:1.5-2kg F.W/d； ⚫ 饮水量：1.4L/d；<10kg儿童1L/d

呼吸量:平均20m3d 外露体表面积:通常0.2m2,外露较多时0.52m2 2、暴露特征分析 暴露途径和方式 暴露起止时间 各种暴露途径有害物含量水平的分析、监测 暴露水平的监测方法 直接测定暴露源中有害物的浓度 测定机体中一个或多个组织中有毒物或其代谢产物的含量水平; →考虑毒物代谢动力学的影响! 体内负荷( Body burden):有毒物在体内的总量。如吸收速率>排泄速率→体内负荷增加 体内鬃露水平( nternal exposure):机体中敏感组织的实际暴露水平,目标组织中的浓度更重要 测定毒物引起的毒害效应的程度 4、露一效应的定量关系( Exposure-Response relationship) (1)有毒物的毒害效应取决于: 暴露程度( Exposure extent); 暴露时间( duration) 受害个体的敏感性( Sensitivity (2)暴露剂量决定受害程度: 有所表现( Noticeable) 可逆失调( Reversible disorder) 不可逆失调或致残( Disability) 死亡( Lethal) 对于高毒性有害物:瞬时浓度重要; 累积性毒物:长期平均浓度 (3)暴露效应关系曲线 第二节环境化学物质的吸收分布和排泄 一毒质动力学 有害物与机体接触后→吸收、分布、代谢和排泄过程 通过吸收进入血液→血液循环→分布到各组织、器官→代谢→有害物及其代谢产物→存储、排泄→ 生物转运过程 反复通过生物膜的过程 生物膜的结构与功能 结构:由脂质双分子层和蛋白质构成的半透性膜; ≯脂质双分子层:生物膜的基本骨架; ≯膜蛋白:载体、受体、能量转换器、酶→完成生物膜的主要功能。 功能:物质转运、能量和物质代谢、细胞识别、信息传递、毒性作用 保持细胞和细胞器内部理化性质的稳定 ◆选择性地允许或不允许某些物质透过,以便吸收和排出一些物质

⚫ 呼吸量：平均20 m3 /d ⚫外露体表面积：通常0.2m2，外露较多时0.52m2 2、暴露特征分析 ⚫ 暴露途径和方式； ⚫ 暴露起止时间； ⚫ 各种暴露途径有害物含量水平的分析、监测。 3、暴露水平的监测方法： ⚫ 直接测定暴露源中有害物的浓度； ⚫ 测定机体中一个或多个组织中有毒物或其代谢产物的含量水平； 考虑毒物代谢动力学的影响！ 体内负荷（Body burden): 有毒物在体内的总量。如吸收速率>排泄速率体内负荷增加 体内暴露水平（Internal exposure):机体中敏感组织的实际暴露水平，目标组织中的浓度更重要。 ⚫ 测定毒物引起的毒害效应的程度 4、暴露—效应的定量关系（Exposure-Response relationship) （1）有毒物的毒害效应取决于： ⚫ 暴露程度(Exposure extent)； ⚫ 暴露时间（duration)； ⚫ 受害个体的敏感性（Sensitivity） （2）暴露剂量决定受害程度： ⚫ 有所表现（Noticeable) ⚫ 可逆失调（Reversible disorder) ⚫ 不可逆失调或致残（Disability) ⚫ 死亡（Lethal) 对于高毒性有害物：瞬时浓度重要； 累积性毒物：长期平均浓度 （3）暴露-效应关系曲线 第二节 环境化学物质的吸收分布和排泄 ―毒质动力学 有害物与机体接触后吸收、分布、代谢和排泄过程； 通过吸收进入血液血液循环分布到各组织、器官代谢有害物及其代谢产物存储、排泄 生物转运过程。 反复通过生物膜的过程。 一、生物膜的结构与功能 结构：由脂质双分子层和蛋白质构成的半透性膜； ➢脂质双分子层：生物膜的基本骨架； ➢膜蛋白：载体、受体、能量转换器、酶完成生物膜的主要功能。 ？ 功能：物质转运、能量和物质代谢、细胞识别、信息传递、毒性作用 ◆保持细胞和细胞器内部理化性质的稳定; ◆选择性地允许或不允许某些物质透过，以便吸收和排出一些物质；

◆传递信息 ◆生物膜上的酶类(如混合功能氧化酶类等)还对化学物质的生物转化过程起催化作用 、化学物质通过生物膜的方式 0被动转运:扩散、滤过 O特殊转运:主动转运、易化扩散、吞噬作用和胞饮作用。 (一)被动转运 1.简单扩散( Passive transport) ◆定义:生物膜两侧的化学物分子从浓度高的一侧向浓度低的一侧(即顺浓度梯度)扩散 ●驱动力:浓度梯度 ●转运物质:多数环境化学物 ●转运速率(R) A(C1-C2) D K为扩散系数,A为膜面积,D为膜厚度。 ◆影响简单扩散的主要因素如下 (1)生物膜两侧化学物的浓度梯度 (2)脂/水分配系数 (3)化学物质的解离度和体液的pH 2.滤过( Filtration) 定义:滤过是环境化学物透过生物膜上的亲水性孔道的过程 驱动力:流体静压或渗透压 转运物质:分子直径<膜孔的化学物 生物膜上有一些亲水性孔道或间隙,它们是由嵌入脂质双分子层中的蛋白质结构中某些亲水性氨基酸构 成。如在膜的两侧存在着流体静压或渗透压差时,水就能携带小分子溶质经亲水性膜孔顺压差而透过生 物膜。凡分子直径小于膜孔的化学物,均可随同水流透过生物膜。 ·影响因素 ≯膜孔大小:一般0.4nm:肾小球毛细血管内皮细胞7-10nm M<100-200的化合物可通过04nm孔,如Pb、Mn、Cd盐 肾小球滤过:除蛋白质外,其余溶于血浆中的物质均可滤过 (二)特殊转运 对于某些非脂溶性的、分子量较大的环境化学物,不能通过上述方式转运,需通过生物膜上的特殊 转运系统转运 1.主动转运( active transport) 定义:化学物伴随能量的消耗由低浓度处向高浓度处转运以透过生物膜的过程称主动转运 ●驱动力:代谢能量 ●特点 需要有载体(或称运转系统)参加: ≯化学物质可逆浓度梯度转运,故需消耗一定的代谢能量,因此代谢抑制剂可阻止此转运过程

◆传递信息; ◆生物膜上的酶类（如混合功能氧化酶类等）还对化学物质的生物转化过程起催化作用。 二、化学物质通过生物膜的方式 Ø 被动转运：扩散、滤过； Ø 特殊转运：主动转运、易化扩散、吞噬作用和胞饮作用。 （一）被动转运 1．简单扩散（Passive transport） ◆ 定义：生物膜两侧的化学物分子从浓度高的一侧向浓度低的一侧（即顺浓度梯度）扩散。 ⚫驱动力：浓度梯度 ⚫转运物质：多数环境化学物 ⚫转运速率（R）： K 为扩散系数， A 为膜面积，D 为膜厚度。 ◆ 影响简单扩散的主要因素如下： （1）生物膜两侧化学物的浓度梯度 （2）脂/水分配系数 （3）化学物质的解离度和体液的pH 2．滤过(Fiilltratiion) • 定义：滤过是环境化学物透过生物膜上的亲水性孔道的过程。 • 驱动力：流体静压或渗透压； • 转运物质：分子直径<膜孔的化学物 • 生物膜上有一些亲水性孔道或间隙，它们是由嵌入脂质双分子层中的蛋白质结构中某些亲水性氨基酸构 成。如在膜的两侧存在着流体静压或渗透压差时，水就能携带小分子溶质经亲水性膜孔顺压差而透过生 物膜。凡分子直径小于膜孔的化学物，均可随同水流透过生物膜。 • 影响因素： ➢膜孔大小：一般 0.4nm；肾小球毛细血管内皮细胞 7-10nm ➢M<100-200 的化合物可通过 0.4nm 孔，如 Pb、Mn、Cd 盐； ➢肾小球滤过：除蛋白质外，其余溶于血浆中的物质均可滤过 （二）特殊转运 对于某些非脂溶性的、分子量较大的环境化学物，不能通过上述方式转运，需通过生物膜上的特殊 转运系统转运。 1．主动转运(actiive transport) 定义：化学物伴随能量的消耗由低浓度处向高浓度处转运以透过生物膜的过程称主动转运。 ⚫驱动力：代谢能量 ⚫特点： ➢需要有载体（或称运转系统）参加； ➢化学物质可逆浓度梯度转运，故需消耗一定的代谢能量，因此代谢抑制剂可阻止此转运过程； D A C C R K ( ) 1 − 2 =