第十二章免调凋节与免度遗传(自学)○ 第十三章免疫血清学技术O 第一节概念 第二节凝聚性反应 第三节标记抗体技术 第四节补体参与的试验 第五节中和试验 课件002 兽医微生物学教学课件口一
课件002 兽医微生物学教学课件 5 第十二章 免疫调节与免疫遗传（自学） 第十三章 免疫血清学技术 第一节 概念 第二节 凝聚性反应 第三节 标记抗体技术 第四节 补体参与的试验 第五节 中和试验
抗原与相应抗体在体内和体外均能发生特异性 结合,因抗体主要来自血清,因此在体外迸行的抗 原抗体反应称为血清学反应或免疫血清学技术。 第一节概述 免疫血清学技术按抗原抗体反应性质不同可分为 1.凝聚性反应包括凝集试验和沉淀试验。 2.标记抗体技术包括荧光抗体、酶标抗体、放射 性标记抗体、发光标记抗体技术等 3.补体参与的反应补体结合试验、免疫黏附试验 等。 课件002 兽医微生物学教学课件口
课件002 兽医微生物学教学课件 6 抗原与相应抗体在体内和体外均能发生特异性 结合，因抗体主要来自血清，因此在体外进行的抗 原抗体反应称为血清学反应或免疫血清学技术。 第一节 概 述 免疫血清学技术按抗原抗体反应性质不同可分为： 1. 凝聚性反应 包括凝集试验和沉淀试验。 2. 标记抗体技术 包括荧光抗体、酶标抗体、放射 性标记抗体、发光标记抗体技术等。 3. 补体参与的反应 补体结合试验、免疫黏附试验 等
4.中和反应病赛中和试验、毒素中和试验。 血清学反应的一般特点 1.特异性与交叉性血清学反应具有高度特异性,如 抗猪瘟病毒的抗体只能与猪瘟病骞结合,而不能与 口蹄疫病毒结台。这是血清学试验用于分析各种抗 原和进行疾病诊断的基础。 但若两种天然抗原之间含有部分共同抗原时,则 发生交叉反应。交叉反应是区分血清型和亚型的重 要依据。 课件002 兽医微生物学教学课件口
课件002 兽医微生物学教学课件 7 4. 中和反应 病毒中和试验、毒素中和试验。 一、血清学反应的一般特点 1. 特异性与交叉性 血清学反应具有高度特异性，如 抗猪瘟病毒的抗体只能与猪瘟病毒结合，而不能与 口蹄疫病毒结合。这是血清学试验用于分析各种抗 原和进行疾病诊断的基础。 但若两种天然抗原之间含有部分共同抗原时，则 发生交叉反应。交叉反应是区分血清型和亚型的重 要依据
2.抗原抗体结台机理抗原和抗体的结合为弱能非 其价键结台,其结合力决定于抗原决定簇和抗体的 抗原结合点之间形成的非共价键的数量、性质和距 常规的血清学反应,如凝集反应、沉淀反应、补 体结合反应等,只有在抗原与抗体呈适当比例时, 结合反应才出现瞬集,沉淀等可见反应,在最适比 例时,反应最明显。 这种因抗原过多或抗体过多而出现抑制可见反 应的现象,称为带现象(图13-1-166)。 课件002 兽医微生物学教学课件
课件002 兽医微生物学教学课件 8 2. 抗原抗体结合机理 抗原和抗体的结合为弱能非 共价键结合，其结合力决定于抗原决定簇和抗体的 抗原结合点之间形成的非共价键的数量、性质和距 离。 常规的血清学反应，如凝集反应、沉淀反应、补 体结合反应等，只有在抗原与抗体呈适当比例时， 结合反应才出现凝集，沉淀等可见反应，在最适比 例时，反应最明显。 这种因抗原过多或抗体过多而出现抑制可见反 应的现象，称为带现象（图13-1-166）
血清学反应的影响因素 1,电解质特异性的抗原和抗体具有对应的极性基 基、氨基等),它们互相吸附后,其电荷和极性被中 和因而失去亲水性,变为憎水系统。 易受电解质作用失去电荷而互相凝聚、发生凝集或 沉淀反应。 2温度较高的温度可以增加抗原和抗体接触的机会 从而加速反应的出现。常用37℃水浴保温。 3酸碱度血清学反应常用pH为6-8,过高或过低的 pH可使抗原抗体复合物重新离解。 课件002 兽医微生物学教学课件口
课件002 兽医微生物学教学课件 9 二、血清学反应的影响因素 1.电解质 特异性的抗原和抗体具有对应的极性基(羧 基、氨基等)，它们互相吸附后，其电荷和极性被中 和因而失去亲水性，变为憎水系统。 易受电解质作用失去电荷而互相凝聚、发生凝集或 沉淀反应。 2.温度 较高的温度可以增加抗原和抗体接触的机会， 从而加速反应的出现。常用37℃水浴保温。 3.酸碱度 血清学反应常用pH为6-8，过高或过低的 pH可使抗原抗体复合物重新离解
第二节凝聚性试验 抗原与相应抗体结合形成复合物,在有电解质存 在下,复合物相互凝聚形成肉眼可见的凝聚小块或 沉淀物,根据此现象来测定相应抗体或抗原,称为 原聚性试验。分为原集试验和沉淀试验。 原集试验 细菌、红细胞等颗粒性抗原,与相应抗体结合, 在有适当电解质存在下,形成内眼可见的凝集团块, 称为凝集试验。参与的抗体主要为IgG、IM。凝 集试验可用于检测抗原或抗体,优点是操作简便。 课件002 兽医微生物学教学课件
课件002 兽医微生物学教学课件 10 第二节 凝聚性试验 抗原与相应抗体结合形成复合物，在有电解质存 在下，复合物相互凝聚形成肉眼可见的凝聚小块或 沉淀物，根据此现象来测定相应抗体或抗原，称为 凝聚性试验。分为凝集试验和沉淀试验。 一、凝集试验 细菌、红细胞等颗粒性抗原，与相应抗体结合， 在有适当电解质存在下，形成肉眼可见的凝集团块， 称为凝集试验。参与的抗体主要为IgG、IgM。凝 集试验可用于检测抗原或抗体，优点是操作简便
根据抗原的性质分为直接凝集试验和间接凝集试验。 1.直接凝集试验颗粒性抗原与凝集素直接结合并出现 原集现象的试验称作直接凝集试验。按操作方法可分 玻片法和试管去两种。 (1)玻片法为一种定性试验。将含有已知抗体的诊 断血清与待检抗原悬液在玻片上混合,数分钟后,如 出现颗粒状或絮状凝集,即为阳性反应。 此法简便快速,适用于新分细菌的鉴定或分型。如 沙门氏菌的鉴定。也可用已知的诊断抗原,检测待检 血清中的相应抗体,如布氏杆菌、鸡白痢全血平板凝 集试验。 兽医微生物学教学课件如一
课件002 兽医微生物学教学课件 11 根据抗原的性质分为直接凝集试验和间接凝集试验。 1.直接凝集试验 颗粒性抗原与凝集素直接结合并出现 凝集现象的试验称作直接凝集试验。按操作方法可分 玻片法和试管法两种。 （1）玻片法 为一种定性试验。将含有已知抗体的诊 断血清与待检抗原悬液在玻片上混合，数分钟后，如 出现颗粒状或絮状凝集，即为阳性反应。 此法简便快速，适用于新分细菌的鉴定或分型。如 沙门氏菌的鉴定。也可用已知的诊断抗原，检测待检 血清中的相应抗体，如布氏杆菌、鸡白痢全血平板凝 集试验
(2)试管法为一种定量试验,用以检测血清抗体 含量。 将待检血清用生理盐水作倍比稀释,然后加入等 量抗原,置37℃水浴数小时观察。视不同凝集程度 记录为++(100%凝集)+++(75%凝集)++(50 %凝集)+(25%凝集)和-(不凝集)。以其++以上的 血清最大稀释度为该血清的凝集价(或称滴度) 试验时必须设置阳性血清、阴性血清和生理盐水 等对照。 课件002 兽医微生物学教学课件口
课件002 兽医微生物学教学课件 12 （2）试管法 为一种定量试验，用以检测血清抗体 含量。 将待检血清用生理盐水作倍比稀释，然后加入等 量抗原，置37℃水浴数小时观察。视不同凝集程度 记录为++++(100％凝集)、+++(75％凝集)、++(50 ％凝集)、+(25％凝集)和-(不凝集)。以其++以上的 血清最大稀释度为该血清的凝集价(或称滴度)。 试验时必须设置阳性血清、阴性血清和生理盐水 等对照
2间接集试验将可溶性抗原(或抗体)吸附不溶性 颗粒载体的表面,与相应抗体(或抗原作用,在电解 质存在条件下,出现的特异性的凝集反应称为间接 原集反应。 优点敏感性高,比直接凝集反应敏感2-8倍。 常用载体红细胞(绵羊红细胞)、胶乳颗粒等。当 载体吸附了可溶性抗原后即称为致敏颗粒。 间接血试验是将可溶性抗原致敏于红细跑表面 用以检测相应抗体。 反向间接血凝试验如将抗体致敏于红细胞表面, 用%静测检样中相应教学课什如→一
课件002 兽医微生物学教学课件 13 2.间接凝集试验 将可溶性抗原(或抗体) 吸附不溶性 颗粒载体的表面，与相应抗体(或抗原)作用，在电解 质存在条件下，出现的特异性的凝集反应称为间接 凝集反应。 优点 敏感性高，比直接凝集反应敏感2-8倍。 常用载体 红细胞(绵羊红细胞)、胶乳颗粒等。当 载体吸附了可溶性抗原后即称为致敏颗粒。 间接血凝试验 是将可溶性抗原致敏于红细胞表面， 用以检测相应抗体。 反向间接血凝试验 如将抗体致敏于红细胞表面， 用以检测检样中相应抗原
3乳胶凝集试验LAT)用它胶乳微球(直径约 08um)作载体吸附某些抗原或抗体),可用以检 测相应的抗体(或抗原 优点快速简便、易保存、较准确等。 4同凝集试验(COAG)葡萄球菌A蛋白SPA)能 与多种动物IG分子的F片结合,结合后保持其 抗体活性,当与相应的抗原结合时,就可产生凝 集反应。本法广泛应用于多种细菌和某些病毒的 快速诊断。 课件002 兽医微生物学教学课件口
课件002 兽医微生物学教学课件 14 3.乳胶凝集试验(LAT) 用它胶乳微球（直径约 0.8um）作载体吸附某些抗原(或抗体)，可用以检 测相应的抗体(或抗原)。 优点 快速简便、易保存、较准确等。 4.协同凝集试验(COAG) 葡萄球菌A蛋白(SPA) 能 与多种动物IgG分子的Fc片结合，结合后保持其 抗体活性，当与相应的抗原结合时，就可产生凝 集反应。本法广泛应用于多种细菌和某些病毒的 快速诊断