目 务 实哈须知*+.*.**. 第一部分农药的基本知识. 实验一 波尔多液的西配活制***+.2 实验二 石硫合剂的配制 第二部分农药室内生物测定技术. 实验三孢子萌发试验法 实验四抑制菌圈法6 实验五 生长速率测定法 .8 实验六抑制菌丝产生孢子囊及释放游动孢子试验.10 实验七杀菌剂保护作用和治疗作用的测定(离体叶片法) .0 实验八新杀菌剂防治橡胶炭疽病的田间药效试验.13 实验九 杀虫剂触杀作用毒力测定.6 实验十杀虫剂离蒸作用的测定.*.17 实验十 杀虫剂胃毒作用毒力测定.8 实验十一 杀电剂内吸作用的测定.21 实验十三 有机磷杀虫剂对胆碱酯酶活性的抑制: 22 实验十四 杀虫剂对螨类的毒力测定. *25 实验十五 杀虫剂对植物的药害试验(植株施药法). 26 实验十六 杀虫剂的田间药效试验 .28 实验十七 几种有机农药的鉴定方法. .28 第三部分农药田间药效试验. 。 参考文献 录
目 录 实验须知.1 第一部分 农药的基本知识. 实验一 波尔多液的配制.2 实验二 石硫合剂的配制.3 第二部分 农药室内生物测定技术. 实验三 孢子萌发试验法.4 实验四 抑制菌圈法.6 实验五 生长速率测定法.8 实验六 抑制菌丝产生孢子囊及释放游动孢子试验.10 实验七 杀菌剂保护作用和治疗作用的测定(离体叶片法).10 实验八 新杀菌剂防治橡胶炭疽病的田间药效试验.13 实验九 杀虫剂触杀作用毒力测定.16 实验十 杀虫剂熏蒸作用的测定.17 实验十一 杀虫剂胃毒作用毒力测定.18 实验十二 杀虫剂内吸作用的测定.21 实验十三 有机磷杀虫剂对胆碱酯酶活性的抑制.22 实验十四 杀虫剂对螨类的毒力测定.25 实验十五 杀虫剂对植物的药害试验(植株施药法).26 实验十六 杀虫剂的田间药效试验—.28 实验十七 几种有机农药的鉴定方法.28 第三部分 农药田间药效试验. 参考文献. 附 录
实验须知 本实验课程是以化学、植物病理学、昆虫学、杂草学、生物统计学等学科为 基础,以昆虫、病菌、杂草、农药等为研究对象,是一门试验性很强的课程。本书主 要以《农药学》、《植物化学保护》为理论基础,是植物保护专业的必修课程。学生在 实验中必须努力培养自己的独立工作能力,掌握基本操作技术,通过实验加深对理论 的理解,并运用所学到的基本理论和基本技能为我国农业现代化服务。 凡参加实验的学生必须严格遵守下列规则: 1、 凡参加实验的学生必须严格遵守《学生实验手册》。 2、 实验前,学生必须预习实验指导书及相关专业教材,了解每次实验的原理 实验方法和具体操作步骤。 3、 学生在实验时应该独立思考,认真操作,不许大声喧哗 4、 要爱护仪器,节省药品、试剂等。 5、 损坏仪器设备,必须登记,并按照情节轻重的情赔偿。 6 实验室内不准放置食物、吃东西或吸烟。 7、 实验中要注意安全。农药对高等动物均有毒性,许多试剂也有一定的毒性。 且未经允许不准任意携出实验室外,用过的废物一律倒入指定的缸内,不准随便乱丢。 实验中,如发现药物中毒现象席报告教师,以便急救。 8、按时完成实验报告。实验完成后,按教师要求48或72小时来检查结果, 按时交实验报告,实验成绩以5分制计
实验须知 本实验课程是以化学、植物病理学、昆虫学、杂草学、生物统计学等学科为 基础,以昆虫、病菌、杂草、农药等为研究对象,是一门试验性很强的课程。本书主 要以《农药学》、《植物化学保护》为理论基础,是植物保护专业的必修课程。学生在 实验中必须努力培养自己的独立工作能力,掌握基本操作技术,通过实验加深对理论 的理解,并运用所学到的基本理论和基本技能为我国农业现代化服务。 凡参加实验的学生必须严格遵守下列规则: 1、 凡参加实验的学生必须严格遵守《学生实验手册》。 2、 实验前,学生必须预习实验指导书及相关专业教材,了解每次实验的原理、 实验方法和具体操作步骤。 3、 学生在实验时应该独立思考,认真操作,不许大声喧哗。 4、 要爱护仪器,节省药品、试剂等。 5、 损坏仪器设备,必须登记,并按照情节轻重酌情赔偿。 6、 实验室内不准放置食物、吃东西或吸烟。 7、 实验中要注意安全。农药对高等动物均有毒性,许多试剂也有—定的毒性。 且未经允许不准任意携出实验室外,用过的废物一律倒入指定的缸内,不准随便乱丢。 实验中,如发现药物中毒现象席报告教师,以便急救。 8、 按时完成实验报告。实验完成后,按教师要求 48 或 72 小时来检查结果, 按时交实验报告,实验成绩以 5 分制计
实验四常见农药质量的简易鉴别 [实验目的]:掌握常见农药质量的荷易鉴别方法。 [实验器材]:量筒、烧杯、移液管、滴管、药勺 [实验药品]:敌敌畏EC、乐果EC、马拉硫磷EC、功夫EC、保得EC、乙草胺EC、百菌清WP、 多茵灵即、硫磺粉、特克多悬浮剂等 [鉴别方法]: 一、粉剂的鉴别 1、外观粉剂的外观应为疏松的细粉、无团块。凡是流动性差,结成快状物,或手捏成团, 不易散开,说明这些粉剂大多是存放时间过长或存放不当,造成减效或者失效 2、吸湿性取药粉前,先查看粉剂包装袋外面有没有潮湿的情况,如果有,是吸湿性大的 表现。然后从袋里取出一点药粉倒在一张白纸上,拿起白纸,用拇指和食指在纸外面捏一下,如 果粘成一片,表明这种药粉已吸潮:如果仍旧是松散的细粉,表明是好的喷粉药剂。 3、悬浮法取1g农药加入到100ml水中,搅拌10min后,静置片刻,然后慢慢倒去上层 90%左右的溶液,将剩下的溶液用己知重量的滤纸过滤,再将纸和沉淀物晒干或烘干,称其重量, 求出悬浮率。 是浮率(%)=(样品重.沉淀物重)样品重*100 悬浮率在30%以上为良好,证明可以使用。 二、可湿性粉剂的鉴别 !、外观可湿性粉剂应为很细的疏松粉末,无团块。 2、湿润法称取被检验的农药样品1g,轻轻撒在200ml水面上,如果在1min内农药能够 全部分散进入水中,即为有效农药。如果长时间不能润湿而漂浮在水面上,则证明农药己经失效。 3、悬浮法取清水1杯,加入1g被检验的农药样品,充分摇匀,静置2030min,观察药品 悬浮情况。未变质农药,粉粒极细,沉淀慢而少,整个药液浊而不清:如果杯中少部分水清澈, 大部分浑浊,则还可使用:如果样品沉淀快,而杯中大部分药液呈现半透明状,则不能使用。 4、沉淀法取5g药剂,倒入杯中,加入少量水,调成糊状,再加水搅拌,未变质的农药粉 粒细,悬浮性好,沉淀慢而少,已变质农药悬浮性不好,沉淀快而多。 三、乳油的鉴别 1、振荡法首先看清瓶子内有无分层现象,如有分层现象,说明乳化性能己经降低,可用 力振荡均匀,静置一小时,如果仍然分层,说明农药已经变质。 2、兑水法取清水200ml放在玻璃瓶中,轻轻加入1ml待检验的乳油农药,乳化性能好的 呈放射状向四周扩散,静置后,水面无浮油,水底无沉淀,呈乳白色液体,且均匀一致,则为正 常乳油。如果表面有乳油或瓶底有沉淀,则说明药剂已变质。 3、加热法先把有沉淀的乳剂农药,连瓶放在5055C的热水中,水浴1h后,沉淀能慢慢 溶解,溶液均匀一致,药效一般不减,表明农药可以使用:如果农药的沉淀物不溶解,则表明农 药己经变质失效。 四、悬浮剂的鉴别 悬浮剂应为略带粘稠的、可流动的悬浮液,其粘度非常小,均匀。若因长时间存放出现分层, 经手摇动可恢复均匀状态的,仍可视为合格产品。如果不能重新变成均匀的悬浮液,底部沉淀物
实验四 常见农药质量的简易鉴别 [实验目的]:掌握常见农药质量的简易鉴别方法。 [实验器材]:量筒、烧杯、移液管、滴管、药勺。 [实验药品]:敌敌畏 EC、乐果 EC、马拉硫磷 EC、功夫 EC、保得 EC、乙草胺 EC、百菌清 WP、 多菌灵 WP、硫磺粉、特克多悬浮剂等 [鉴别方法]: 一、粉剂的鉴别 1、 外观 粉剂的外观应为疏松的细粉、无团块。凡是流动性差,结成快状物,或手捏成团, 不易散开,说明这些粉剂大多是存放时间过长或存放不当,造成减效或者失效。 2、 吸湿性 取药粉前,先查看粉剂包装袋外面有没有潮湿的情况,如果有,是吸湿性大的 表现。然后从袋里取出一点药粉倒在一张白纸上,拿起白纸,用拇指和食指在纸外面捏一下,如 果粘成一片,表明这种药粉已吸潮;如果仍旧是松散的细粉,表明是好的喷粉药剂。 3、 悬浮法 取 1g 农药加入到 100ml 水中,搅拌 10min 后,静置片刻,然后慢慢倒去上层 90%左右的溶液,将剩下的溶液用已知重量的滤纸过滤,再将纸和沉淀物晒干或烘干,称其重量, 求出悬浮率。 悬浮率(%)=(样品重-沉淀物重)/样品重*100 悬浮率在 30%以上为良好,证明可以使用。 二、可湿性粉剂的鉴别 1、 外观 可湿性粉剂应为很细的疏松粉末,无团块。 2、 湿润法 称取被检验的农药样品 1g,轻轻撒在 200ml 水面上,如果在 1min 内农药能够 全部分散进入水中,即为有效农药。如果长时间不能润湿而漂浮在水面上,则证明农药已经失效。 3、 悬浮法 取清水 1 杯,加入 1g 被检验的农药样品,充分摇匀,静置 20-30min,观察药品 悬浮情况。未变质农药,粉粒极细,沉淀慢而少,整个药液浊而不清;如果杯中少部分水清澈, 大部分浑浊,则还可使用;如果样品沉淀快,而杯中大部分药液呈现半透明状,则不能使用。 4、 沉淀法 取 5g 药剂,倒入杯中,加入少量水,调成糊状,再加水搅拌,未变质的农药粉 粒细,悬浮性好,沉淀慢而少,已变质农药悬浮性不好,沉淀快而多。 三、乳油的鉴别 1、 振荡法 首先看清瓶子内有无分层现象,如有分层现象,说明乳化性能已经降低,可用 力振荡均匀,静置一小时,如果仍然分层,说明农药已经变质。 2、 兑水法 取清水 200ml 放在玻璃瓶中,轻轻加入 1ml 待检验的乳油农药,乳化性能好的 呈放射状向四周扩散,静置后,水面无浮油,水底无沉淀,呈乳白色液体,且均匀一致,则为正 常乳油。如果表面有乳油或瓶底有沉淀,则说明药剂已变质。 3、 加热法 先把有沉淀的乳剂农药,连瓶放在 50-55℃的热水中,水浴 1h 后,沉淀能慢慢 溶解,溶液均匀一致,药效一般不减,表明农药可以使用;如果农药的沉淀物不溶解,则表明农 药已经变质失效。 四、悬浮剂的鉴别 悬浮剂应为略带粘稠的、可流动的悬浮液,其粘度非常小,均匀。若因长时间存放出现分层, 经手摇动可恢复均匀状态的,仍可视为合格产品。如果不能重新变成均匀的悬浮液,底部沉淀物
摇不起来,悬浮性能就不好。 上述各种方法可简便地鉴别各农药剂型是否变质失效,如要进一步了解各农药制剂的真 实含量(有效成份)则需将样品送到农药专门研究机构或农药检测机构进行分析鉴定。 此外,用上述简易法鉴别农药的时候,千万注意农药的毒性,不要把农药养到手上,如果弄 到手上或皮肤上,要立即用水冲洗,对于粉剂农药,先用水冲洗后,再用肥皂洗净,对于乳油农 药要特别小心,赶快用清水冲洗,再用碱水洗,最后用肥皂洗净。如果碰到农药,不久后感觉恶 心,要及时去医院请医生检查。盛过农药的器具要妥善处理,不要再做其他用途。 五、实验作业 按要求完成老师布置的农药鉴别任务,记录实验过程中所观察的现象。判断哪些剂型是合格 的
摇不起来,悬浮性能就不好。 上述各种方法可简便地鉴别各农药剂型是否变质失效,如要进一步了解各农药制剂的真 实含量(有效成份)则需将样品送到农药专门研究机构或农药检测机构进行分析鉴定。 此外,用上述简易法鉴别农药的时候,千万注意农药的毒性,不要把农药弄到手上,如果弄 到手上或皮肤上,要立即用水冲洗,对于粉剂农药,先用水冲洗后,再用肥皂洗净,对于乳油农 药要特别小心,赶快用清水冲洗,再用碱水洗,最后用肥皂洗净。如果碰到农药,不久后感觉恶 心,要及时去医院请医生检查。盛过农药的器具要妥善处理,不要再做其他用途。 五、实验作业 按要求完成老师布置的农药鉴别任务,记录实验过程中所观察的现象。判断哪些剂型是合格 的
第二部分杀虫剂生物测定 实验六杀虫剂触杀作用(contact action)毒力测定 基本原理是将一定浓度(或剂量)的杀虫剂施于虫体的全部或局部(合适部位),使其虫 体充分接触药剂而发挥触杀作用。根据试虫及药剂剂特点,己被公认而普通应用的方法有:(1) 喷雾法及喷粉法:(2)点滴法:(3)浸渍法:(4)药膜法等。 一、喷粉及喷雾法 测试方法:将盛有目标昆虫的喷射盒,喷射笼或垫 有湿滤纸的培养皿,置于液体喷布器底部或喷粉罩底盘 上,定量的药液或粉剂均匀地直接喷撒到目标昆虫体 上,待药液稍干或虫体粘粉较稳定后,将喷过药的目标 昆虫移入干净的容器内或培养皿内,用通气盖盖好,置 于适合于目标昆虫生育的温湿度及通气良好的环境中 恢复,1-2h后,放入无药的新鲜饲料,在规定时间内(12 喷雾 24、48h),观察日标昆虫中毒和死亡情况。常见装置有 pottert喷雾器 Potter喷雾器,真空喷粉器等。 1.通气管,2.药液管 一、点滴法, 基本原理]:将一定量的药液点滴到供试目标昆虫 体壁的一定部位,来测定杀虫剂穿透表皮而引起昆虫中毒致死的触杀毒力。每个试虫的某一部位 都接受相同容积的药液,因而同一处理的每个试虫实际接受的剂量相同。此法是杀虫剂触杀毒力 测定中最准确的方法。也是目前普遍采用的一种测试技术。 [试虫范围:除了螨类等小型昆虫外,可应用于大多数目标昆虫的触杀毒力测定,如蚜虫、叶 蜂、二化螟、玉米螟、菜青虫、粘虫等。 [实验材料]:微量注射1支、培养皿15cm6个、剪刀1把、棉花、蜡笔等、无水乙醚 [供试药剂]:95%敌百虫结晶 [使用浓度]:10:2.5:0.625:0.156:0.039ug/ml丙酮液 [供试方法]:荔枝蝽蟓成虫,24头 [实验方法]:用无水乙醇将试虫麻醉4mi,使试虫处于麻醉状态,每头虫称重,并放在培养 皿中编号(培养皿用厚纸皮十字交叉格开,每皿放4头),然后用微量注射器吸丙酮药液点滴于试 虫触角上,5微升/头虫,(从低一高,对照用丙酮),4头虫/浓度,自然干燥后,经1小时10mi, 观察每头的死活情况(用真实死亡表示)或正常饲养24小时后观察实际死亡情况。 结果的计算:先按ug/g体重大小顺序排列(5个小组合并计算)然后区分: 生存 致毒反应 中月生存部分 死亡死亡部分 ∑仲间组活虫剂量) ∑仲间组死活虫剂量) A=中间组活虫总数 =中间组活中总数 LD=(A+B)2(单位:mg/g体重或ug/g体重)
第二部分 杀虫剂生物测定 实验六 杀虫剂触杀作用(contact action)毒力测定 基本原理是将一定浓度(或剂量)的杀虫剂施于虫体的全部或局部(合适部位),使其虫 体充分接触药剂而发挥触杀作用。根据试虫及药剂剂特点,已被公认而普通应用的方法有:(1) 喷雾法及喷粉法;(2)点滴法;(3)浸渍法;(4)药膜法等。 一、喷粉及喷雾法 测试方法:将盛有目标昆虫的喷射盒,喷射笼或垫 有湿滤纸的培养皿,置于液体喷布器底部或喷粉罩底盘 上,定量的药液或粉剂均匀地直接喷撒到目标昆虫体 上,待药液稍干或虫体粘粉较稳定后,将喷过药的目标 昆虫移入干净的容器内或培养皿内,用通气盖盖好,置 于适合于目标昆虫生育的温湿度及通气良好的环境中 恢复,1-2h 后,放入无药的新鲜饲料,在规定时间内(12、 24、48h),观察目标昆虫中毒和死亡情况。常见装置有 Potter 喷雾器,真空喷粉器等。 二、点滴法: [基本原理]:将一定量的药液点滴到供试目标昆虫 体壁的一定部位,来测定杀虫剂穿透表皮而引起昆虫中毒致死的触杀毒力。每个试虫的某一部位 都接受相同容积的药液,因而同一处理的每个试虫实际接受的剂量相同。此法是杀虫剂触杀毒力 测定中最准确的方法。也是目前普遍采用的一种测试技术。 [试虫范围]:除了螨类等小型昆虫外,可应用于大多数目标昆虫的触杀毒力测定,如蚜虫、叶 蜂、二化螟、玉米螟、菜青虫、粘虫等。 [实验材料]:微量注射 1 支、培养皿 15cm6 个、剪刀 1 把、棉花、蜡笔等、无水乙醚 [供试药剂];95%敌百虫结晶 [使用浓度]:10;2.5;0.625;0.156;0.039ug/μl 丙酮液 [供试方法]:荔枝蝽蟓成虫,24 头 [实验方法]:用无水乙醇将试虫麻醉 4min,使试虫处于麻醉状态,每头虫称重,并放在培养 皿中编号(培养皿用厚纸皮十字交叉格开,每皿放 4 头),然后用微量注射器吸丙酮药液点滴于试 虫触角上,5 微升/头虫,(从低→高,对照用丙酮),4 头虫/浓度,自然干燥后,经 1 小时 10min, 观察每头的死活情况(用真实死亡表示)或正常饲养 24 小时后观察实际死亡情况。 结果的计算:先按 ug/g 体重大小顺序排列(5 个小组合并计算)然后区分: 生存组 致毒反应 中间组 死亡组 A= ( ) 中间组活虫总数 中间组活虫剂量 B= ( ) 中间组活中总数 中间组死活虫剂量 LD50=(A+B)/2(单位:mg/g 体重或 ug/g 体重) 生存部分 死亡部分
三、浸渍法(immersion methord). 沒渍法是一一种测定杀虫药剂触杀毒力的室内测试技术。因方法简单快速,不需要特殊仪器设 备,常用于有效化合物的筛选试验,被联合国食农组织(FO)推荐为蚜虫抗药性的标准测定方 法。 基本原理:用浸沾方法直接将供试杀虫剂施于昆虫体表,测定药液穿透表皮引起昆虫中毒致 死的触杀毒力。 测试方法:①将试虫(如粘虫、家蚕)直接没入药液中,或将试虫放在钢纱笼中,再浸渍 ②将试虫(如蚜虫)放入附有铜网底的指形管中(直径2.5cm,长3cm)然后浸入药液中:③蚜虫、 红蜘蛛以及介壳虫等,可以连同植物寄主一起没入药液。红蜘蛛有吐丝成球现象,药液不易均匀 沾湿体表影响结果。可先将带有红蜘蛛的叶片置于豆苗(3一5cm高)上,待叶片枯菱时,红蜘蛛 自行迁移至豆叶片,然后进行浸液。浸液一定时间后取出晾干,或用吸水纸吸去多余药液,再移 入干净器皿中(大型昆虫,如粘虫、家蚕等需放入新鲜饲料),置于合适的温湿度及通气良好的环 境中,隔一定时间(12h,24h、48h)观察记载死亡情况,计算死亡率(或校正死亡率)求得致死 中浓度。幼虫,对杀虫剂较敏感,常用此法进行大量化合物初筛,或用来进行杀虫剂残留量的生 物分析。 四、药膜法: 基本原理:将一定量的杀虫药剂,采用浸沾、点滴、喷酒等方法施于物体表面上,形成一个 均匀的药膜,然后放入一定量的供试目标昆虫,让其爬行接触一定时间后,再移至正常的环境条 件下,在规定时间内观察试虫的中毒死亡反应,计算击倒率或死亡率。亦可让试虫和药膜长时间 接触而观察试虫的击倒时间、直到全部试虫被击倒,求出击倒率,比较毒力。还可将形成的药膜」 放置不同时间,经受光照、雨淋等处理,然后再让试虫接触,这样可测得残效结果。制做药膜的 方法有蜡膜法,波纸药膜法及玻璃药草法。 4.1、蜡纸药膜法: 实验材料: 药剂:6%六六六粉,用滑石粉稀释成所需浓度。 试虫:赤拟谷盗或粘虫幼虫 用具:培养皿l9cml5个,蜡纸中cm30片 方法:将6%六六六粉剂用滑石粉稀释成3%,1.5%,0.7%,0.38%六六六粉,各称取100mg倒 在蜡纸正面中央,两手执边使药粉在中间移动数次,均匀分布在蜡纸上,然后将多余药粉倒回原 处,再轻轻地弹动背面2~3下,即成蜡纸药膜,对照用滑石粉制药膜,每处理重复三次,取试虫 20~30头同时放在药膜上,用培养皿盖好,(培养皿盖也放一张蜡纸药膜),待虫爬行一定时间(30~ 60min)后,观察击倒数,计算平均击倒率。 4.2、滤纸药膜法: 实验材料: 药剂:50%杀螟松乳油用丙酮稀释成800:400:200:100:50ppm 试虫:风图木夜蛾 用具:培养皿9cm18个,量筒、移液管、三角瓶、大头针、滤纸(中9cm) 方法:取1张直径9Cm的滤纸,插在报纸上的三支大头针上,不使其接触物体平面,吸
三、浸渍法(immersion methord) 浸渍法是一种测定杀虫药剂触杀毒力的室内测试技术。因方法简单快速,不需要特殊仪器设 备,常用于有效化合物的筛选试验,被联合国食农组织(FAO)推荐为蚜虫抗药性的标准测定方 法。 基本原理:用浸沾方法直接将供试杀虫剂施于昆虫体表,测定药液穿透表皮引起昆虫中毒致 死的触杀毒力。 测试方法:①将试虫(如粘虫、家蚕)直接浸入药液中,或将试虫放在钢纱笼中,再浸渍; ②将试虫(如蚜虫)放入附有铜网底的指形管中(直径 2.5cm,长 3cm)然后浸入药液中;③蚜虫、 红蜘蛛以及介壳虫等,可以连同植物寄主一起浸入药液。红蜘蛛有吐丝成球现象,药液不易均匀 沾湿体表影响结果。可先将带有红蜘蛛的叶片置于豆苗(3-5 cm 高)上,待叶片枯萎时,红蜘蛛 自行迁移至豆叶片,然后进行浸液。浸液一定时间后取出晾干,或用吸水纸吸去多余药液,再移 入干净器皿中(大型昆虫,如粘虫、家蚕等需放入新鲜饲料),置于合适的温湿度及通气良好的环 境中,隔一定时间(12h,24h、48h)观察记载死亡情况,计算死亡率(或校正死亡率)求得致死 中浓度。幼虫,对杀虫剂较敏感,常用此法进行大量化合物初筛,或用来进行杀虫剂残留量的生 物分析。 四、药膜法: 基本原理:将一定量的杀虫药剂,采用浸沾、点滴、喷洒等方法施于物体表面上,形成一个 均匀的药膜,然后放入一定量的供试目标昆虫,让其爬行接触一定时间后,再移至正常的环境条 件下,在规定时间内观察试虫的中毒死亡反应,计算击倒率或死亡率。亦可让试虫和药膜长时间 接触而观察试虫的击倒时间、直到全部试虫被击倒,求出击倒率,比较毒力。还可将形成的药膜, 放置不同时间,经受光照、雨淋等处理,然后再让试虫接触,这样可测得残效结果。制做药膜的 方法有蜡膜法,滤纸药膜法及玻璃药膜法。 4.1、蜡纸药膜法: 实验材料: 药剂:6%六六六粉,用滑石粉稀释成所需浓度。 试虫:赤拟谷盗或粘虫幼虫 用具:培养皿 9cm15 个,蜡纸φcm30 片 方法:将 6%六六六粉剂用滑石粉稀释成 3%,1.5%,0.7%,0.38%六六六粉,各称取 100mg 倒 在蜡纸正面中央,两手执边使药粉在中间移动数次,均匀分布在蜡纸上,然后将多余药粉倒回原 处,再轻轻地弹动背面 2~3 下,即成蜡纸药膜,对照用滑石粉制药膜,每处理重复三次,取试虫 20~30 头同时放在药膜上,用培养皿盖好,(培养皿盖也放一张蜡纸药膜),待虫爬行一定时间(30~ 60min)后,观察击倒数,计算平均击倒率。 4.2、滤纸药膜法: 实验材料: 药剂:50%杀螟松乳油用丙酮稀释成 800;400;200;100;50ppm 试虫:凤凰木夜蛾 用具:培养皿 9cm18 个,量筒、移液管、三角瓶、大头针、滤纸(φ9cm) 方法:取 1 张直径 9cm 的滤纸,插在报纸上的三支大头针上,不使其接触物体平面,吸
取11丙酮药液,围绕滤纸外围逐渐向内滴加。使其丙酮药液均匀分布于滤纸上,同法由低至高 浓度制成不同浓度的滤纸药膜。对照用丙酮。每浓度6张,凉干后放在培养皿底和盖各1张,使 药膜相对,随即放入试虫30一50头任其爬行出30一60mi血后,记录名浓度药膜击倒的虫数,每处 理重复三次,计算平均击倒率。 4.3、玻璃药法: 采用洗涤后干燥的三角瓶或广口瓶,每瓶滴加丙酮药液31,对照瓶滴丙酮,各浓度三次重复, 然后用振荡器或人工转动,使药液均匀附着整个瓶壁,待丙嗣挥发干后即成药膜,定量接入试虫 20~30头,任其爬行30~60mi,观察各处理浓度药膜击倒的虫数,计算击倒率。 完成实验报告:写出供试药剂对供试昆虫药量反应实验报告,并求D。值 触杀作用统计表 供试昆虫 药剂名称 日期 温度 湿度 死亡率(%) 药 对 回归 浓 浓 浓 浓 剂 间(h) 照 度1 度2 度3 度4 度5 方程 1 2 6 8 2
取 1ml 丙酮药液,围绕滤纸外围逐渐向内滴加。使其丙酮药液均匀分布于滤纸上,同法由低至高 浓度制成不同浓度的滤纸药膜,对照用丙酮。每浓度 6 张,凉干后放在培养皿底和盖各 1 张,使 药膜相对,随即放入试虫 30~50 头任其爬行出 30~60min 后,记录名浓度药膜击倒的虫数,每处 理重复三次,计算平均击倒率。 4.3、玻璃药膜法: 采用洗涤后干燥的三角瓶或广口瓶,每瓶滴加丙酮药液 3ml,对照瓶滴丙酮,各浓度三次重复, 然后用振荡器或人工转动,使药液均匀附着整个瓶壁,待丙酮挥发干后即成药膜,定量接入试虫 20~30 头,任其爬行 30~60min,观察各处理浓度药膜击倒的虫数,计算击倒率。 完成实验报告:写出供试药剂对供试昆虫药量反应实验报告,并求 LD50 值。 触杀作用统计表 供试昆虫 药剂名称 日期 温度 湿度 药 剂 时 间(h) 死亡率(%) 对 照 回归 方程 L C50 浓 度 1 浓 度 2 浓 度 3 浓 度 4 浓 度 5 1 2 2 4 3 6 4 8 7 2
实验七杀虫剂胃毒作用毒力测定 基本原理:昆虫在取食正常食物的同时将药剂摄入消化道,经肠壁细胞吸收进入血液,随血 液循环到达作用部位而使昆虫中毒。它利用昆虫的贪食性,因此要尽量避免药剂与昆虫体壁接触 而产生其它毒杀作用。测定方法有(1)液滴饲喂法:(2)口腔注射法:(3)叶片夹毒法。 一、叶片夹毒法 基木原理:在两叶片中间均匀地夹入一定量的杀虫剂,饲喂目标昆虫,药剂随叶片被昆虫取 食,然后由被吞食的叶片面积,计算出吞食的药量。优点是可以减少目标昆虫与杀虫剂的接触, 避免发生触杀作用,操作方便,结果比较精确。叶片夹毒法只适用于植食性的,取食量大的咀嚼 口器目标昆虫,如粘虫、蝗虫。玉米螟等。 1、实验材料: 药剂:90%敌百虫 溶剂:丙酮 试虫:莱青虫或斜纹夜娥幼虫:30~50头 用具:培养皿30~50个,木塞钻(口径2cm),微量注射器10微升1支,浆糊或明胶 生物材料:甘蓝叶、蓖麻叶等。 2、实验方法: 用木塞钻制成直径2cm的圆心叶片60片,把圆叶片放在湿润的培养皿中待用。 夹毒叶的制备:用丙酮将敌百虫稀释成有效成分为0.1气的药液,用微量注射器吸敌百虫丙 液10微升,均匀滴在叶片上,计算出每张圆叶片药量(g/厘米)。用浆糊(或明胶)涂在无药 的圆叶片上,两相对合,即成夹毒叶片,同时制备不夹毒叶片2一4片作对照。每培养皿中放一片, 另放一团湿棉花或湿水草纸一小块保湿,然后编号。 采回的试虫先饥饿数小时,每头虫称重,每培养皿放一头虫,饲喂夹毒叶片。 3、结果观察及计算: 观察试虫取食情况,控制食叶量一部份虫食叶片1/3, 一部分虫食叶片1/2, 一部分食叶片3/4 或全部叶片。然后取出剩余的夹毒叶片,饲喂新鲜叶片,经3-24小时后,检查死亡率。 食量的计算:将剩余的叶片放在直径2cm的方格纸上,计数被吃去的方格数(1毫米1格) 然后按每张圆叶片上的总药量,计算每一方格的剂量,即可求出取食药量。从而求得每头虫单位 体重所取食的剂量(g或微g/g体重)。 致死中量的计算:按每头虫食剂量的大小顺序排列。将供试昆虫分为三组(1)生存组: (2)中间组(有生存的,也有死亡的):(3)死亡组:在计算D。时只用中间组,所以设计浓度 时,生存组初园组菠盘量数目越少越好中啊酢部分和死亡部分。 :中间组活虫总数A+B中间组死虫总数 致死中量(LDo)=2(单位:g或微g/g体重) 药剂对昆虫的剂量一反应记录表 实验报告:写出供试药剂对供试昆虫剂量反应的实验报告
实验七 杀虫剂胃毒作用毒力测定 基本原理:昆虫在取食正常食物的同时将药剂摄入消化道,经肠壁细胞吸收进入血液,随血 液循环到达作用部位而使昆虫中毒。它利用昆虫的贪食性,因此要尽量避免药剂与昆虫体壁接触 而产生其它毒杀作用。测定方法有(1)液滴饲喂法;(2)口腔注射法;(3)叶片夹毒法。 一、叶片夹毒法 基本原理:在两叶片中间均匀地夹入一定量的杀虫剂,饲喂目标昆虫,药剂随叶片被昆虫取 食,然后由被吞食的叶片面积,计算出吞食的药量。优点是可以减少目标昆虫与杀虫剂的接触, 避免发生触杀作用,操作方便,结果比较精确。叶片夹毒法只适用于植食性的,取食量大的咀嚼 口器目标昆虫,如粘虫、蝗虫.玉米螟等。 l、实验材料: 药剂:90%敌百虫 溶剂:丙酮 试虫:菜青虫或斜纹夜娥幼虫:30~50 头 用具:培养皿 30~50 个,木塞钻(口径 2cm),微量注射器 10 微升 1 支,浆糊或明胶 生物材料:甘蓝叶、蓖麻叶等。 2、实验方法: 用木塞钻制成直径 2cm 的圆心叶片 60 片,把圆叶片放在湿润的培养皿中待用。 夹毒叶的制备:用丙酮将敌百虫稀释成有效成分为 0.1%的药液,用微量注射器吸敌百虫丙酮 液 10 微升,均匀滴在叶片上,计算出每张圆叶片药量(mg/厘米 2)。用浆糊(或明胶)涂在无药 的圆叶片上,两相对合,即成夹毒叶片,同时制备不夹毒叶片 2~4 片作对照。每培养皿中放一片, 另放一团湿棉花或湿水草纸一小块保湿,然后编号。 采回的试虫先饥饿数小时,每头虫称重,每培养皿放一头虫,饲喂夹毒叶片。 3、结果观察及计算: 观察试虫取食情况,控制食叶量一部份虫食叶片 1/3,一部分虫食叶片 1/2,一部分食叶片 3/4 或全部叶片。然后取出剩余的夹毒叶片,饲喂新鲜叶片,经 3-24 小时后,检查死亡率。 食量的计算:将剩余的叶片放在直径 2cm 的方格纸上,计数被吃去的方格数(1 毫米 2 /1 格), 然后按每张圆叶片上的总药量,计算每一方格的剂量,即可求出取食药量。从而求得每头虫单位 体重所取食的剂量(mg 或微 g/g 体重)。 致死中量的计算:按每头虫食剂量的大小顺序排列。将供试昆虫分为三组(1)生存组; (2)中间组(有生存的,也有死亡的);(3)死亡组;在计算 LD50 时只用中间组,所以设计浓度 时,生存组和死亡组反应试虫数目越少越好。中间组又分生存部分和死亡部分。 A= ( ) 中间组活虫总数 中间组活虫剂量 B= ( ) 中间组死虫总数 中间组死虫剂量 致死中量(LD50)= 2 A + B (单位:mg 或微 g/g 体重) 药剂对昆虫的剂量—反应记录表 实验报告:写出供试药剂对供试昆虫剂量反应的实验报告
实验八杀虫剂内吸作用毒力测定 [基本原理]:将药剂接触到植物的某一部分(如根、茎、叶、种子),药剂可渗入植物体内, 并随体液传导到全株或植株的某一部分,在一定时间内,让昆由取食没有直接用药的植物组织, 观察其致毒反应。本实验采用包扎法和药液培养法,目的是通过实验了解药剂的内吸性能并初步 掌握内吸杀虫剂的测定原理及方法。 [实验材料]: 供试昆虫:花生蚜虫: 供试植物:花生苗 供试药剂:50%乐果EC,25%螟蛉畏EC,50%杀螟松EC 用具:烧坏(250m1),试管(2×180),移液管,试管架、药棉、塑料布、剪刀、纸套等。 [实验方法]: 药剂配制:将三种供试药剂配成有效含量为0.5%的乳液各50m1 内吸测定方法: 1、涂抹包扎法: 挑选生长发有一致,叶片带蚜量较一致(20-25头)的花生苗12株,每株在颈部包扎一圈脱 脂棉,用移液管吸取上述药液0.2l滴于脱脂棉上。外部用塑料布缠绕后,用线结扎,防止药剂 蒸汽挥发,每一药剂重复三次,每处理一株,对照用清水、重复三次,将己施药的花生苗用纸袋 套住,插在盛有清水的试管中,排列在试管架上,各处理间不要接触,24小时后解开纸袋,统计 蚜虫平均死亡率,比较各药剂的内吸毒效。 2、药液培养法 先将供试药配成10Dm水溶液,分别注入试管内,每管20m1,对照用清水,重复三次,挑取 生长发有一致,叶片带蚜量较一致(20~25头)的花生苗12株,插入液面10cm处,精确计算苗 上蚜虫的数目后,用纸套住,24小时后统计平均死亡*。 [实验报告]: 将实验结果整理成表,并比较几种药剂的内吸作用,判断哪种药剂不是内吸剂
实验八 杀虫剂内吸作用毒力测定 [基本原理]:将药剂接触到植物的某一部分(如根、茎、叶、种子),药剂可渗入植物体内, 并随体液传导到全株或植株的某一部分,在一定时间内,让昆由取食没有直接用药的植物组织, 观察其致毒反应。本实验采用包扎法和药液培养法,目的是通过实验了解药剂的内吸性能并初步 掌握内吸杀虫剂的测定原理及方法。 [实验材料]: 供试昆虫:花生蚜虫: 供试植物:花生苗 供试药剂:50%乐果 EC,25%螟蛉畏 EC,50%杀螟松 EC 用具:烧坏(250ml),试管(2×180),移液管,试管架、药棉、塑料布、剪刀、纸套等。 [实验方法]: 药剂配制:将三种供试药剂配成有效含量为 0.5%的乳液各 50ml。 内吸测定方法: 1、涂抹包扎法: 挑选生长发育一致,叶片带蚜量较一致(20-25 头)的花生苗 12 株,每株在颈部包扎一圈脱 脂棉,用移液管吸取上述药液 0.2ml 滴于脱脂棉上。外部用塑料布缠绕后,用线结扎,防止药剂 蒸汽挥发,每一药剂重复三次,每处理一株,对照用清水、重复三次,将已施药的花生苗用纸袋 套住,插在盛有清水的试管中,排列在试管架上,各处理间不要接触,24 小时后解开纸袋,统计 蚜虫平均死亡率,比较各药剂的内吸毒效。 2、药液培养法: 先将供试药配成 10ppm 水溶液,分别注入试管内,每管 20ml,对照用清水,重复三次,挑取 生长发育一致,叶片带蚜量较一致(20~25 头)的花生苗 12 株,插入液面 10cm 处,精确计算苗 上蚜虫的数目后,用纸套住,24 小时后统计平均死亡率。 [实验报告]: 将实验结果整理成表,并比较几种药剂的内吸作用,判断哪种药剂不是内吸剂
实验九杀虫剂熏蒸作用毒力测定 [基本原理]:在适当气温下,利用有毒的气体、液体或固体挥发产生的蒸气毒杀害虫(或病菌), 称为熏蒸。熏蒸时,毒剂主要以气态从昆虫的气门进入气管,再分布到全身的气管,然后到达神 经作用部位。因此测定熏蒸毒力的装置都必须基于同一原则,即试虫在一密闭容器中不能和固态 或液态的毒剂直接接触。毒剂只能以气态和试虫接触。 常见熏蒸作用的测定方法有二重皿法、干燥器法、广口瓶法、药纸熏蒸法和三角瓶法: [实验材料: 供试药剂:(1)50%敌敌畏EC、(2)50%马拉硫磷EC,(3)90%敌百虫结晶。 试应:赤拟谷盗 用具:培养皿12个,干燥器4个,移液管0.2m113支,波纸、量简、烧杯、纱布等 [实验方法]: 1、二重皿熏蒸法: 药剂配制:每组实验药剂稀释成有效成分含量0.5%药 上皿 液,各20m1(用水稀释)。 虫 处理:在培养皿底内加入5ml供试药液,皿口盖纱布或纱网 盖1张,将试虫20一30头放在纱布或纱网上,再盖相同▣径的 纱布 培养皿底,使其密闭对合(如图),各药剂重复3次,对照用清 一药 下皿 水,半小时、1小时、5小时后,观察计算平均死亡率。 2、干燥器熏蒸法: 取供试虫60头分放三个小烧杯中,杯口用纱布扎紧(三个重复)放在干燥器磁板上,再 将供试药剂稀释成有成分含量为0.1%药液20ml,放入干燥器底部,对照用清水,盖好干燥器盖, 一定时间后,在诵风处讯谏取出试虫,统计死亡率。 3、广口瓶法:用两个广口瓶(250ml),在一个广口瓶中放入一定数量的目标昆虫,另一个 广口瓶中放入定量药剂,用橡皮塞和多个玻璃管把广口瓶连接,震荡,使药剂挥发,气体均匀分 散,作用一定时间后,将目标昆虫移入干净器皿中,放入新鲜饲料,盖上纱布,规定时间内观察 目标昆虫的中毒死亡情况。 4、药纸熏蒸法:在三角瓶(500-1000ml)的瓶寨上,用大头针固定0.5-10cm的滤纸片,在 滤纸片上滴加1-2山的敌敌畏原油或其他熏蒸剂,然后将麻醉的家蝇放入瓶内,盖上瓶塞,25℃温 度下,一定时间后,观察试虫的击倒中毒反应。 5、三角瓶法:在三角瓶底部放入含有一定量熏蒸剂的滤纸片(4×4cm),用纱布袋包一定数 量的试虫,然后,把布袋固定在瓶塞上,让布袋悬挂在三角瓶中,25℃温度下,一定时间后,观 察试虫的中毒和死亡情况, 「实验报告1: 列表记录试验结果,比较各种药剂的毒力并分析哪种供试药剂没有熏蒸作用
实验九 杀虫剂熏蒸作用毒力测定 [基本原理]:在适当气温下,利用有毒的气体、液体或固体挥发产生的蒸气毒杀害虫(或病菌), 称为熏蒸。熏蒸时,毒剂主要以气态从昆虫的气门进入气管,再分布到全身的气管,然后到达神 经作用部位.因此测定熏蒸毒力的装置都必须基于同一原则,即试虫在一密闭容器中不能和固态 或液态的毒剂直接接触。毒剂只能以气态和试虫接触。 常见熏蒸作用的测定方法有二重皿法、干燥器法、广口瓶法、药纸熏蒸法和三角瓶法: [实验材料]: 供试药剂;(1)50%敌敌畏 EC、(2)50%马拉硫磷 EC,(3)90%敌百虫结晶。 试应;赤拟谷盗 用具:培养皿 12 个,干燥器 4 个,移液管 0.2ml13 支,滤纸、量筒、烧杯、纱布等。 [实验方法]: 1、二重皿熏蒸法: 药剂配制:每组实验药剂稀释成有效成分含量 0.5%药 液,各 20ml(用水稀释)。 处理;在培养皿底内加入 5ml 供试药液,皿口盖纱布或纱网 盖 1 张,将试虫 20~30 头放在纱布或纱网上,再盖相同口径的 培养皿底,使其密闭对合(如图),各药剂重复 3 次,对照用清 水,半小时、1 小时、5 小时后,观察计算平均死亡率。 2、干燥器熏蒸法: 取供试虫 60 头分放三个小烧杯中,杯口用纱布扎紧(三个重复)放在干燥器磁板上,再 将供试药剂稀释成有成分含量为 0.1%药液 20ml,放入干燥器底部,对照用清水,盖好干燥器盖, 一定时间后,在通风处迅速取出试虫,统计死亡率。 3、广口瓶法: 用两个广口瓶(250ml),在一个广口瓶中放入一定数量的目标昆虫,另一个 广口瓶中放入定量药剂,用橡皮塞和多个玻璃管把广口瓶连接,震荡,使药剂挥发,气体均匀分 散,作用一定时间后,将目标昆虫移入干净器皿中,放入新鲜饲料,盖上纱布,规定时间内观察 目标昆虫的中毒死亡情况。 4、药纸熏蒸法:在三角瓶(500-1000ml)的瓶塞上,用大头针固定 0.5-1.0cm 的滤纸片,在 滤纸片上滴加 1-2ul 的敌敌畏原油或其他熏蒸剂,然后将麻醉的家蝇放入瓶内,盖上瓶塞,25℃温 度下,一定时间后,观察试虫的击倒中毒反应。 5、三角瓶法:在三角瓶底部放入含有一定量熏蒸剂的滤纸片(4×4cm),用纱布袋包一定数 量的试虫,然后,把布袋固定在瓶塞上,让布袋悬挂在三角瓶中,25℃温度下,一定时间后,观 察试虫的中毒和死亡情况。 [实验报告]: 列表记录试验结果,比较各种药剂的毒力并分析哪种供试药剂没有熏蒸作用。 上皿 虫 纱布 药 下皿