第七章 蛋白质的性质和分离纯化 Properties and Purification of Protein Dextran bead
第七章 蛋白质的性质和分离纯化 Properties and Purification of Protein
目的：1.研究蛋白质的分子结构； 2.研究蛋白质的生物功能； 名 3.蛋白质应用。 方法：利用各种性质差别
❖ 目的：1.研究蛋白质的分子结构； ❖ 2.研究蛋白质的生物功能； ❖ 3.蛋白质应用。 ❖ 方法: 利用各种性质差别
第一节蛋白质的性质 一、蛋白质的酸碱性质 。蛋白质为两性电解质 。蛋白质等电点 ·蛋白质在其等电点偏酸溶液中带正电荷，在偏 碱溶液中带负电荷，在等电点pH时为两性离子。 蛋白质溶液处于等电点时，溶解度最小；粘度、 渗透压、膨胀性及导电能力也降为最低值
第一节蛋白质的性质 一、蛋白质的酸碱性质 ❖ 蛋白质为两性电解质 ❖ 蛋白质等电点 ❖ 蛋白质在其等电点偏酸溶液中带正电荷，在偏 碱溶液中带负电荷，在等电点pH时为两性离子。 蛋白质溶液处于等电点时，溶解度最小；粘度、 渗透压、膨胀性及导电能力也降为最低值
COOH OH C000H C00 P NH H+ NH寸 班 COOH NH2 阳离子 两性离子 阴离子
蛋白质在等电点的溶解度最小 pH I.E.P. pH I.E.P 创美纯 001N 0.001N I.E.P pH
蛋白质在等电点的溶解度最小
蛋白质分子上的电荷与疏水区 疏水区域
疏水区域 蛋白质分子上的电荷与疏水区
。等离子点：在没有其他盐类干扰时，蛋 白质质子供体基团解离出的质子数与质 子受体基团结合的质子数相等时的pH,为 蛋白质特征常数
❖ 等离子点：在没有其他盐类干扰时，蛋 白质质子供体基团解离出的质子数与质 子受体基团结合的质子数相等时的pH,为 蛋白质特征常数
二、蛋白质分子量及其确定方法 ÷蛋白质相对分子量在6000~1000000之 间。测定分子量的主要方法有化学组成法、 渗透压法、超离心法（沉降分析法）、凝 胶过滤法、聚丙烯酰胺凝胶电泳等
❖ 蛋白质相对分子量在6000～1 000 000之 间。测定分子量的主要方法有化学组成法、 渗透压法、超离心法（沉降分析法）、凝 胶过滤法、聚丙烯酰胺凝胶电泳等。 二、蛋白质分子量及其确定方法
化学组成法：最低M=元素（分子）分子量/ 元素（分子）百分含量 ÷渗透压法： M=cRT/II 超离心法： M=RTs/[(1-vp)D] 。凝胶过滤： logM=k cv. ·SDS一PAGE法： logM=o-b取 氨基酸序列分析计算
❖ 化学组成法: 最低M=元素(分子)分子量/ 元素(分子)百分含量 ❖ 渗透压法: M=cRT/Π ❖ 超离心法: M=RTs/[(1-υρ)D] ❖ 凝胶过滤: logM=k + cve ❖ SDS－PAGE法: logM=α-bμR ❖ 氨基酸序列分析计算
1.化学组成测定最低相对分子量 元素（分子）分子量 最低相对分子量= 元素（分子）百分含量 Fe原子量(55.8) ÷最低相对分子量= Fe元素百分含量(0.335%) (如：肌红蛋白Mr) =16700
元素(分子)分子量 ❖ 最低相对分子量= 元素(分子)百分含量 Fe原子量(55.8 ) ❖ 最低相对分子量= Fe元素百分含量 (0.335%) =16700 1.化学组成测定最低相对分子量 (如：肌红蛋白Mr）