第6节植物病毒鉴定原理
第6节植物病毒鉴定原理
生物学实验 由于田间自然发病病株往往并非只带一种病毒不能 直接用田间自然病株来进行病毒性质研究。 因此，首先要对田间自然发病病株的病毒进行人工 分离纯化。 其后，要对真正的致病病毒，参照柯赫法则的要求 来分离毒源 。 第三，无论是生物学方法还是其它方法分离出的病 毒分离物或致病病毒，都应保存或接种在繁殖寄主 上供诊断、鉴定作进一步研究
一、生物学实验 ◼ 由于田间自然发病病株往往并非只带一种病毒不能 直接用田间自然病株来进行病毒性质研究。 ◼ 因此，首先要对田间自然发病病株的病毒进行人工 分离纯化。 ◼ 其后，要对真正的致病病毒，参照柯赫法则的要求 来分离毒源。 ◼ 第三，无论是生物学方法还是其它方法分离出的病 毒分离物或致病病毒，都应保存或接种在繁殖寄主 上供诊断、鉴定作进一步研究
例1，TMV和CMV在烟和番茄上均为混合侵染 。 TMV能在心叶烟上产生枯斑反应，而CMV则呈系统 花叶，TMV蚜虫不传，CMV蚜虫能传，这样，便可 通过心叶烟单斑分离TMV,甩开CMV通过蚜虫接 种，分离获得CMV,甩开TMV。 ■ 例2，马铃薯X病毒(PVX)和马铃薯Y病毒 (PVY 在马铃薯上也常混合侵染，但PVX能侵染曼陀罗， PVY不侵染曼陀罗，PVX蚜虫不传，PVY蚜虫能 传，这样，通过曼陀罗和蚜虫就可将PVX和PVY分 离开来
◼ 例1，TMV和CMV在烟和番茄上均为混合侵染。 TMV能在心叶烟上产生枯斑反应，而CMV则呈系统 花叶，TMV蚜虫不传，CMV蚜虫能传，这样，便可 通过心叶烟单斑分离TMV，甩开CMV,通过蚜虫接 种，分离获得CMV，甩开TMV。 ◼ 例2，马铃薯X病毒（PVX）和马铃薯Y病毒（PVY） 在马铃薯上也常混合侵染，但PVX能侵染曼陀罗， PVY不侵染曼陀罗， PVX蚜虫不传， PVY蚜虫能 传，这样，通过曼陀罗和蚜虫就可将PVX和PVY分 离开来
由于病毒不能在人工培养基上培养，应用柯赫法则时作些 相应的修订。 1.某种病毒必须经常与某种病害联系在一起； 2.这种病毒必须能从发病的寄主植物上分离到一通过生 物学方法或理化方法，甩开非致病病原和其它污染物，分离 出致病病毒； 3.将这种致病病毒接种到健康寄主上，能再现原来同种 病害的症状特征； 4.从接种发病的植物上，能检测到这种病毒，并能再次 分离到这种病毒；
◼ 由于病毒不能在人工培养基上培养，应用柯赫法则时作些 相应的修订。 ◼ 1．某种病毒必须经常与某种病害联系在一起； ◼ 2．这种病毒必须能从发病的寄主植物上分离到—通过生 物学方法或理化方法，甩开非致病病原和其它污染物，分离 出致病病毒； ◼ 3．将这种致病病毒接种到健康寄主上，能再现原来同种 病害的症状特征； ◼ 4．从接种发病的植物上，能检测到这种病毒，并能再次 分离到这种病毒；
■病毒的分离有多种方法，最常用的生物学方法是枯斑寄主， 过滤寄主和专化介体的方法。 (一)、传染方式：有些病毒有其特定的传染方式，因此可根 据传染方式来确定病毒种类.如番茄斑萎病毒只能通过蓟马传 播。 (二)、症状类型 1、不同病毒有不同的症状类型，对病害诊断很有用处，特别是 有些特征性的症状类型如耳突，脉肿等，往往能表示某一特 定的病毒或病毒组。 2、分清主要症状和次要症状，抓住那些最能反映某一病害的特 征及其能与其他病害区别开来的症状。 3、除了症状类型，还应结合那些更为可靠的资料加以判断
◼ 病毒的分离有多种方法，最常用的生物学方法是枯斑寄主， 过滤寄主和专化介体的方法。 ◼ （一）、传染方式:有些病毒有其特定的传染方式，因此可根 据传染方式来确定病毒种类.如番茄斑萎病毒只能通过蓟马传 播。 ◼ （二）、症状类型 1、不同病毒有不同的症状类型，对病害诊断很有用处，特别是 有些特征性的症状类型如耳突，脉肿等，往往能表示某一特 定的病毒或病毒组。 2、分清主要症状和次要症状，抓住那些最能反映某一病害的特 征及其能与其他病害区别开来的症状。 3、除了症状类型，还应结合那些更为可靠的资料加以判断
(三)、病毒内含体 ■内含体是病毒病的内部症状。 ■借助光学显微镜和电子显微镜检查内含体，有 助于识别和鉴定许多植物病毒。目前己知至少 有16个组的病毒能产生不同的内含体，从而可 在分组的层次上作出鉴别诊断。在一个组内的 不同病毒，有时也会产生具有鉴别特性的内含 体
◼ （三）、病毒内含体 ◼ 内含体是病毒病的内部症状。 ◼ 借助光学显微镜和电子显微镜检查内含体，有 助于识别和鉴定许多植物病毒。目前已知至少 有16个组的病毒能产生不同的内含体，从而可 在分组的层次上作出鉴别诊断。在一个组内的 不同病毒，有时也会产生具有鉴别特性的内含 体
()Tobravlrus(烟草脆裂莉毒属) (3Poev(马铃X疯m)型 烟草细胞附核体 六角品 六角品创面 烟草表皮及丛毛细览 三叶草貲色花叶病斯在 (TRV) 中螺纹垫(PVX) 蚕豆细胞中的那纹体： (2)Tobamovir(草花叶病属) 〔4)Cariavin心（香石竹游懒病排网） 代积 饲草叶幻胞中囡片侧面一侧片正 节纹战状体 泡孔状体 黄瓜绿延驳病(CGMV门 到 000 长方品及六施品 段品TMV 恨品 六拍品 豌豆线条邗病，在路豆叶细咆中 的清 (S)Pofyvirus(马净#Y非屋) (6)Cucumovirus(黄瓜龙时病迷风) 烟草钏吃壁上及兜内炭状休 泡孔款体 粒状仲 回片俗 CMV在烟草杂种知胞巾 不孕病非在烟草细胞中 因12-1植物府非绍吃内含体类型
0g 泡应内含体胞质小品体 辣椒叶细胞中角形及方体形（中浅】》 离豆叶到胞中 (们万oi心（芜背黄色花叶病排网) (图)Comavins(豇豆花叶荫进网】 20 芸苔叶细胞中与卫细跑中小长方体丛色知胞中方体 泡孔状体 品体 小池吼及排排 质粒湘伴的内含休旷黄瓜花叶病布黄瓜钏胞中 豌豆花叶病碰 南瓜花叶病毒梦卜花腾 在豇豆时细胞中材瓜叶细胞中在萝卜叶细钟 (9)epovins〔线虫传环延病球质】 (L0)Brontovtrus(企求花叶病造届) 泡孔获体TRSV c-小你 小品格 大小不可球状体 小品修 在烟草长皮中 在丛毛纸胞中 在火麥裘皮细胞中 (11 Caulimuvinis(花将菜花叶核排展)】 (T2)7 ombnsvints(活浙求矮病每网》 自 小粒体 翠芸苔细胞中的伴核内含答 溶猫叶邹跑中的伴枝
(I4)llarvins(据草线冬病排网) (15)Broad bean1wi山vir(鉴豆菱瑞病排) N 浅色小体 大型泡孔体 小型品俗 烟尊线条病毒在芝伦罗表皮细肥中 豌目表皮酬胞中的两型内合体 光学接：各种尺度及染色深没不同的内含体 (I3)Rhaldlovirus(弹状的每属】 (I6)Closterovinis(线条黄化病排)】 初皮细胞形成小泡孔原生质 孩内内含体 核外内含体 茶纹状体 纤堆状体 苔盗菜資肤病牌 首带花叶病毒 柑橘速变病排的内含种 在烟草杂种细胞内 在烟草黎种细咆内 光学位：纤输状，投体电镜：杂纹梭圆体，旋纹体
48 300nm 300nm 100nm 4b 束状内含体 柱状内含体
束状内含体 柱状内含体