学院山东大学基础医学《医学形态学创新实验》实验课程教学大纲编写人：郭雨雾张晓丽张艳敏李春阳张晓芳刘真审定人：郭雨界编制时间：2019-05-15审定时间：一、课程基本信息课程名称医学形态学创新实验英文名称Medical Morphological Experiments课程编码开课单位基础医学院形态实验室实验类型口专业基础实验口专业实验口综合实验／创新实验口开放实验口/必修口选修课程性质实验类别口/独立设课口非独立设课学分总学时28实验学时28适用专业临床医学各学制先修课程课程网站二、课程描述医学形态学创新实验教学，将人体解剖学、组织胚胎学和病理解部学三个相关学科的交叉内容进行有机整合，形成系统化的知识。《医学形态学创新实验》是以组织学、人体解剖学、病理解剖学为主的实验研究方法，学习人体正常与异常形态之间演变过程的一门综合课程，把一些验证性、演示性的实验内容部分改变为设计、操作性实验项目，在学生动手操作过程中，激发学生科学研究的热情，培养学生观察分析能力和独立思考的能力。Medicalmorphologicalexperimentsintegratehumananatomy,histoembryology and pathological anatomyandform systematic knowledge.We change some experimental contents of verification and demonstrationinto designing and operating experimental items, stimulating students
山东大学 基础医学 学院 《 医学形态学创新实验 》实验课程教学大纲 编写人：郭雨霁 张晓丽 张艳敏 李春阳 张晓芳 刘真 审定人：郭雨霁 编制时间：2019-05-15 审定时间： 一、课程基本信息 课程名称 医学形态学创新实验 英文名称 Medical Morphological Experiments 课程编码 开课单位 基础医学院形态实验室 实验类型 □专业基础实验 □专业实验 □综合实验 □√创新实验 □开放实验 课程性质 □√必修 □选修 实验类别 □√独立设课 □非独立设课 学分 总学时 28 实验学时 28 适用专业 临床医学各学制 先修课程 课程网站 二、课程描述 医学形态学创新实验教学，将人体解剖学、组织胚胎学和病理解剖学三个相关学 科的交叉内容进行有机整合，形成系统化的知识。《医学形态学创新实验》是以 组织学、人体解剖学、病理解剖学为主的实验研究方法，学习人体正常与异常形 态之间演变过程的一门综合课程，把一些验证性、演示性的实验内容部分改变为 设计、操作性实验项目，在学生动手操作过程中，激发学生科学研究的热情，培 养学生观察分析能力和独立思考的能力。 Medical morphological experiments integrate human anatomy, histoembryology and pathological anatomy and form systematic knowledge. We change some experimental contents of verification and demonstration into designing and operating experimental items, stimulating students
enthusiasmfor scientificresearch and developing the abilityto observe,analyzeandthinkindependently三、实验教学目的与基本要求通过医学形态学综合创新实验教学，将人体解部学、组织胚胎学和病理解剖学三个相关学科的交叉内容进行有机整合，形成系统化的知识。通过综合创新实验的操作，使学生掌握医学形态学研究常用的技术方法，培养学生的动手操作能力；通过病理延伸PBL教学，加深学生对医学知识的理解，提高学生的临床思维能力和分析解决临床实际问题的能力，启迪学生的科研思维和创新精神，以适应新时代培养卓越医生的要求。四、实验课程内容和学时分配实验1．肥大细胞的制作与观察【导言】肥大细胞是人体结缔组织中常见的一种细胞，几乎存在于全身各个器官，尤其集中于皮肤、胃肠道、呼吸道等部位，沿血管、淋巴管以及神经末梢分布。这些部位经常接触入侵的病原体、抗原及其他物质，意味着这些肥大细胞扮演“哨兵”的角色，是战斗在抵御病原体入侵第一道防线的重要力量，在维持机体正常的生理和免疫功能方面发挥重要作用。抗原进入机体后，选择性地诱导特异性B淋巴细胞产生抗体IgE，后者以Fce段与肥大细胞表面的Fcε受体结合，使机体处于致敏状态：当相同抗原再次进入机体时，便与已结合在致敏肥大细胞上的IgE特异性结合，引发肥大细胞脱颗粒，释放组胺、白三烯和前列腺素等生物活性物质，引起平滑肌收缩、毛细血管扩张且通透性增强、腺体分泌增加等一系列病理改变，可引起皮肤黏膜过敏症（等麻疹、湿疹、血管神经性水肿），呼吸道过敏反应（过敏性鼻炎、支气管哮喘、喉头水肿），消化道过敏症（食物过敏性胃肠炎），全身过敏症（过敏性休克），这一系列病变就是临床上很常见的I型超敏反应。而这些过敏原（抗原）常来自于某些药物或化学物质，如青霉素、磺胺等；吸入性抗原，如花粉颗粒、动物皮毛等；及来自食物，如蛋、奶、鱼虾等食物蛋白。本实验旨在研究卵白蛋白对大鼠皮致敏模型的建立，观察肥大细胞脱颗粒的
enthusiasm for scientific research and developing the ability to observe, analyze and think independently. 三、实验教学目的与基本要求 通过医学形态学综合创新实验教学，将人体解剖学、组织胚胎学和病理解剖学三 个相关学科的交叉内容进行有机整合，形成系统化的知识。通过综合创新实验的 操作，使学生掌握医学形态学研究常用的技术方法，培养学生的动手操作能力； 通过病理延伸 PBL 教学，加深学生对医学知识的理解，提高学生的临床思维能力 和分析解决临床实际问题的能力，启迪学生的科研思维和创新精神，以适应新时 代培养卓越医生的要求。 四、实验课程内容和学时分配 实验 1. 肥大细胞的制作与观察 【导言】 肥大细胞是人体结缔组织中常见的一种细胞，几乎存在于全身各个器官，尤 其集中于皮肤、胃肠道、呼吸道等部位，沿血管、淋巴管以及神经末梢分布。这 些部位经常接触入侵的病原体、抗原及其他物质，意味着这些肥大细胞扮演“哨 兵”的角色，是战斗在抵御病原体入侵第一道防线的重要力量，在维持机体正常 的生理和免疫功能方面发挥重要作用。 抗原进入机体后，选择性地诱导特异性B淋巴细胞产生抗体IgE，后者以Fc ε段与肥大细胞表面的Fcε受体结合，使机体处于致敏状态；当相同抗原再次进 入机体时，便与已结合在致敏肥大细胞上的IgE特异性结合，引发肥大细胞脱颗 粒，释放组胺、白三烯和前列腺素等生物活性物质，引起平滑肌收缩、毛细血管 扩张且通透性增强、腺体分泌增加等一系列病理改变，可引起皮肤黏膜过敏症（荨 麻疹、湿疹、血管神经性水肿），呼吸道过敏反应（过敏性鼻炎、支气管哮喘、 喉头水肿），消化道过敏症（食物过敏性胃肠炎），全身过敏症（过敏性休克）， 这一系列病变就是临床上很常见的I型超敏反应。而这些过敏原（抗原）常来自 于某些药物或化学物质，如青霉素、磺胺等；吸入性抗原，如花粉颗粒、动物皮 毛等；及来自食物，如蛋、奶、鱼虾等食物蛋白。 本实验旨在研究卵白蛋白对大鼠皮致敏模型的建立，观察肥大细胞脱颗粒的
影响。【实验目的】1.建立以卵白蛋白为过敏原的I型超敏反应模型。2.观察I型超敏反应的机体表现，观察肥大细胞脱颗粒的现象，并分析发生机制。3.掌握皮下组织、小肠系膜取材、固定及甲苯胺蓝染色方法等。【教学方案】实验准备1．准备教学课件，主要讲述肥大细胞形态结构、分布部位、生物学功能及I型超敏反应的发生机制。2.形态学实验教学平台准备实验用大鼠、试剂（卵白蛋白、生理盐水、甲苯胺蓝染色相关试剂）、注射器、大鼠固定器、手术相关器械。【实验步骤】1.教师利用多媒体讲述肥大细胞的形态结构、功能及分布。2.组织学生讨论I型超敏反应发生机制。3.实验动物及麻醉：（1）动物模型建立：实验分为对照组与模型组。实验第1天，对照组每只大鼠注射1m1生理盐水配制氢氧化铝悬液10g/L。模型组大鼠注射卵白蛋白1mg与氢氧化铝悬液1m1的混合液进行初次免疫。实验第10天进行激发，对照组大鼠腹部皮下注射生理盐水配制的氢氧化铝悬液（10g/L）1ml，模型组大鼠皮下注射卵白蛋白1mg与氢氧化铝悬液1ml的混合液。（2）异氟烷/乙醚，20%乌拉坦腹腔注射麻醉（5mg/kg）SD大鼠。解剖大鼠，染色观察空肠形态，甲苯胺蓝染色观察空肠及肠系膜肥大细胞，随机连续计数空肠10个高倍镜视野内肥大细胞数，取平均值代表其密度，累计肠系膜10个高倍视野内肥大细胞总数及脱颗粒细胞数，计算完整肥大细胞百分率。【病例延伸】某60岁的李大爷，因患痛风于2月12日14：00到某社区卫生服务站就诊，接受头孢噻亏钠注射液4克静脉点滴，16：00注射结束，回家。50分钟后患者发生
影响。 【实验目的】 1. 建立以卵白蛋白为过敏原的I型超敏反应模型。 2. 观察I型超敏反应的机体表现，观察肥大细胞脱颗粒的现象，并分析发 生机制。 3. 掌握皮下组织、小肠系膜取材、固定及甲苯胺蓝染色方法等。 【教学方案】 实验准备 1．准备教学课件，主要讲述肥大细胞形态结构、分布部位、生物学功能 及I型超敏反应的发生机制。 2. 形态学实验教学平台准备实验用大鼠、试剂（卵白蛋白、生理盐水、 甲苯胺蓝染色相关试剂）、注射器、大鼠固定器、手术相关器械。 【实验步骤】 1. 教师利用多媒体讲述肥大细胞的形态结构、功能及分布。 2. 组织学生讨论I型超敏反应发生机制。 3. 实验动物及麻醉： （1）动物模型建立：实验分为对照组与模型组。实验第 1 天，对照组每 只大鼠注射 1ml生理盐水配制氢氧化铝悬液 10g/L。模型组大鼠注射卵白蛋白 1mg 与氢氧化铝悬液 1ml 的混合液进行初次免疫。 实验第 10 天进行激发，对照组大 鼠腹部皮下注射生理盐水配制的氢氧化铝悬液(10g/L)1ml, 模型组大鼠皮下注 射卵白蛋白 1mg 与氢氧化铝悬液 1ml 的混合液。 （2）异氟烷/乙醚，20%乌拉坦腹腔注射麻醉（5mg/kg）SD 大鼠。 解剖大鼠，HE 染色观察空肠形态，甲苯胺蓝染色观察空肠及肠系膜肥大细胞， 随机连续计数空肠 10 个高倍镜视野内肥大细胞数，取平均值代表其密度，累计 肠系膜 10 个高倍视野内肥大细胞总数及脱颗粒细胞数，计算完整肥大细胞百分 率。 【病例延伸】 某60岁的李大爷，因患痛风于2月12日14：00到某社区卫生服务站就诊，接 受头孢噻亏钠注射液4克静脉点滴，16：00注射结束，回家。50分钟后患者发生
舌头发麻，喉咙发紧，其老伴到社区站告诉医生病情。当时站里就1名医生，还有几个静脉点滴的病人，不能出诊，医生叮嘱家属将病人送往大医院抢救。1800经120急救车送至某医院时，病人已经休克。分析：1.李大爷休克的原因是什么？2.I型超敏反应常见的致敏原有哪些？教师点评：1.I型超敏反应的临床表现。2.模型鼠肥大细胞脱颗粒的观察结果。【学生作业】利用本节课所建立的I型超敏反应模型，设计一个治疗I型超敏反应的实验方案。【实验创新点】通过形态学实验操作和临床病例PBL教学，结合目前临床常见病变一I型超敏反应，将结构、功能与临床相结合，充分发挥学生的主观能动性和学习积极性，有利于培养学生的临床思维能力和分析能力，达到知识的拓展和延伸。变应原心CD4生物活性介质L-4Th细胞B细胞平滑肌控摩变应原心IgEFe受体小血管通透性增加O黏膜腺体分泌增加变应原浆细胞致敏肥大细胞脱颗粒神经末梢敏感记忆B细胞TY0变应原特异性IgE嗜酸性粒细胞活化(张艳敏)实验2小鼠活精子标本的制作与干涉试验【导言】
舌头发麻，喉咙发紧，其老伴到社区站告诉医生病情。当时站里就1名医生，还 有几个静脉点滴的病人，不能出诊，医生叮嘱家属将病人送往大医院抢救。18： 00经120急救车送至某医院时，病人已经休克。 分析： 1. 李大爷休克的原因是什么？ 2. I型超敏反应常见的致敏原有哪些？ 教师点评：1. I型超敏反应的临床表现。 2. 模型鼠肥大细胞脱颗粒的观察结果。 【学生作业】 利用本节课所建立的I型超敏反应模型，设计一个治疗I型超敏反应的实验方 案。 【实验创新点】 通过形态学实验操作和临床病例 PBL 教学，结合目前临床常见病变—I 型超 敏反应，将结构、功能与临床相结合，充分发挥学生的主观能动性和学习积极性， 有利于培养学生的临床思维能力和分析能力，达到知识的拓展和延伸。 (张艳敏) 实验 2 小鼠活精子标本的制作与干涉试验 【导言】
精子是成熟男性的生殖细胞，产生于睾丸，成熟于附睾，在女性生殖管道中获能，然后与卵子结合生成受精卵，自此以后一个新生命开始形成。由此可见，精子是生殖过程必不可少的重要成员。但是，有生育功能的精子在数量、形态结构和运动能力等方面必须达到一定的正常标准，否则就不能使卵子受精，就是临床上所说的“不育症”，不育症在临床上常见。不育症诊断的主要手段就是精液检测，本实验要求学生掌握小鼠活精子标本的制备，锻炼动手能力。掌握筛选杀精避孕药最基本的方法即“体外杀精实验”和“精子低渗肿胀试验”，以启发科研意识，为将来参加科研工作打下良好的基础。【实验目的】1.重点掌握小鼠活精子标本的制备，锻炼动手能力2.了解筛选杀精避孕药最基本的方法：“体外杀精试验”和“精子低渗肿胀试验”，以启发科研意识为将来参加科研工作打下良好的基础。【教学方案】实验准备1、准备教学课件，主要介绍取材部位、方法、步骤以及注意事项。2、形态学实验教学平台准备实验选取12～16周龄昆明雄鼠，器械：解部剪、解剖镊、眼科剪、眼科镊、1ml注射器、小培养皿、吸管、eppendorf管、载玻片等；试剂：蒸馏水（替代低渗液）、生理盐水、甲醇-冰乙酸溶液（3：1）、0.3%甲苯胺蓝染液、盐酸异丙嗪溶液生理盐水溶液40%（可由同学自行稀释成不同浓度：5%，10%，20%，30%）；仪器：水浴锅、相差显微镜【实验步骤】1.活精子标本的制备与观察取12～16周龄昆明雄鼠，颈稚脱白处死。酒精棉球消毒小鼠腹部皮肤和毛发，在腹部下方剪开腹壁，沿阴囊方向用组织镊拉出睾丸和附睾，将其剪下，放在盛有生理盐水的大培养血中，除去血液和周围的脂肪组织；用眼科剪剪下两侧睾丸后方的附睾，转移到盛有2ml生理盐水的小培养皿中，用1ml注射器针头将附睾划开（或用小剪刀剪开），可见乳白色精液流出：轻轻抖动附睾组织，使精液完全流出，并与生理盐水混匀。将精子悬液倒入预先备好的eppendorf管中，然
精子是成熟男性的生殖细胞,产生于睾丸,成熟于附睾,在女性生殖管道中获 能，然后与卵子结合生成受精卵，自此以后一个新生命开始形成。由此可见，精 子是生殖过程必不可少的重要成员。 但是,有生育功能的精子在数量、形态结构 和运动能力等方面必须达到一定的正常标准,否则就不能使卵子受精,就是临床 上所说的“ 不育症”,不育症在临床上常见。 不育症诊断的主要手段就是精液检测,本实验要求学生掌握小鼠活精子标本 的制备,锻炼动手能力。 掌握筛选杀精避孕药最基本的方法即“ 体外杀精实验” 和“ 精子低渗肿胀试验”,以启发科研意识，为将来参加科研工作打下良好的基 础。 【实验目的】 1. 重点掌握小鼠活精子标本的制备，锻炼动手能力。 2. 了解筛选杀精避孕药最基本的方法：“体外杀精试验”和“精子低渗肿胀试验”， 以启发科研意识为将来参加科研工作打下良好的基础。 【教学方案】 实验准备 1、准备教学课件，主要介绍取材部位、方法、步骤以及注意事项。 2、形态学实验教学平台准备实验选取 12〜16 周龄昆明雄鼠，器械：解剖剪、 解剖镊、眼科剪、眼科镊、1ml 注射器、小培养皿、吸管、eppendorf 管、载玻 片等；试剂：蒸馏水( 替代低渗液) 、生理盐水、甲醇-冰乙酸溶液(3∶1) 、0.3% 甲苯胺蓝染液、盐酸异丙嗪溶液生理盐水溶液 40%（可由同学自行稀释成不同浓 度：5%，10%，20%，30%）；仪器：水浴锅、相差显微镜 【实验步骤】 1． 活精子标本的制备与观察 取 12〜16 周龄昆明雄鼠,颈椎脱臼处死。 酒精棉球消毒小鼠腹部皮肤和毛 发,在腹部下方剪开腹壁,沿阴囊方向用组织镊拉出睾丸和附睾,将其剪下,放在 盛有生理盐水的大培养皿中,除去血液和周围的脂肪组织；用眼科剪剪下两侧睾 丸后方的附睾,转移到盛有 2ml 生理盐水的小培养皿中,用 1ml 注射器针头将 附睾划开( 或用小剪刀剪开),可见乳白色精液流出;轻轻抖动附睾组织,使精液 完全流出,并与生理盐水混匀。 将精子悬液倒入预先备好的 eppendorf 管中,然
后置于37℃水浴锅中备用。翠丸附翠附图1图2（1）用吸管或移液器取1滴精子悬液放在载玻片上，低倍镜观察精子的形态和运动。（2）取精子悬液涂片（若精子数量少，可离心后操作此步），用0.3%甲苯胺蓝液染色，高倍镜观察精子的形态结构。甲苯胺蓝液染色步骤：精子涂片空气中干燥5min→数滴甲醇-冰乙酸溶液（3：1）室温固定5min→0.3%甲苯胺蓝染液室温5min→水洗→观察。2．体外抑精子实验将精液标本分为2组：实验组和对照组。实验组：在37℃恒温条件下，将50u1精子悬液置于1mleppendorf管中，取0.2ml一定浓度的抑精子药液与其充分混合，分别于混合后30秒、5min、10min和30min取一滴置于载玻片上，显微镜下计数10个视野，记录活动精子百分率。对照组：将50μ1.精子悬液与0.2m1生理盐水混合，其余操作同上。比较不同时间点两组活动精子的百分率。3.精子低渗肿胀试验取0.2ml精子悬液置于lmleppendorf管中，与50μ1生理盐水混合，1分钟后检测精子存活百分率。同时，取0.1m1处理后的精子混悬液于试管中与1ml蒸馏水（低渗液）混合，在37℃下培养30分钟，然后在相差显微镜下观察100个精子，计算精子尾肿胀（精子尾部呈泡状）百分率
后置于 37℃ 水浴锅中备用。 （1）用吸管或移液器取 1 滴精子悬液放在载玻片上,低倍镜观察精子的形态和 运动。 （2）取精子悬液涂片( 若精子数量少,可离心后操作此步),用 0.3% 甲苯胺蓝液 染色,高倍镜观察精子的形态结构。 甲苯胺蓝液染色步骤: 精子涂片空气中干燥 5min → 数滴甲醇-冰乙酸溶液(3∶1) 室温固定 5min→0.3%甲苯胺蓝染液室温 5min→水洗→观察。 2． 体外抑精子实验 将精液标本分为 2 组:实验组和对照组。 实验组:在 37℃ 恒温条件下,将 50μl 精子悬液置于 1ml eppendorf 管 中,取 0.2ml 一定浓度的抑精子药液与其充分混合,分别于混合后 30 秒、5min、 10min 和 30min 取一滴置于载玻片上,显微镜下计数 10 个视野,记录活动精子 百分率。 对照组:将 50μl 精子悬液与 0.2ml 生理盐水混合,其余操作同上。比较不 同时间点两组活动精子的百分率。 3． 精子低渗肿胀试验 取 0.2ml 精子悬液置于 1ml eppendorf 管中,与 50μl 生理盐水混合,1 分钟后检测精子存活百分率。 同时,取 0.1ml 处理后的精子混悬液于试管中与 1ml 蒸馏水( 低渗液) 混合,在 37℃ 下培养 30 分钟,然后在相差显微镜下观 察 100 个精子,计算精子尾肿胀( 精子尾部呈泡状) 百分率
取0.2ml精子悬液与50u1抑精子药液（浓度为上述抑精实验所用浓度的1／2）混合，1分钟后检测精子存活百分率。同时，按上述方法检测精子尾肿胀百分率，比较两组精子的膜功能。[实验观察]1）低倍镜下可见精子数量多，活动度好。高倍镜下可见小鼠精子头部呈扁椭圆形，头的顶端呈镰刀状，尾部细长（见下图）2）与对照组相比，实验（精子悬液与抑精药混合）组中活动精子百分率明显减少，高倍镜下可见死亡精子尾部僵直。3）在生理盐水对照组标本中，镜下可见多个尾部肿胀的精子（即精子尾部呈泡状，详见本教材视频），实验组标本中则少见这种现象。C肿胀的精子麗部星空泡样A特子卖部未护胀的精子尾邮精子头部精子头部图图1：取出的小鼠睾丸和附睾图2：分离后的小鼠附睾图3：显微镜下观察到的精子图4：甲苯胺蓝染色后观察到的精子
取 0.2ml 精子悬液与 50μl 抑精子药液( 浓度为上述抑精实验所用浓度 的 1 / 2) 混合,1 分钟后检测精子存活百分率。同时,按上述方法检测精子尾肿 胀百分率,比较两组精子的膜功能。 [实验观察] 1）低倍镜下可见精子数量多，活动度好。 高倍镜下可见小鼠精子头部呈扁椭圆形，头的顶端呈镰刀状，尾部细长（见 下图） 2）与对照组相比，实验（精子悬液与抑精药混合）组中活动精子百分率明显减 少，高倍镜下可见死亡精子尾部僵直。 3）在生理盐水对照组标本中，镜下可见多个尾部肿胀的精子（即精子尾部呈泡 状，详见本教材视频），实验组标本中则少见这种现象。 图 1：取出的小鼠睾丸和附睾 图 2：分离后的小鼠附睾 图 3：显微镜下观察到的精子 图 4：甲苯胺蓝染色后观察到的精子
图5：低渗实验中观察到的肿胀的、空泡样的精子尾部【教师点评】目前，虽然临床上实行的节育方法很多，但安全、有效、使用方便的阴道杀精剂的研究，仍是计划生育工作中，避孕方法研究的一个重要课题精子是男性配子，由椭圆形的头部和细长的尾部构成。其尾部是运动装置，精子借助尾部的运动向前游动。精子膜与精子的获能、顶体反应、精卵结合等生殖过程密切相关，该膜损伤可导致精子正常功能的丧失。评价精子膜生理、生化功能的完整性，对确定精子生育力是一个不可缺少的重要方面。精子膜能选择性地转运膜内外分子成分。研究表明，当精子暴露于低渗环境中时，细胞膜即将水泵入膜内，以保持细胞内外环境渗透压的平衡。水的流入，增加了精子体积与其表面积的比率，引起细胞膜肿胀。这一肿胀现象以精子尾部最为明显，故精子尾低渗肿胀现象是精子膜正常转运水分子的标志。检测精子尾低渗肿胀能力可用来评价精子的膜功能是否正常。该试验可作为检测男性生育力的手段，并可应用于男性生殖的基础研究及不育的临床诊治。近年来，常用该法评价杀精剂对精子膜功能的影响。【学生作业]绘图实验中观察到的现象并讨论临床常用避孕方法（张晓丽）实验3小鼠血脑屏障实验【导言】血脑屏障是指脑毛细血管壁与神经胶质细胞形成的血浆与脑细胞之间的屏障和由脉络丛形成的血浆和脑脊液之间的屏障，可以阻挡病原微生物及毒性产物、异物颗粒包括染料颗粒等从血流进入脑组织和脑脊液内，从而保护中枢神经系统免受损害。中枢神经系统的神经元在正常活动时，需要一个稳定的内环境，这种稳定性的实现有赖于血脑屏障的存在
图 5：低渗实验中观察到的肿胀的、空泡样的精子尾部 【教师点评】 目前，虽然临床上实行的节育方法很多，但安全、有效、使用方便的阴道杀 精剂的研究，仍是计划生育工作中，避孕方法研究的一个重要课题。 精子是男性配子，由椭圆形的头部和细长的尾部构成。其尾部是运动装置， 精子借助尾部的运动向前游动。 精子膜与精子的获能、顶体反应、精卵结合等生殖过程密切相关，该膜损伤 可导致精子正常功能的丧失。评价精子膜生理、生化功能的完整性，对确定精子 生育力是一个不可缺少的重要方面。 精子膜能选择性地转运膜内外分子成分。研究表明，当精子暴露于低渗环境 中时，细胞膜即将水泵入膜内，以保持细胞内外环境渗透压的平衡。水的流入， 增加了精子体积与其表面积的比率，引起细胞膜肿胀。这一肿胀现象以精子尾部 最为明显，故精子尾低渗肿胀现象是精子膜正常转运水分子的标志。 检测精子尾低渗肿胀能力可用来评价精子的膜功能是否正常。该试验可作为 检测男性生育力的手段，并可应用于男性生殖的基础研究及不育的临床诊治。 近年来，常用该法评价杀精剂对精子膜功能的影响。 [学生作业] 绘图实验中观察到的现象并讨论临床常用避孕方法 (张晓丽) 实验 3 小鼠血脑屏障实验 【导言】 血脑屏障是指脑毛细血管壁与神经胶质细胞形成的血浆与脑细胞之间的屏障和 由脉络丛形成的血浆和脑脊液之间的屏障，可以阻挡病原微生物及毒性产物、异 物颗粒包括染料颗粒等从血流进入脑组织和脑脊液内，从而保护中枢神经系统免 受损害。中枢神经系统的神经元在正常活动时，需要一个稳定的内环境，这种稳 定性的实现有赖于血脑屏障的存在
周细胞星形胶质细胞脚板吞饮小泡一内皮细胞线粒体基膜紫密连接【实验步骤】1、部分小鼠静脉推注甘露醇。2、用1ml无菌注射器吸取5%台盼蓝水溶液经尾静脉注入两只小鼠体内，每只0.7ml，更换注射器，给其中一只小鼠颅内注射生理盐水0.1ml。3、5-10分钟后观察小鼠皮肤，尤其是眼、嘴的颜色变化。4、于30-60分钟，见小鼠眼、嘴呈现蓝色，即室息死亡，腹部向下固定。5、由头到尾沿背中线剪开皮肤，暴露皮下、肌肉和内脏，观察颜色变化。6、小心部开颅骨和椎骨，暴露脑和脊髓，与皮下、肌肉及内脏比较；并比较3只小鼠（正常小鼠、台盘蓝注射小鼠、静脉推注甘露醇+台盘蓝注射小鼠）有何不同。【实验观察】小鼠体内的肝脏、肺、小肠、胃等内脏器官已变蓝，而脑和脊髓组织没有变蓝，说明血脑屏障结构的存在。【教师点评】血脑屏障的构成及存在的意义【学生作业】临床上，血脑屏障的存在限制了临床用药的有效性，请查阅资料，写一篇关于“临床上为提高中枢神经系统用药有效性的方法”的综述
【实验步骤】 1、部分小鼠静脉推注甘露醇。 2、用 1ml 无菌注射器吸取 5%台盼蓝水溶液经尾静脉注入两只小鼠体内，每只 0.7ml，更换注射器，给其中一只小鼠颅内注射生理盐水 0.1ml。 3、5-10 分钟后观察小鼠皮肤，尤其是眼、嘴的颜色变化。 4、于 30-60 分钟，见小鼠眼、嘴呈现蓝色，即窒息死亡，腹部向下固定。 5、由头到尾沿背中线剪开皮肤，暴露皮下、肌肉和内脏，观察颜色变化。 6、小心剖开颅骨和椎骨，暴露脑和脊髓，与皮下、肌肉及内脏比较；并比较 3 只小鼠（正常小鼠、台盘蓝注射小鼠、静脉推注甘露醇+台盘蓝注射小鼠）有何 不同。 【实验观察】 小鼠体内的肝脏、肺、小肠、胃等内脏器官已变蓝，而脑和脊髓组织没有变蓝， 说明血脑屏障结构的存在。 【教师点评】 血脑屏障的构成及存在的意义 【学生作业】 临床上，血脑屏障的存在限制了临床用药的有效性，请查阅资料，写一篇关于“临 床上为提高中枢神经系统用药有效性的方法”的综述
（李春阳）实验4.肺组织结构特点与急性肺淤血、肺水肿【导言】由于肺结构蔬松，肺循环压力低、血流阻力低和血容量大的特点以及肺静脉无瓣膜，因此肺血管直接受左心室舒张末期压力的影响，易导致肺淤血水肿。大剂量给予肾上腺素，一方面可激活肾上腺素α受体，使体循环血管剧烈收缩，心脏后负荷明显增加，而肺血管反应轻收缩弱，导致肺部淤血水肿。另一方面大剂量的肾上腺素可激活肾上腺素β受体，可使心动过速，引起左心衰竭，左心室不能把注入的血液充分排出，左心室舒张未期压力递增，可引起左心房的压力增高，肺静脉回流受阻而发生淤血，肺毛细管流体静压随之增高，一旦超过血浆胶体渗透压，组织液形成增多，造成肺水肿。本实验通过注射大剂量肾上腺素制作大鼠急性肺淤血水肿动物模型，观察急性肺淤血水肿后的临床表现及肺组织结构变化；然后分组讨论汇报实验结果，并讨论肾上腺素引起肺淤血水肿的机制；根据镜下观察到的肺淤血水肿的病理特点来解释注射肾上腺素后出现的临床症状；最后由老师总结点评，并提供临床病例，学生分组讨论汇报。【实验目的】1、掌握通过注射大剂量肾上腺素制作大鼠急性肺淤血水肿动物模型的方法2、观察大鼠急性肺淤血水肿的表现并分析发生机制。3、掌握肺组织取材、固定、HE染色的方法。【教学方案】实验准备1、准备教学课件，主要讲述肺组织学结构特点、肺血液循环特点、肺淤血水肿的病理学特点、肺淤血水肿的病理生理学机制。2、形态学实验教学平台准备准备实验用大鼠、药剂（肾上腺素、生理盐水、HE染色相关试剂）、注射器、大鼠固定器、天平、手术相关器械。实验步骤1、教师利用多媒体课件讲述肺组织结构特点及急性肺淤血水肿
（李春阳） 实验 4. 肺组织结构特点与急性肺淤血、肺水肿 【导言】 由于肺结构疏松，肺循环压力低、血流阻力低和血容量大的特点以及肺静脉无瓣 膜，因此肺血管直接受左心室舒张末期压力的影响，易导致肺淤血水肿。大剂量 给予肾上腺素，一方面可激活肾上腺素α受体，使体循环血管剧烈收缩，心脏后 负荷明显增加，而肺血管反应轻收缩弱，导致肺部淤血水肿。另一方面大剂量的 肾上腺素可激活肾上腺素β受体，可使心动过速，引起左心衰竭，左心室不能把 注入的血液充分排出，左心室舒张末期压力递增，可引起左心房的压力增高，肺 静脉回流受阻而发生淤血，肺毛细管流体静压随之增高，一旦超过血浆胶体渗透 压，组织液形成增多，造成肺水肿。 本实验通过注射大剂量肾上腺素制作大鼠急性肺淤血水肿动物模型，观察急性肺 淤血水肿后的临床表现及肺组织结构变化；然后分组讨论汇报实验结果，并讨论 肾上腺素引起肺淤血水肿的机制；根据镜下观察到的肺淤血水肿的病理特点来解 释注射肾上腺素后出现的临床症状；最后由老师总结点评，并提供临床病例，学 生分组讨论汇报。 【实验目的】 1、 掌握通过注射大剂量肾上腺素制作大鼠急性肺淤血水肿动物模型的方法 2、 观察大鼠急性肺淤血水肿的表现并分析发生机制。 3、 掌握肺组织取材、固定、HE 染色的方法。 【教学方案】 实验准备 1、准备教学课件，主要讲述肺组织学结构特点、肺血液循环特点、肺淤血水肿 的病理学特点、肺淤血水肿的病理生理学机制。 2、形态学实验教学平台准备准备实验用大鼠、药剂（肾上腺素、生理盐水、HE 染色相关试剂）、注射器、大鼠固定器、天平、手术相关器械。 实验步骤 1、教师利用多媒体课件讲述肺组织结构特点及急性肺淤血水肿