
体外抗原抗体反应概论
体外抗原抗体反应概论

1.高度特异性结合抗原与抗体的结合如同锁与匙的关系,其高度特异性的基础取决于抗原分子表面的抗原表位与抗体的抗原结合部位之间结构的互补性
1. 高度特异性结合 抗原与抗体的结合如同锁与匙的关系,其高 度特异性的基础取决于抗原分子表面的抗原 表位与抗体的抗原结合部位之间结构的互补 性

可逆性表面结合抗原与抗体的结合是分子表面非共价的结合(依赖氢键、范德华力、静电吸引力、蔬水性作用等),故其结合是可逆性的。结合形成的免疫复合物在一定条件下可解离,解离后的抗原与抗体仍保留原有的性质
2. 可逆性表面结合 抗原与抗体的结合是分子表面非共价的结 合(依赖氢键、范德华力、静电吸引力、 蔬水性作用等),故其结合是可逆性的。 结合形成的免疫复合物在一定条件下可解 离,解离后的抗原与抗体仍保留原有的性 质

3.适当的浓度抗原与抗体混合后几秒钟内即可发生结合但能否出现可见反应还取决于参与反应双方的分子比例是否适当,若不适当,虽可形成免疫复合物,但肉眼不可见。其机理可用Marrack提出的格子学说来解释:
3 . 适当的浓度 抗原与抗体混合后几秒钟内即可发生结合, 但能否出现可见反应还取决于参与反应双方 的分子比例是否适当,若不适当,虽可形成 免疫复合物,但肉眼不可见。 其机理可用Marrack提出的格子学说来解释:

可出现可见反应Ag与Ab的比例适当梦Ag过剩Ab过剩不出现可见反应
Ag与Ab的比例适当 Ag过剩 Ab过剩 Ag过剩 A 出现可见反应 可出现可见反应 不出现可见反应

反应影响因素(1)电解质:Ag、Ab多为蛋白质,在中性或碱性条件下,两者结后亲水性减弱,从而使反应第一阶段已形成的抗原抗体复合物彼此进一步连接,出现明显凝集物或沉淀物。(2)温度:Ag、Ab结合出现可见反应受温度影响较大,在较高的温度下,两者碰撞的机会较多,反应速度可加快。温度过高,Ag、Ab会变性失活。通常反应温度为37℃左右。(3)酸碱度:pH太高或太低均直接影响Ag、Ab的性质,通常采用pH6-8进行反应
4 . 反应影响因素 (1)电解质:Ag、Ab多为蛋白质,在中性或碱性条件下 ,两者结后亲水性减弱,从而使反应第一阶段已形成的 抗原抗体复合物彼此进一步连接,出现明显凝集物或沉 淀物。 (2)温度:Ag、Ab结合出现可见反应受温度影响较大, 在较高的温度下,两者碰撞的机会较多,反应速度可加 快。温度过高,Ag、Ab会变性失活。通常反应温度为 37℃左右。 (3)酸碱度:pH太高或太低均直接影响Ag、Ab的性质, 通常采用pH6-8进行反应

抗原抗体反应的类型经典的反应凝集反应(agglutination)沉淀反应(precipitation)抗原抗体反应类型补体结合实验中和实验现免疫酶标技术(eg.ELISA)代的反应免疫荧光技术放射免疫技术发光免疫技术
抗原抗体反应的类型 凝集反应(agglutination) 沉淀反应(precipitation) 补体结合实验 中和实验 免疫酶标技术(eg. ELISA) 免疫荧光技术 放射免疫技术 发光免疫技术 经 典 的 反 应 现 代 的 反 应 抗 原 抗 体 反 应 类 型

抗原抗体反应的分类经典的血清学反应反应类型抗原类型及例子凝集反应颗粒性Ag,如细菌、RBC、表面结合可溶性Ag的乳胶颗粒等沉淀反应可溶性Ag,如血清中免疫球蛋白、补体、AFP、HBsAg等补体结合有补体参与,SRBC和其溶血素组成指示系统实验中和实验特殊作用的Ag,如病毒、毒素、激素、酶等
反应类型 抗原类型及例子 凝集反应 颗粒性Ag,如细菌、RBC、表面结合可溶性 Ag的乳胶颗粒等 沉淀反应 可溶性Ag,如血清中免疫球蛋白、补体、 AFP、HBsAg等 补体结合 实验 有补体参与,SRBC和其溶血素组成指示系统。 中和实验 特殊作用的Ag,如病毒、毒素、激素、酶等 抗原抗体反应的分类 经典的血清学反应

现代的抗原抗体反应现代抗原抗体反应用标记技术代替传统的肉眼可见反应,其特异性、敏感性均增加,且可以定性、定量其至定位:但往往需要特殊精密检测仪名称标记物缺点检测仪器酶酶标仪免疫酶标技术荧光素免疫荧光技术荧光显微镜或流式细胞仪放射性污染液闪仪放射免疫测定同位素有半衰期发光剂化学发光免疫化学发光免疫分析仪检测
现代的抗原抗体反应 现代抗原抗体反应用标记技术代替传统的肉眼可 见反应,其特异性、敏感性均增加,且可以定性、定 量甚至定位;但往往需要特殊精密检测仪。 名称 标记物 检测仪器 缺点 免疫酶标技术 酶 酶标仪 免疫荧光技术 荧光素 荧光显微镜或流式细胞 仪 放射免疫测定 同位素 液闪仪 放射性污染, 有半衰期 化学发光免疫 检测 发光剂 化学发光免疫分析仪

凝集反应【实验内容】1.直接凝集试验(玻片法、试管法)2.间接凝集试验(正相、反相)
凝集反应 【实验内容】 1.直接凝集试验(玻片法、试管法) 2.间接凝集试验(正相、反相)