第八章小鼠腹水型肝癌淋巴道转移实验研究（三）形态学实验室2026年1月28日
2026年1月28日 1 第八章 小鼠腹水型肝癌淋巴 道转移实验研究（三） 形态学实验室
实验目的1：通过可移植性小鼠腹水癌淋巴道转移实验，从感性上认识肿瘤侵袭与转移的生物学特性，了解肿瘤动物实验模型建立的过程及意义。2.进一步了解抽取腹水、细胞计数、细胞接种的过程。3.加深对学生科研思想的培养及实验技能的训练22026年1月28日
2026年1月28日 2 1．通过可移植性小鼠腹水癌淋巴道转移实验，从 感性上认识肿瘤侵袭与转移的生物学特性，了解 肿瘤动物实验模型建立的过程及意义。 2．进一步了解抽取腹水、细胞计数、细胞接种的 过程。 3．加深对学生科研思想的培养及实验技能的训练。 实验目的
实验过程1：HE切片染色程序与方法①切片脱蜡水洗（与脱水过程相反）将烘干之切片浸入二甲苯I、II各5~10min（非常关键，宁长勿短，主要目的是为了将石蜡洗掉）无水酒精3-5~10min（消除二甲苯）95%酒精1~3min80%酒精1~3min70%酒精1~3min50%酒精1~3min32026年1月28日
2026年1月28日 3 实验过程 1．HE切片染色程序与方法： ①切片脱蜡水洗（与脱水过程相反） 将烘干之切片浸入二甲苯Ⅰ、Ⅱ 各 5~10min（非 常关键，宁长勿短，主要目的是为了将石蜡洗掉） 无水酒精 3-5~10min（消除二甲苯） 95%酒精 1~3min 80%酒精 1~3min 70%酒精 1~3min 50%酒精 1~3min
自来水冲洗5min以上（洗去切片上的酒精切片透明）蒸馏水清洗（防止污染苏木素染液）脱蜡是水化过程，目的是通过酒精的缓冲作用，易于水洗与染色。因为染液溶剂是水，从无水酒精直接放入染液中，容易引起激烈的扩散作用，造成切片漂浮脱落或损伤组织。而经各级浓度之酒精缓冲后即可避免发生这种现象。2026年1月28日
2026年1月28日 4 自来水冲洗 5min 以上（洗去切片上的酒精， 切片透明） 蒸馏水清洗 （防止污染苏木素染液） 脱蜡是水化过程，目的是通过酒精的缓冲作用， 易于水洗与染色。因为染液溶剂是水，从无水 酒精直接放入染液中，容易引起激烈的扩散作 用，造成切片漂浮脱落或损伤组织。而经各级 浓度之酒精缓冲后即可避免发生这种现象
②HE染色苏木素一伊红染色是先用苏木精将组织切片适当的过染，经水洗后再用盐酸酒精分化，弱碱性水溶液显蓝。使胞核呈鲜明的蓝色，胞浆及背景无色。再经水洗后用伊红染胞浆，染成深浅不同程度的粉红色至红色。52026年1月28日
2026年1月28日 5 ②HE染色 苏木素—伊红染色是先用苏木精将组织切片适 当的过染，经水洗后再用盐酸酒精分化，弱碱 性水溶液显蓝。使胞核呈鲜明的蓝色，胞浆及 背景无色。再经水洗后用伊红染胞浆，染成深 浅不同程度的粉红色至红色
苏木浸染（染核）5~15min（统一时间10min）自来水冲洗3~5min0.5~1%盐酸酒精溶液分化数秒钟（分化）自来水洗1~5min弱碱性水溶液显蓝30~60秒（或60℃热水5min）自来水冲洗5~10min蒸馏水洗1~2次伊红1min蒸馏水洗1~2次62026年1月28日
2026年1月28日 6 苏木浸染（染核）5~15min（统一时间10min） 自来水冲洗3~5min 0.5~1%盐酸酒精溶液分化数秒钟（分化） 自来水洗1~5min 弱碱性水溶液显蓝30~60秒（或60℃热水5min） 自来水冲洗5~10min 蒸馏水洗1~2次 伊红1min 蒸馏水洗1~2次
③脱水、透明、封固脱水、透明的目的是可使存留在切片上的水分及漂浮的染色液全部除净，经透明剂的作用后将脱水剂清除出来，使切片产生出适宜的折光率。最后用盖玻片及封固剂封固，便于观察和长期保存。2026年1月28日
2026年1月28日 7 ③脱水、透明、封固 脱水、透明的目的是可使存留在切片上的水分 及漂浮的染色液全部除净，经透明剂的作用后， 将脱水剂清除出来，使切片产生出适宜的折光 率。最后用盖玻片及封固剂封固，便于观察和 长期保存
80%酒精30~40秒95%酒精30~60秒无水酒精I1~5min无水酒精ⅡI1~5min二甲苯I1~5min二甲苯I1~5min中性树胶封固82026年1月28日
2026年1月28日 8 80%酒精 30~40秒 95%酒精 30~60秒 无水酒精Ⅰ 1~5min 无水酒精Ⅱ 1~5min 二甲苯Ⅰ 1~5min 二甲苯Ⅱ 1~5min 中性树胶封固
2.结果观察显微镜观察淋巴结转移的分布与转移率2026年1月28日
2026年1月28日 9 2．结果观察 显微镜观察淋巴结转移的分布与转移率