本课内容第一章组织培养技术的基本理论知识第二章组织培养设施和基本条件第三章培养用液第四章清洗与消毒第五章基本培养技术第六章组织污染的检测与排除第七章肿瘤细胞培养
第一章 组织培养技术的基本理论知识 第二章 组织培养设施和基本条件 第三章 培养用液 第四章 清洗与消毒 第五章 基本培养技术 第六章 组织污染的检测与排除 第七章 肿瘤细胞培养 本课内容
第二节组织培养细胞生物学一、 体内外细胞的差异与分化二、培养细胞形态分类三、培养细胞的大体形态四、组织培养细胞的生长和增殖过程★概念1.细胞生长：细胞体积增大；2.细胞增殖：细胞数量增多
第二节 组织培养细胞生物学 一、体内外细胞的差异与分化 二、培养细胞形态分类 三、培养细胞的大体形态 四、组织培养细胞的生长和增殖过程 概念 1. 细胞生长：细胞体积增大； 2. 细胞增殖：细胞数量增多
一、体内外细胞的差异与分化它们的增殖方式是相同的，均赖于有丝分裂。牛体内、外细胞的差异关键在于细胞的分化，从而细胞分化是检测细胞差异的核心问题
一、体内外细胞的差异与分化 它们的增殖方式是相同的，均赖于有 丝分裂。 体内、外细胞的差异关键在于细胞的 分化，从而细胞分化是检测细胞差异的 核心问题
(一体内外细胞的差异心培养细胞最多见的表现：失去原有组织结构和细胞形态、分化减弱或不显、出现类似“反祖”现象；细胞趋单一化，或获得不死性，或变成具有恶性性状的细胞群。必每个细胞的生命活动，均听命于外源信号(来自其它细胞），通过相关基因的调控使之发生增殖或分化的表达。当细胞被离体培养后，信号来源切断，特定基因分化表达减弱或停止。而进化中保守的细胞增殖活动却可维持；遂使体内外细胞出现了差异
㈠体内外细胞的差异 培养细胞最多见的表现：失去原有组织结 构和细胞形态、分化减弱或不显、出现类似 “反祖”现象；细胞趋单一化，或获得不死 性，或变成具有恶性性状的细胞群。 每个细胞的生命活动，均听命于外源信号 （来自其它细胞），通过相关基因的调控， 使之发生增殖或分化的表达。当细胞被离体 培养后，信号来源切断，特定基因分化表达 减弱或停止。而进化中保守的细胞增殖活动 却可维持；遂使体内外细胞出现了差异
(二)培养细胞的分化1细胞分化的概念：是指同一来源的细胞通过分裂逐渐产生结构和功能上稳定性差异的过程。即一种类型的细胞在形态结构、生理功能和生物化学特性方面稳定地转变为另一类型细胞的过程1细胞分化的机制：极其复杂。是细胞与细胞、细胞与体液和细胞与细胞外基质相互作用下，有众多基因参与、多阶段和多环节的动态演变过程
㈡培养细胞的分化 细胞分化的概念：是指同一来源的细胞通 过分裂逐渐产生结构和功能上稳定性差异的 过程。即一种类型的细胞在形态结构、生理 功能和生物化学特性方面稳定地转变为另一 类型细胞的过程。 细胞分化的机制：极其复杂。是细胞与细 胞、细胞与体液和细胞与细胞外基质相互作 用下，有众多基因参与、多阶段和多环节的 动态演变过程
培养细胞的分化1.不适应（Deadaptation）：细胞在原体内时所拥有的分化特性减弱或不显。因环境改变所致。2.多分化或去分化（Dedifferentiation）：细胞失去发生分化的能力。很可能是基因变异所致
1.不适应（Deadaptation）:细胞在原体 内时所拥有的分化特性减弱或不显。 因环境改变所致。 2.多分化或去分化 （Dedifferentiation）：细胞失去发 生分化的能力。很可能是基因变异所 致。 培养细胞的分化
+细胞分化的关键?在于是否存在有诱导细胞发生分化的因子如在培养液中存在有相应的因子时，体外培养细胞同样能发生分化现象，如Friend细胞（小鼠红白血病细胞）在一定条件下可以合成而红蛋白，标志着肿瘤细胞向正常细胞状态转变。细胞恶变的本质是细胞增殖生长和分化调控的失控。诱导细胞发生分化是癌细胞逆转的表现。培养细胞是研究分化最理想的实验对象
在于是否存在有诱导细胞发生分化的因子 • 如在培养液中存在有相应的因子时，体外 培养细胞同样能发生分化现象。 • 如Friend细胞（小鼠红白血病细胞）在一 定条件下可以合成血红蛋白，标志着肿瘤 细胞向正常细胞状态转变。细胞恶变的本 质是细胞增殖生长和分化调控的失控。诱 导细胞发生分化是癌细胞逆转的表现。培 养细胞是研究分化最理想的实验对象。 细胞分化的关键
二、 培养细胞形态分类成纤维型细胞上皮型细胞贴附型游走型细胞1培养细胞形态多形型细胞悬浮型
二、培养细胞形态分类 培养细胞形态 悬浮型 多形型细胞 游走型细胞 上皮型细胞 成纤维型细胞 贴附型
贴附型细胞：在培养时能贴附在支持物表面生长悬浮型细胞：不贴壁，悬浮生长如某些癌细胞和白血病细胞。胞体圆形。优点：生存空间大，容许长时间生长，能产生多量细胞，便于做细胞代谢研究
贴附型细胞：在培养时能贴附在 支持物表面生长。 悬浮型细胞：不贴壁，悬浮生长， 如某些癌细胞和白血病细胞。胞 体圆形。 • 优点：生存空间大，容许长时间 生长，能产生多量细胞，便于做 细胞代谢研究
·成纤维型细胞成纤维型细胞：细胞呈梭形或不规则三角形中央有卵圆形核，胞质向外伸出2~3个突起。呈放射状、火焰状或漩涡状走行。中胚层间充质起源的组织
成纤维型细 胞：细胞呈 梭形或不规 则三角形， 中央有卵圆 形核，胞质 向外伸出 2~3个突起。 呈放射状、 火焰状或漩 涡状走行。 中胚层间充 质起源的组 织。 •成纤维型细胞