复旦大学：《分子生物学理论与实验》教学课件_实验五 细胞总蛋白的提取及聚丙烯酰胺凝胶的制备

复旦大学：《药剂学 Pharmaceutics》课程教学课件（一）眼膏剂和凝胶

包括①凝胶电泳②细菌的转化和转染③核酸分子杂交④定点突变⑤PCR⑥RFLP⑦RAPD⑧DNA序列分析⑨目的基因的分离和转基因植物、转基因动物等技术

一 、基本概念 二、 发展历程 三、 基本原理和工艺过程 四、常用测试方法 五、应用举例 六、优势，缺陷 七、未来

第一节 DNA的提取与纯化 第二节 核酸凝胶电泳技术 第三节 核酸的分子杂交 第四节 基因扩增技术——PCR 第五节 DNA序列分析

前面我们所学的凝胶过滤法、离子交换法以及电泳等一系列分离纯化生物大分子的 手段，比起早期采用的盐析法，有机溶剂及等电点沉淀法等，分离效果要好得多。但是， 这些方法中，或是利用生物大分子在一定条件下不同的溶解度、电荷分布、总电荷的不 同，或是依据其分子的大小和形状的不同。一句话，多是利用生物分子间物理和化学性 质的差异来进行分离纯化的。由于这些方法的特异性比较低，加之待分离物质之间的物 化性质差异较小，常常要综合不同的分离方法。经过许多步骤才能使生物分子达到一定 的纯度

一、实验目的 了解等电聚焦的原理。通过蛋白质等电点的测定，掌握聚丙烯酰胺凝胶垂直管式等电聚焦电泳技术

1886年,A. Mayer 发现具有传染性的烟草花叶病毒; 1892年,D. Ivanovsky烟草花叶病病原体能通过 细菌滤器:一种能通过细菌滤器的”细菌毒素” 或极小的细菌” 1898年，M W Beijerinck对烟草花叶病病原体的研究 结果:能通过细菌滤器;可被乙醇沉淀而不失去 其感染性,能在琼脂凝胶中扩散;用培养细菌的 方法不能被培养出来,推测只能在植物活细胞 中生活；

一.实验目的 1.通过对热固性树脂等温固化曲线的测定,了解其固化历程,求取凝胶化时间,固化时间和固化反应表观活化能, 2.理解如何利用动态力学的方法来研究固化过程和学习到我们创立的研究热固性树脂和树脂基复合材料固化的动态扭振法

9外源基因表达产物的分离纯化 A重组蛋白分离纯化方法选择的基本原则 B离子交换层析 C凝胶层析 D亲和层析 E膜分离 F原核生物表达的重组蛋白质量检测