第五节 菌种的衰退、复壮和保藏
第五节 菌种的衰退、复壮和保藏
一、菌种的衰退及其防治 1、衰退：是指由于自发突变的结果，而使某种 原有一系列生物学性状发生量变或质变的现 象。 如原有形态性状变得不典型了，生长速 度变慢，代谢产物生产能力下降，致病菌对宿 主侵染力的下降，对外界不良条件包括低温、 高温或噬菌体侵染等抵抗能力的下降等
一、菌种的衰退及其防治 1、衰退：是指由于自发突变的结果，而使某种 原有一系列生物学性状发生量变或质变的现 象。 如原有形态性状变得不典型了，生长速 度变慢，代谢产物生产能力下降，致病菌对宿 主侵染力的下降，对外界不良条件包括低温、 高温或噬菌体侵染等抵抗能力的下降等
2、衰退的防止 （1）控制传代次数 （2）创造良好的培养条件 （3）利用不易衰退的细胞传代 （4）采用有效的菌种保藏方法
2、衰退的防止 （1）控制传代次数 （2）创造良好的培养条件 （3）利用不易衰退的细胞传代 （4）采用有效的菌种保藏方法
二、菌种的复壮 1、复壮的定义： 狭义复壮：指的是在菌种已在发生衰退的情况下，通 过纯种分离和测定典型性状，生产性能等指标，从 已衰退的群体中筛迁出少数尚未退化的个体，以达 到恢复原菌株固有的性状的相应措施。 广义的复壮：是一项积极的措施，即在菌种的典型特 征或生产性状尚未衰退前，主经常有意识地采服纯 种分离和生产性状的测定工作，以期众中选择到自 发的正变个体
二、菌种的复壮 1、复壮的定义： 狭义复壮：指的是在菌种已在发生衰退的情况下，通 过纯种分离和测定典型性状，生产性能等指标，从 已衰退的群体中筛迁出少数尚未退化的个体，以达 到恢复原菌株固有的性状的相应措施。 广义的复壮：是一项积极的措施，即在菌种的典型特 征或生产性状尚未衰退前，主经常有意识地采服纯 种分离和生产性状的测定工作，以期众中选择到自 发的正变个体
2、复壮的方法 1）纯种分离 通过纯种分离,可把退化菌 种细胞群体中一部分仍保持原有典型性 状的单细胞分离出来,经扩大培养,就可 恢复原菌株的典型性状。常用的分离纯 化的方法有平板稀释法、单细胞或单孢 子分离法等
2、复壮的方法 1）纯种分离 通过纯种分离,可把退化菌 种细胞群体中一部分仍保持原有典型性 状的单细胞分离出来,经扩大培养,就可 恢复原菌株的典型性状。常用的分离纯 化的方法有平板稀释法、单细胞或单孢 子分离法等
2）通过寄主体进行复壮 -对于寄生性的退化菌株,可回接到相 应寄主体上,以恢复或 提高其寄 生性能。 例如,根瘤菌属经人工移接,结瘤固氮能 力减退,将其回接到相应豆科寄主植物上, 令 其侵染结瘤,再从根瘤中分离出根瘤 菌,其结瘤固氮性能就可恢复甚至提高
2）通过寄主体进行复壮 -对于寄生性的退化菌株,可回接到相 应寄主体上,以恢复或 提高其寄 生性能。 例如,根瘤菌属经人工移接,结瘤固氮能 力减退,将其回接到相应豆科寄主植物上, 令 其侵染结瘤,再从根瘤中分离出根瘤 菌,其结瘤固氮性能就可恢复甚至提高
3）淘汰已衰退的个体 -例如对“5406”放线菌的分生孢子,采 用-10～-30℃处理5～7天,其死亡率达 80%,在抗低温的存活个体中,留下了未
3）淘汰已衰退的个体 -例如对“5406”放线菌的分生孢子,采 用-10～-30℃处理5～7天,其死亡率达 80%,在抗低温的存活个体中,留下了未
三、菌种的保藏 1、菌种保藏的原理 首先要挑选典型菌种的优良纯种,最好采 用它们的休 眠体(如分生孢子、芽孢等); 其次,创造一个最有利休眠的环境条件, 如干燥、低温、缺氧、避光、缺乏营养 以及添加保护剂等
三、菌种的保藏 1、菌种保藏的原理 首先要挑选典型菌种的优良纯种,最好采 用它们的休 眠体(如分生孢子、芽孢等); 其次,创造一个最有利休眠的环境条件, 如干燥、低温、缺氧、避光、缺乏营养 以及添加保护剂等
2、菌种保藏方法 1）斜面菌种低温保藏法-利用低温对微生 物生命活动有抑制作用的原理进行保藏。 把斜面菌种、固体穿刺培养物或菌悬液 等,直接放入4～5℃冰箱中。保藏时间一 般不超过3个月,到时必须进行移接传代, 再放回冰箱
2、菌种保藏方法 1）斜面菌种低温保藏法-利用低温对微生 物生命活动有抑制作用的原理进行保藏。 把斜面菌种、固体穿刺培养物或菌悬液 等,直接放入4～5℃冰箱中。保藏时间一 般不超过3个月,到时必须进行移接传代, 再放回冰箱
2）砂土管保藏法-将干燥砂粒与细土混合 后灭菌制成砂土管,然后接种保藏 。若把 砂土管放在低温或抽气后密封,效果更 佳。此法适用于产孢子及芽孢菌种的保 藏。保藏期1～10年 3）石蜡油封藏法-向培养好的菌种斜面上, 加入灭菌石蜡油,高出斜面1cm,然后蜡封 管口,放入冰箱。该法既可防止培养基水 分蒸发,又能使菌种与空气隔绝。保藏期 1～2年
2）砂土管保藏法-将干燥砂粒与细土混合 后灭菌制成砂土管,然后接种保藏 。若把 砂土管放在低温或抽气后密封,效果更 佳。此法适用于产孢子及芽孢菌种的保 藏。保藏期1～10年 3）石蜡油封藏法-向培养好的菌种斜面上, 加入灭菌石蜡油,高出斜面1cm,然后蜡封 管口,放入冰箱。该法既可防止培养基水 分蒸发,又能使菌种与空气隔绝。保藏期 1～2年