实验五 发芽测定 5.1发芽测定的意义 发芽能力基播种材制重题的品所，发葬定人为造最理相的环培条件，使利 批潜在的发芽能力能够充分表现出来。最终目的是了解该种批适于播种的程度，并比较不同 种批的使用价值。 为了使测定结果能够相互比较，并能在随机变异的范围内具有重现性，发芽测定必须 根据统一规定，在标准化的条件下进行。 52发芽测定条件 发芽测定必须在最适宜供试种子萌芽的条件下进行。种子发芽的必须条件是分 5.2.1水分通气 水分是种子发芽的首要条件。发芽的P21页 开启发芽皿即能满足发芽所需的氧气。 52.2混度 目前对发芽测定，规定的温度在致分为两类， 一类是恒温，另一类是变温。多数林木 种子发芽的测定使用的是恒温。圆面25或3 。有些树种则规定采用变温。例如20-30℃ 的变温，以模拟昼夜交替的温度变化，有利于种子发芽，采用变温时，每昼夜有16小时给 予较低温度，8小时给予较高的温度。 5.3发芽测定的方法 5.3.1测定样品的提取 发芽测定所需样品应酒 围，即使送检单位不要求测定净度， 首先用四分法将种子分成四份，从每份中随机提取25粒组成100粒。共取四个100粒， 即为四个 也以采用上次重复，但应在检验证中注明，特小粒种子用重复发芽法。0025克为一次一 25粒为 一次重 ▣样品数重有限或备系件不足时 5.3.2测定样品的预处理 发芽测定前种子是否需要预处理，用什么方法处理，这取决于被测定种子的基本特性， 同时也受种子质量情况的制约。 解除 般树种可以采取浸种处理加划 加速冬前根据休眠的原因来取适当的催芽处“ 例项 松 水龙 杉木、 黄连 胡枝 导，用 中何换水 主意水温与浸种时间。种子在水中浸泡太久，反而对芽不利 5.33置床 置床就是将经过预处理的种子安放于发芽基质上。视树种而不同，常用的发芽基质有 滤纸和细沙。目前除常用的培养皿，尚有培养盒，平板发芽器等
实验五 发芽测定 5.1 发芽测定的意义 发芽能力是播种材料最重要的品质，发芽测定就是人为创造最理想的环境条件，使种 批潜在的发芽能力能够充分表现出来。最终目的是了解该种批适于播种的程度，并比较不同 种批的使用价值。 为了使测定结果能够相互比较，并能在随机变异的范围内具有重现性，发芽测定必须 根据统一规定，在标准化的条件下进行。 5.2 发芽测定条件 发芽测定必须在最适宜供试种子萌芽的条件下进行。种子发芽的必须条件是水分、温 度、氧气、有些树种需要光照。 5.2.1 水分通气 水分是种子发芽的首要条件。发芽的 P21 页 开启发芽皿即能满足发芽所需的氧气。 5.2.2 温度 目前对发芽测定，规定的温度在致分为两类，一类是恒温，另一类是变温。多数林木 种子发芽的测定使用的是恒温。例如 25℃或 30℃。有些树种则规定采用变温。例如 20~30℃ 的变温，以模拟昼夜交替的温度变化，有利于种子发芽，采用变温时，每昼夜有 16 小时给 予较低温度，8 小时给予较高的温度。 5.3 发芽测定的方法 5.3.1 测定样品的提取 发芽测定所需样品应从净度测定后的纯净种子中提取，即使送检单位不要求测定净度， 发芽测定样品也应从纯净种子中提取。 首先用四分法将种子分成四份，从每份中随机提取 25 粒组成 100 粒。共取四个 100 粒， 即为四个重复。种粒大的可以 50 粒或 25 粒为一次重复。样品数量有限或设备条件不足时， 也可以采用三次重复，但应在检验证中注明，特小粒种子用重复发芽法。0.1~0.25 克为一次 重复。 5.3.2 测定样品的预处理 发芽测定前种子是否需要预处理，用什么方法处理，这取决于被测定种子的基本特性， 同时也受种子质量情况的制约。 具有休眠习性的种子，发芽测定之前根据休眠的原因，采取适当的催芽处理，解除休 眠，一般树种可以采取浸种处理加速发芽。例如：杉木、马尾松、黑松、赤松、云南松、油 松、水杉、落叶松、云杉、黄连木、胡枝子等，用始温为 45℃水浸种 24 小时，皂角用 100℃ 浸种所用的水最好更换几次。刺槐种子用 80℃始温浸种 24 小时，中间换水 2~3 次。 浸种要注意水温与浸种时间。种子在水中浸泡太久，反而对芽不利。 5.3.3 置床 置床就是将经过预处理的种子安放于发芽基质上。视树种而不同，常用的发芽基质有 滤纸和细沙。目前除常用的培养皿，尚有培养盒，平板发芽器等
每个培养皿整齐地安放100粒(0至围)种子。种粒之间保持 发芽种粒的排放应有一定规律，如下图，以便计算并减少错误， 重 、姓名和日期用铅笔，简地填写一张小标签，分别贴在培养皿不易磨损的地方，例如 底盘的外缘，以免引起差错。 5.4发芽测定的管理和观察载 5.4.1管理 .经常检查发芽环境的温度，仪器的温度同预定的温度相差不能超过1℃。 床（指纸 友芽床的水 下足时应及时加水理术 分也不能过 用指尖轻压发劳 大量的 氧化不有的养的缺应 ,将感染了霉南的种子取出（不要使它们触及健康的种粒），用清水冲洗数次，直到 水无混浊再放回原发芽床。发霉严重时整个滤纸和座垫，甚至整个培养皿都要更换。这些情 况在发芽记录表（附表5.1）中应有所记述。 00010 60 o00i0 A 000000 000000100 000 00 。00000 00 0 0.0 00 00 000000 0 00 0 图5.1100粒种子在发芽床上的排放图例 5.4.2观察记载 发芽测定情况要定期观察记载（见附表5.1）。为了更好地掌握发芽测定的全过程，最 好每天作一次观察记载。至少在规定的统计发芽势和发芽率的那一天，必须有记载。 5.4.3发芽测定的持续时间 发芽刷定的持续天数见天51。表中所列天数以置床之日起零起算。日不句括种子预州 理的时间，如果确认某样品已达到最高发芽率，也可在规定的时间以前结束测定。如到规定 的结束时间仍有较多的种粒萌发，也可的情延长测定时间。发芽测定所用实际天数应在检验 报告中填明。 记载项目：按发芽床的编号依次记载以下各点（见附表5.1）。 表51常用树种发芽测定的主要技术规定（摘要） 树种 温度发芽势发芽率 备注
每个培养皿整齐地安放 100 粒（种粒大时可为 50 粒乃至 25 粒）种子。种粒之间保持 的距离大约相当于种粒本身的 1~4 倍，以减少霉菌蔓延感染，避免发芽的幼根相互缠绕。 发芽种粒的排放应有一定规律，如下图，以便计算并减少错误，将样品登记表的号数， 重复号、姓名和日期用铅笔，简地填写一张小标签，分别贴在培养皿不易磨损的地方，例如 底盘的外缘，以免引起差错。 5.4 发芽测定的管理和观察载 5.4.1 管理 a．经常检查发芽环境的温度，仪器的温度同预定的温度相差不能超过±1℃。 b．保持发芽床的水分。水分不足时应及时加水，但水分也不能过多，用指尖轻压发芽 床（指纸床），如指尖周围出现水膜，或者种粒四周出现水膜。都表示水分过多。 c．通气种子发芽需要足够的氧气，并会释放出大量的二氧化碳。有盖的培养皿的缺点 之一就是通气不良，应当经常揭开盖子充分换气。 d．将感染了霉菌的种子取出（不要使它们触及健康的种粒），用清水冲洗数次，直到 水无混浊再放回原发芽床。发霉严重时整个滤纸和座垫，甚至整个培养皿都要更换。这些情 况在发芽记录表（附表 5.1）中应有所记述。 图 5.1 100 粒种子在发芽床上的排放图例 5.4.2 观察记载 发芽测定情况要定期观察记载（见附表 5.1）。为了更好地掌握发芽测定的全过程，最 好每天作一次观察记载。至少在规定的统计发芽势和发芽率的那一天，必须有记载。 5.4.3 发芽测定的持续时间 发芽测定的持续天数见天 5.1。表中所列天数以置床之日起零起算。且不包括种子预处 理的时间，如果确认某样品已达到最高发芽率，也可在规定的时间以前结束测定。如到规定 的结束时间仍有较多的种粒萌发，也可酌情延长测定时间。发芽测定所用实际天数应在检验 报告中填明。 记载项目：按发芽床的编号依次记载以下各点（见附表 5.1）。 表 5.1 常用树种发芽测定的主要技术规定（摘要） 树种 温度 发芽势 发芽率 备注 1 2 3 4 5 5 5
(℃)终止天数 终止天数 25 福建相 25 12 侧柏 9 湿地松 20-30 11 103 思茅松、黑松、云南松 25 10 21 昼夜光照8小时 马尾松、杉木 25 10 金钱 25 16 2 柳杉 25 14 水 25 木麻黄 重量法芽法，每昼夜光照8小时 20-30 30 除去蜡层，每昼夜光8小时 杜 23 7 在胚根一端将外皮轻划一刀，室温水浸24小时 香椿 25 8 12 室温水浸种24小时 25 100℃水浸种2分种 30 8 11 重量发芽法，每夜光8小同 柠檬按 25 重量发芽法 隆缘包 23 9 重量发芽法 兰核 20-30 重量发芽法：每昼夜光照8小时 始温80℃水浸24小时剩余硬粒再用始温80℃浸24 刺快 20-30 10 小时每昼夜光照8小时 杨属 2030 6 收 木荷 25 7 30 正常发芽粒：生出正常胚根，且其长度大于该种粒 一半的称为正常发芽粒，对、柳、 于该种的长度。竹类种子止常 手粒的幼根 y的 h 胚根发自珠孔以外的部位：种壳曝裂或脱落：胚根拳曲： 芽无根或根短而生长迟滞。有时需将难于判断的发芽粒特别提出另外培养，以便确定是否为 异状发芽。 腐烂粒：内含物腐败成胶状的无生命种子称腐烂粒，应及时提出并在表格中记述，但 不能把感染霉菌的种子混同为腐烂粒。 未发芽粒：每次别除发芽粒，异状发芽粒和腐烂粒之后将余下的未发芽粒重新排放整 齐，并点数 以便及的核 左错 成以下 验终止日期后，分组用切开法对尚未发芽的种粒进行补充鉴定，分别 6 d.涩粒（多见天杉木、柳杉）。 5.5计算发芽结果 发芽测定结束，并对尚未发芽的种子用切开法作了鉴定以后，进行以下各项计算记入 附表
（℃） 终止天数 终止天数 柏木 25 2 35 昼夜光照 8 小时 福建柏 25 12 28 侧柏 25 9 20 湿地松 20~30 11 28 思茅松、黑松、云南松 25 10 21 马尾松、杉木 25 10 20 金钱松 25 16 25 柳杉 25 14 25 水杉 25 9 16 木麻黄 30 8 15 重量法芽法，每昼夜光照 8 小时 乌柏 20~30 10 30 除去蜡层，每昼夜光照 8 小时 杜仲 23 7 12 在胚根一端将外皮轻划一刀，室温水浸 24 小时 香椿 25 8 12 室温水浸种 24 小时 阳思树 25 7 21 100℃水浸种 2 分种 桑树 30 8 15 重量发芽法，每昼夜光照 8 小时 柠檬桉 25 5 11 重量发芽法 隆缘桉 25 5 9 重量发芽法 兰桉 20~30 5 14 重量发芽法：每昼夜光照 8 小时 刺槐 20~30 5 10 始温 80℃水浸 24 小时剩余硬粒再用始温 80℃浸 24 小时每昼夜光照 8 小时 杨属 20~30 3 6 重量发芽法 木荷 25 7 30 正常发芽粒：生出正常胚根，且其长度大于该种粒一半的称为正常发芽粒，对、柳、 桉等细粒种子，胚根的长度应不少于该种粒的长度。竹类种子正常发芽粒的幼根应至少同该 种粒等长且幼芽的长度超过该种粒长度的二分之一。苦楝、柚木等复粒种子，其中只要有一 粒种子正常发芽即可作为正常发芽数。符合定义的正常发芽粒用小镊子取出。 异状发芽粒：指胚根短而生长迟滞；胚根呈负向地性；胚根萌发异常纤弱；胚根腐坏； 胚根发自珠孔以外的部位；种壳曝裂或脱落；胚根拳曲；子叶先出；竹类种子有根无芽、有 芽无根或根短而生长迟滞。有时需将难于判断的发芽粒特别提出另外培养，以便确定是否为 异状发芽。 腐烂粒：内含物腐败成胶状的无生命种子称腐烂粒，应及时提出并在表格中记述，但 不能把感染霉菌的种子混同为腐烂粒。 未发芽粒：每次剔除发芽粒，异状发芽粒和腐烂粒之后将余下的未发芽粒重新排放整 齐，并点数，以便及时核查，避免差错。 5.4.4 到达发芽试验终止日期后，分组用切开法对尚未发芽的种粒进行补充鉴定，分别 归成以下几类记入附表。 a．新鲜健康粒； b．腐烂粒； c．空粒； d．涩粒（多见天杉木、柳杉）。 5.5 计算发芽结果 发芽测定结束，并对尚未发芽的种子用切开法作了鉴定以后，进行以下各项计算记入 附表
5.5.1发芽率（实验室发芽率、技术发芽率） 发芽率(%)-是×100 式中， 一在规定条件下，规定期内的正常发芽粒数 ”一供试种子数 发芽率计算到小数点后一位，以下四舍五入。 表52发芽百分率的最大容许差距，用以决定是否要重做测定，只考虑随机取样的变异 平均发芽百分率 最大容许差距 3 6 4 8 9 93-9 7-8 10 91-92 9-10 89.90 11-12 87-s8 84-8C 15-17 81-83 18-20 78-80 21-23 16 73-7 2428 67-7 29-34 56-66 35.45 51-55 46.50 20 发芽率按组计算，然后计算四组的算术平均值。 平均值不带小数，组间的允许误差表 一测美菜没有超过容许误差，测定结果可以认为是正确的，即以各组的平均百分数作为本沙 则认为测定结果不正确， 需进行第二次测定 二次测 查的方法是规定计算两次的平均影 并在表5.3中查出最大 差距，如？次的结果相差不超过表53所规定的容许差距，则测定是符合的。如超过容许误 差，则应再测定。 表5.3判断两次测定是否符合的容许差距只考唐随机取样的变异 平均发芽百分率 最大容许差距 98-99 23 2 95-97 4-6 3 91-94 7-10 6
5.5.1 发芽率（实验室发芽率、技术发芽率） (%) = 100 N n 发芽率 式中：n——在规定条件下，规定期内的正常发芽粒数； N——供试种子数。 发芽率计算到小数点后一位，以下四舍五入。 表 5-2 发芽百分率的最大容许差距，用以决定是否要重做测定，只考虑随机取样的变异 平均发芽百分率 最大容许差距 99 2 5 98 3 6 97 4 8 96 5 9 95 6 10 93-94 7-8 10 91-92 9-10 11 89-90 11-12 12 87-88 13-14 13 84-86 15-17 14 81-83 18-20 15 78-80 21-23 16 73-77 24-28 17 67-72 29-34 18 56-66 35-45 19 51-55 46-50 20 发芽率按组计算，然后计算四组的算术平均值。平均值不带小数，组间的允许误差表 5.2 如果没有超过容许误差，测定结果可以认为是正确的，即以各组的平均百分数作为本次 测定结果。 如果超过容许的误差范围，则认为测定结果不正确，需进行第二次测定。第二次测定 （也以与上次同时做）的结果和第一次测定结果之差附合规定时，则用两次测定的平均数作 为发芽率，填入检验证。检查的方法是规定计算两次的平均数，并在表 5.3 中查出最大容许 差距，如？次的结果相差不超过表 5.3 所规定的容许差距，则测定是符合的。如超过容许误 差，则应再测定。 表 5.3 判断两次测定是否符合的容许差距只考虑随机取样的变异 平均发芽百分率 最大容许差距 98-99 2-3 2 95-97 4-6 3 91-94 7-10 4 85-90 11-16 5 77-84 17-24 6
60-76 25-41 > 51-59 42-50 5.5.2发芽势 在规定时间（见表5.1，一般是发芽达到高峰以前）内正常发芽的种子的种子数占供试 种子数百分比 粉光是后末和之的平药面，发穿为计到个黄行一位的 5.5.3绝对发芽率 供试种子中饮满种子的发芽率称为绝对发芽率。 绝对发芽率0=V2。x100 式中： 一正常发芽粒数 a 一供试种子的空粒种子数和涩粒数。 5.5.4平均发芽时间 平均发芽时间是指供试种子发芽所需的平均天数。 平均发芽时间的计算如下： 平约发等时间.盈Q4 M. 式中：D一种子置床以后的天数，以置床之日为0 M一相应各日的正常发芽粒数： 一终止天数，0,1,2.n。 平均发芽时间计算到小数点第二位，以下四舍五入。 思考题： 1,简述正常发芽粒的特征 未发芽粒分析 、组编 3 新鲜 使实 异状发芽粒 空 腐烂 总计 0%
60-76 25-41 7 51-59 42-50 8 5.5.2 发芽势 在规定时间（见表 5.1，一般是发芽达到高峰以前）内正常发芽的种子的种子数占供试 种子数百分比，称为发芽势。 发芽势也是分组计算，然后求四组之间的平均值。发芽势计算到小数点后一位，计算 时容许的误差为计算发芽率时所容许的 1.5 倍。 5.5.3 绝对发芽率 供试种子中饮满种子的发芽率称为绝对发芽率。 (%) 100 − = N a n 绝对发芽率 式中：n——正常发芽粒数； N——供试种子数 a——供试种子的空粒种子数和涩粒数。 5.5.4 平均发芽时间 平均发芽时间是指供试种子发芽所需的平均天数。 平均发芽时间的计算如下： − − • = n n M D M 1 0 1 1 0 1 1 ( ) 平均发芽时间 式中：D——种子置床以后的天数，以置床之日为 O; M——相应各日的正常发芽粒数； n——终止天数，i=0，1，2.n。 平均发芽时间计算到小数点第二位，以下四舍五入。 思考题： 1．简述正常发芽粒的特征 未发芽粒分析 组 编 类 型 1 2 3 4 新鲜 硬实 异状发芽粒 空粒 腐烂 总计 %
测定结果 、各组发芽值 2 平均值 项目 发芽率 发芽势 绝对发芽率 平均发芽速 发芽率组间最大差距 测宁结果合格() 误差 测定不合格()
测定结果 各组发芽值 项目 1 2 3 4 平均值 发芽率 发芽势 绝对发芽率 平均发芽 速 发芽率组间最大差距 测定结果合格（ ） 允许误差 测定不合格（ ） 测定人 年 月 日