第九章核糖体( ribosome) ●核糖体的类型与结构 ●多聚核糖体与蛋白质的合成
第九章 核糖体(ribosome) 核糖体的类型与结构 多聚核糖体与蛋白质的合成
第一节核糖体的类型与结构 核糖体是合成蛋白质的细胞器,其唯一的 功能是按照mRNA的指令由氨基酸高效且精确 地合成多肽链 ●核糖体的基本类型与成分 ●核糖体的结构 ●核糖体蛋白质与rRNA的功能分析
第一节 核糖体的类型与结构 核糖体是合成蛋白质的细胞器，其唯一的 功能是按照mRNA的指令由氨基酸高效且精确 地合成多肽链。 核糖体的基本类型与成分 核糖体的结构 核糖体蛋白质与rRNA的功能分析
核糖体的基本类型与成分 ●核糖核蛋白体简称核糖体 (ribosome) ◆基本类型 ◇附着核糖体 ◇游离核糖体 ◇70S的核糖体 ◇80S的核糖体 ◆主要成分 ◇r蛋白质:40%,核糖体表面 ◇rRNA:60%,核糖体内部
一、核糖体的基本类型与成分 核糖核蛋白体,简称核糖体(ribosome) 基本类型 附着核糖体 游离核糖体 70S的核糖体 80S的核糖体 主要成分 r蛋白质：40%，核糖体表面 rRNA:60%,，核糖体内部
核糖体的结构 ●结构与功能的分析方法 ●蛋白质合成过程中很多重要步骤 与50S核糖体大亚单位相关
二、核糖体的结构 结构与功能的分析方法 蛋白质合成过程中很多重要步骤 与50S核糖体大亚单位相关
结构与功能的分析方法 ◆离子交换树脂可分离纯化各种r蛋白; ◆纯化的r蛋白与纯化的rRNA进行核糖体的重组裝, 显示核糖体中r蛋自与rRNA的结构关系 ◆双向电泳技术可显示出Eco核糖体在装配各阶段中 与rRNA结合的蛋白质的类型 ◆双功能的交联剂和双向电泳分离可用于研究r蛋自在 结构上的相互关系 ◆电镜负染色与免疫标记技术结合,研究r蛋白在核糖 体的亚单位上的定位 ◆对RNA,特别是对16 S rrNa结构的研究 ◆70S核糖体的小亚单位中rRNA与全部的r蛋白关系 的空间模型
结构与功能的分析方法 离子交换树脂可分离纯化各种r蛋白； 纯化的r蛋白与纯化的rRNA进行核糖体的重组装， 显示核糖体中r蛋白与rRNA的结构关系 双向电泳技术可显示出E.coli核糖体在装配各阶段中， 与rRNA结合的蛋白质的类型 双功能的交联剂和双向电泳分离可用于研究r蛋白在 结构上的相互关系 电镜负染色与免疫标记技术结合，研究r蛋白在核糖 体的亚单位上的定位。 对rRNA，特别是对16S rRNA结构的研究 70S核糖体的小亚单位中rRNA与全部的r蛋白关系 的空间模型
◇同一生物中不同种类的r蛋白的一级结构 均不相同,在免疫学上几乎没有同源性 ◇不同生物同一种类r蛋白之间具有很高 的同源性,并在进化上非常保守
同一生物中不同种类的r蛋白的一级结构 均不相同，在免疫学上几乎没有同源性。 不同生物同一种类r蛋白之间具有很高 的同源性， 并在进化上非常保守
◇蛋白质结合到rRNA上具有先后层次性。 ◇核糖体的重组装是自我装配过程
蛋白质结合到rRNA上具有先后层次性。 核糖体的重组装是自我装配过程
◇16SRNA的一级结构是非常保守的 ◇16SRNA的二级结构具有更高的保守性 臂环结构(stem- cloop structure) ◇rRNA臂环结构的三级结构模型
16SrRNA的一级结构是非常保守的 16SrRNA的二级结构具有更高的保守性： 臂环结构(stem-loop structure) rRNA臂环结构的三级结构模型
蛋白质合成过程中很多重 要步骤与50S核糖体大亚单位相关 ◆涉及的多数因子为G蛋白(具有 GTPase活性),核糖体上 与之相关位点称为 GTPase相关位点 ◆最近人们成功地制备L11RNA复合物的晶体,获得了 其空间结构高分辨率的三维图象。 ◇这一结果证实了前人用各种实验技术所获得的种种结论 ◇提出直观、可靠且比人们的预料更为精巧复杂和可能的 作用机制,从而为揭开核糖体这一具有30多亿年历史的 古老的高度复杂的分子机器的运转奥秘迈出了极重要的 步
蛋白质合成过程中很多重 要步骤与50S核糖体大亚单位相关 涉及的多数因子为G蛋白(具有GTPase活性)，核糖体上 与之相关位点称为GTPase相关位点。 最近人们成功地制备L11-rRNA复合物的晶体，获得了 其空间结构高分辨率的三维图象。 这一结果证实了前人用各种实验技术所获得的种种结论 提出直观、可靠且比人们的预料更为精巧复杂和可能的 作用机制，从而为揭开核糖体这一具有30多亿年历史的 古老的高度复杂的分子机器的运转奥秘迈出了极重要的 一步
核糖体蛋白质与rRNA的功能分析 ●核糖体上具有一系列与蛋白质 合成有关的结合位点与催化位点 ●在蛋白质合成中肽酰转移酶的活性研究
三、核糖体蛋白质与rRNA的功能分析 核糖体上具有一系列与蛋白质 合成有关的结合位点与催化位点 在蛋白质合成中肽酰转移酶的活性研究
