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《分子病毒学》课程教学资源(PPT课件)第六章 病毒与原核生物的遗传学分析

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第一节 噬菌体(病毒)的遗传学分析 第二节 细菌杂交与基因定位 第三节 细菌转化与基因定位 第四节 细菌转导与基因定位
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第六章病毒与原核生 物的遗传学分析

第六章 病毒与原核生 物的遗传学分析

优点 .生活周期短 单倍体,无显隐性关系 研究方法简单 灵敏度高

优点: •生活周期短 •单倍体,无显隐性关系 •研究方法简单 •灵敏度高

第一节噬菌体(病毒)的遗传学分析 噬菌体的基本特征 温和噬菌体 烈性噬菌体

第一节 噬菌体(病毒)的遗传学分析 一、噬菌体的基本特征 •温和噬菌体 •烈性噬菌体

1. Head assembly and DNA packaging Initial head assembly 2. Tail assembly DNA Base plate assembly Core added to DNA packaging base plate /二 Sheath and Tail added to head 3. Tail fiber synthesis and assembly Tail fibers nature T4 phage

bacteria lysed 23 plaques Lawn of bacteria F A plaques fused) (no plaques) yer of nutrient agar plus Uninfected acteria virus mixture bacterial growth aque Base of agar

噬筮菌体杂交与基因定位 噬菌体的杂交方法混合感染(复感染、双重感染 重组合 重组频率= X100 重组合+亲组合 例:1955年 Kaiser的λ噬菌体实验 +++ X Smi col杂交 s:小噬菌斑,mi:微小噬菌斑,col:中央浑浊 小点的噬菌斑

二、噬菌体杂交与基因定位 噬菌体的杂交方法:混合感染(复感染、双重感染) 重组合 重组频率= x 100% 重组合+亲组合 例: 1955年 Kaiser 的λ噬菌体实验 + + + x s mi co1 杂交 s:小噬菌斑,mi:微小噬菌斑,co1:中央浑浊 小点的噬菌斑

类型数目合计百分比 S-col col- mis-mi +++975189990.8 s col mi724 s++30 6229 col mi 32 S co1 +61 1125.3 ++mi51 s mi 5 180.86 +col+13 2091 3.766.1682

类型 数目 合计 百分比 s-co1 co1-mi s-mi + + + s co1 mi 975 724 1899 90.8 s + + + co1 mi 30 32 62 2.9 √ √ s co1 + + + mi 61 51 112 5.3 √ √ s + mi + co1 + 5 13 18 0.86 √ √ 合计 2091 3.76 6.16 8.2

作图 3.76 c)6.16 mI 8.2+2x0.86=9.92

作图: 3.76 6.16 s co1 mi 8.2 + 2 x 0.86=9.92

第二节细菌杂交与基因定位 、E.coli的性因子 F因子(性因子、致育因子): 1946年 J Lederberg在大肠杆菌中有杂交现象,并 进一步发现了性因子F F因子共有15个基因,3.5x106道尔顿, 6x 104bp F+:含有F因子的细胞(菌株),具有性伞毛(接 合管) F:不含F因子的细胞(菌株)

第二节 细菌杂交与基因定位 一、E. coli 的性因子 1. F因子(性因子、致育因子): 1946年J. Lederberg 在大肠杆菌中有杂交现象,并 进一步发现了性因子F。 F因子共有15个基因,3 .5 x 106道尔顿, 6 x 104bp F +:含有F因子的细胞(菌株),具有性伞毛(接 合管) F -:不含F因子的细胞(菌株)

Strains grown separately in complete medium strain A Strain B met bio thrt leu thi met bio thr leu thi Mix A and B in complete medium: incubate overnight Plat n Plate on minimal medium minimal medium and incubate and incubate No growth A and B No growth (no prototrophs) met bio thr leu thi (no prototrophs) and mett bjo thr ley thi Plate on minimal medium and incubate Colonies of prototrophs

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