显微摄影技术 利用显微摄影装置拍摄显微镜（或解剖 镜)视野中物象的技术称为显微摄影。 > 显微摄影技术主要包括两个方面： 1)拍摄：需要一套完备的显微摄影装置 2)洗印放大：需要一个较好的暗室和成套的 洗印放大设备
显微摄影技术 ➢ 利用显微摄影装置拍摄显微镜(或解剖 镜)视野中物象的技术称为显微摄影。 ➢ 显微摄影技术主要包括两个方面： 1) 拍摄： 需要一套完备的显微摄影装置 2) 洗印放大：需要一个较好的暗室和成套的 洗印放大设备
显微摄影 (一）仪器与设 备 •进行显微摄影最 基本的仪器是： ·显微镜 ·显微镜摄影仪
一 、显微摄影 •(一)仪器与设 备 •进行显微摄影最 基本的仪器是： •显微镜 •显微镜摄影仪
1.显微摄影的要求 ·(1)载物台能在照相进行时粗 微调，且坚固，不松动。载 物台最好能作平面转动。 (2)座架和支架均需稳固，能 稳固地安装显微摄影仪，不 易受外部振动的影响。 ·(3)能进行聚光器的定心调整 并有孔经光阑与视场光阑。 。 (4)须有内藏式光源，可调节 光亮度，从低倍到高倍都能 得到均称的照明，在高倍时 能得到十分明亮的光。并备 有放置滤色镜的地方。 ·(5)具有优质的物镜和目镜
1.显微摄影的要求 • (1)载物台能在照相进行时粗 微调，且坚固，不松动。载 物台最好能作平面转动。 • (2)座架和支架均需稳固，能 稳固地安装显微摄影仪，不 易受外部振动的影响。 • (3)能进行聚光器的定心调整， 并有孔经光阑与视场光阑。 • (4)须有内藏式光源，可调节 光亮度，从低倍到高倍都能 得到均称的照明，在高倍时 能得到十分明亮的光。并备 有放置滤色镜的地方。 • (5)具有优质的物镜和目镜
2.显微摄影仪的必备条件 ·(1)要有能够连接显微照相机的装置。 ·(2)有一观察镜，能对显微镜视野进行 观察，从观察镜中能清晰地看标本。 ·(3)物象在观察镜中调至清晰时，也是 胶片成象最清晰之时。 ·(4)成象质量好，能较好地体现出原标 本的情况。 (好的显微摄影仪还附有测光强、测 色温、自动控制曝光时间的装置) ● ()显微摄影装置应放置在灰尘少，振 动少，干燥，半暗的房间中。放显微 镜的桌子要坚固平稳
2.显微摄影仪的必备条件 • (1)要有能够连接显微照相机的装置。 • (2)有一观察镜，能对显微镜视野进行 观察，从观察镜中能清晰地看标本。 • (3)物象在观察镜中调至清晰时，也是 胶片成象最清晰之时。 • (4)成象质量好，能较好地体现出原标 本的情况。 • (好的显微摄影仪还附有测光强、测 色温、自动控制曝光时间的装置) • (5)显微摄影装置应放置在灰尘少，振 动少，干燥，半暗的房间中。放显微 镜的桌子要坚固平稳
(二)材料与拭剥 ·1.材料 ·(1)活植物材料如幼小器官，活的组织切 片，细胞和原生质体，细胞团、愈伤组 织、植物表面等。材料新鲜无异物。 ·(2)死植物材料如各种植物组织的永久切 片（见树脂切片），被分离的细胞与细胞器 染色体的压片等。切片清洁无尘，无气 泡。所摄部份完整清晰
• 1.材料 • (1)活植物材料如幼小器官，活的组织切 片，细胞和原生质体，细胞团、愈伤组 织、植物表面等。材料新鲜无异物。 • (2)死植物材料如各种植物组织的永久切 片(见树脂切片)，被分离的细胞与细胞器， 染色体的压片等。切片清洁无尘，无气 泡。所摄部份完整清晰。 (二)材料与试剂
2.试剂 >显微摄影后胶卷需冲洗，显微摄 影常用显定影液的配方见表1 > 表1几种显微摄影常用显定影液的配方 项目 显 。影 液 停影 定 景影店 剂 D-19 D-72 F-7 F-5 温水(50℃)(m1) 750 750 500 500 米吐尔(g) 2.2 3.1 无水亚硫钠g) 90 45 15 15 对苯二酚g) 8.0 12 无水碳酸钠g) 48 67.5 氯化铵g) 50 溴化钾(g) 5 1.9 冰醋酸(28%)(g) 48.0 48 48 硫代硫酸钠g 360 240 硼酸(g) 7.5 7.5 钾矾(g) 15 15 加水至ml 1000 1000 1000 1000 1000 显影时间min) 底片 4一5 510 1520 1820℃ 相纸 1~1.50.751.50.30.5 5~10 1520
2.试剂 ➢ 显微摄影后胶卷需冲冼，显微摄 影常用显定影液的配方见表1 ➢ 表1几种显微摄影常用显定影液的配方 项 目 试 显 影 液 定 影 液 剂 D－19 D－72 停 影 液 F－7 F－5 温水(50℃)(ml) 750 750 500 500 米吐尔(g) 2.2 3.1 无水亚硫钠(g) 90 45 15 15 对苯二酚(g) 8.0 12 无水碳酸钠(g) 48 67.5 氯化铵(g) 50 溴化钾(g) 5 1.9 冰醋酸(28%)(g) 48.0 48 48 硫代硫酸钠(g) 360 240 硼酸(g) 7.5 7.5 钾矾(g) 15 15 加水至ml 1000 1000 1000 1000 1000 显影时间(min) 底片 4～5 5～10 15～20 18～20℃ 相纸 1～1.5 0.75～1.5 0.3～0.5 5～10 15～20
(三)操作方法及注意事项 ·1.安装显微摄影装置 ·将相机，显微镜和照明设备连一起，并 能在观察镜中看到所要拍摄的标本。 ·安装时，需先细读说明书，熟悉仪器结 构和功能，连接部位要稳固
(三)操作方法及注意事项 • 1.安装显微摄影装置 • 将相机，显微镜和照明设备连一起，并 能在观察镜中看到所要拍摄的标本。 • 安装时，需先细读说明书，熟悉仪器结 构和功能，连接部位要稳固
2.调整好显微镜 (1)聚光器和光源灯的调中 一显微摄影通常采用中心亮视野 透射照明法，摄影前，要把聚 光器和光源灯调中，使聚光器 中心与视场光阑的中心处于同 光轴上。光源灯的灯丝照明 于视野中心
2.调整好显微镜 • (1)聚光器和光源灯的调中 –显微摄影通常采用中心亮视野 透射照明法，摄影前，要把聚 光器和光源灯调中，使聚光器 中心与视场光阑的中心处于同 一光轴上。光源灯的灯丝照明 于视野中心
聚光器的调中步骤： ● ①转动聚光器升降旋钮使聚光器升至顶点 位置； ● ②接通光源灯的电源开关； ③将被摄的制片标本，放在载物台上，用 4×或10×低倍镜聚焦在样品上； ● ④缩小镜座上的视场光阑，在视野中可见 边缘模糊的视场光阑图象； ⑤微降聚光器，至视场光阑的图象清晰聚 焦止； ⑥用聚光器两个调节螺杆推动聚光器，使 缩小的视场光阑图象调至视野中心； ⑦开放视场光阑，使多角形的周边与视野 边缘完全重合； ● ⑧反复缩放视场光阑数次，确认光阑中心 和边缘与视野完全重合， ⑨使聚光器回复顶点位置
聚光器的调中步骤： • ①转动聚光器升降旋钮使聚光器升至顶点 位置； • ②接通光源灯的电源开关； • ③将被摄的制片标本，放在载物台上，用 4×或10×低倍镜聚焦在样品上； • ④缩小镜座上的视场光阑，在视野中可见 边缘模糊的视场光阑图象； • ⑤微降聚光器，至视场光阑的图象清晰聚 焦止； • ⑥用聚光器两个调节螺杆推动聚光器，使 缩小的视场光阑图象调至视野中心； • ⑦开放视场光阑，使多角形的周边与视野 边缘完全重合； • ⑧反复缩放视场光阑数次，确认光阑中心 和边缘与视野完全重合； • ⑨使聚光器回复顶点位置
光源灯调中方法可采用下法： ● 在视场光阑上面的滤 色镜座上，放一毛玻璃， 用以观察灯丝位置，转动 光源灯位置，使灯丝位于 视场光阑中心，然后固定 光源灯
光源灯调中方法可采用下法： • 在视场光阑上面的滤 色镜座上，放一毛玻璃， 用以观察灯丝位置，转动 光源灯位置，使灯丝位于 视场光阑中心，然后固定 光源灯