(四)供体母畜的配种 选择适当的时间,使用优良种公畜的精液对供体母 畜进行输精。 为了得到较多的发育正常的胚胎,使用密度大、活 率高的精液输精,并且将输精次数增加到2-3次,间隔 8-10h。 (五)胚胎的收集 是利用冲冼液将胚胎从生殖道内冲出,并收集在器 皿中。胚胎的收集分手术法和非手术法,前者适用于 各种家畜或动物,后者仅用于牛、马等大动物,且只 能在胚胎进入子宫角中才能进行。 胚胎收集的时间:一般在配种后3~8d,发育至4~8 细胞期后;牛胚胎最好在发育至桑椹胚晚期或胚泡早 期进行收集和移植
(四)供体母畜的配种 选择适当的时间,使用优良种公畜的精液对供体母 畜进行输精。 为了得到较多的发育正常的胚胎,使用密度大、活 率高的精液输精,并且将输精次数增加到2-3次,间隔 8-10h。 (五)胚胎的收集 是利用冲冼液将胚胎从生殖道内冲出,并收集在器 皿中。胚胎的收集分手术法和非手术法,前者适用于 各种家畜或动物,后者仅用于牛、马等大动物,且只 能在胚胎进入子宫角中才能进行。 胚胎收集的时间:一般在配种后3~8d,发育至4~8 细胞期后;牛胚胎最好在发育至桑椹胚晚期或胚泡早 期进行收集和移植
卵的收集 各种家畜的排卵时间和胚胎的发育速度 发育速度(排卵后天数) 畜别 排卵时间 2细 4细 8细 16细进入 胚泡 脱离透附植 胞 胞 胞 胞 子宫 形成 明带 开始 次 发情结束后 1- 10-11小时 2-3 3 4 1.5 3-4 7-8 9-11 22 绵 发情开始后 1.5 羊 24-30小时 1.5 2.5 3 2-4 6-7 7-8 15 2 猪 发情开始后 1-2 1-3 2-3 3.5 2- 6 35-45小时 5-6 13 5 2.5 马 发情结束前 4 1-2天 1 1.5 3 4.5 4-6 6 8 37 免 交配后10-11 1- 5 2.5 小时 1 1.5 2 2 3-4
胚胎冲洗液Embryo flushing solution 一般多用杜氏磷酸盐缓冲液(PBS) 布林特氏液 合成输卵管液 惠屯氏液 海姆氏 TCM 199培养液 一般在其中都加上1~5%犊牛血清(FCS) 或 0.3~1%牛血清白蛋白(BSA)
胚胎冲洗液Embryo flushing solution 一般多用杜氏磷酸盐缓冲液(PBS) 布林特氏液 合成输卵管液 惠屯氏液 海姆氏 TCM 199培养液 一般在其中都加上1~5%犊牛血清(FCS) 或 0.3~1%牛血清白蛋白(BSA)
(五) 胚胎的收集(续) 1、手术法收集胚胎(各种家畜和实验动物) (1)在腹部中线处作一切口,然后将子宫角和 卵巢一起拉出,检查排卵点或血红体数量。 (2)冲冼胚胎:向子宫注入冲冼液并在输卵管 接取(牛、羊和兔等),或从输卵管注入冲 冼液再从子宫角处接取(猪、马等)
(五) 胚胎的收集(续) 1、手术法收集胚胎(各种家畜和实验动物) (1)在腹部中线处作一切口,然后将子宫角和 卵巢一起拉出,检查排卵点或血红体数量。 (2)冲冼胚胎:向子宫注入冲冼液并在输卵管 接取(牛、羊和兔等),或从输卵管注入冲 冼液再从子宫角处接取(猪、马等)
手术冲胚法:从子宫向输卵管伞方向冲 洗
手术冲胚法:从子宫向输卵管伞方向冲 洗
手术冲胚法:从输卵管伞向子宫方向冲洗
手术冲胚法:从输卵管伞向子宫方向冲洗
手术冲胚法:从子宫角子宫体冲洗
手术冲胚法:从子宫角子宫体冲洗
2、非手术法收集胚胎(大家畜) (1)牛的非手术收集胚胎可利用三路式导管冲 卵器。外管前端连接以气囊,当将冲卵器插 入子宫内时,充气使气囊胀大,堵住子宫颈 内口以免冲洗液经子宫颈流出。将冲洗液通 过内管注入子宫角内,然后由另一导管导出 冲洗液。 (2)每侧子宫角需冲洗100-150ml。冲洗液的 导出应顺畅,并尽可能回收全部注入的容量。 (五)胚胎的收集(续)
2、非手术法收集胚胎(大家畜) (1)牛的非手术收集胚胎可利用三路式导管冲 卵器。外管前端连接以气囊,当将冲卵器插 入子宫内时,充气使气囊胀大,堵住子宫颈 内口以免冲洗液经子宫颈流出。将冲洗液通 过内管注入子宫角内,然后由另一导管导出 冲洗液。 (2)每侧子宫角需冲洗100-150ml。冲洗液的 导出应顺畅,并尽可能回收全部注入的容量。 (五)胚胎的收集(续)