圆头精子症受精失败机理、对策 及其基因诊断平台的建立 朱复希 安徽医科大学第一附属医院生殖医学中心
圆头精子症受精失败机理、对策 及其基因诊断平台的建立 朱复希 安徽医科大学第一附属医院生殖医学中心
Connecting Acrosomal Gap、 Middle piece End peG每 sheath G 0 Annulus 国 Fibrous sheath Principal piece Principal
研究背景 圆头精子症是一种罕见而严重的畸形精子症,在男性不育 症患者中的发病率小于0.1%,其主要临床特征是顶体缺失, 精子头部呈圆形。圆头精子症依据圆头精子占精液中总精 子数的比例分为型(100%)和II型(<100%)。由于顶体 完全缺失,精子无法穿透卵子透明带完成受精过程,因此 圆头精子症患者临床表现为男性不育。 传统方法认为,借助卵胞浆内单精子注射(ICSI)可实现 对圆头精子症患者的治疗,然而大多数报道称圆头精子症 患者行ICSI术后仍存在完全受精失败或受精率低的现象
研究背景 圆头精子症是一种罕见而严重的畸形精子症,在男性不育 症患者中的发病率小于0.1%,其主要临床特征是顶体缺失, 精子头部呈圆形。圆头精子症依据圆头精子占精液中总精 子数的比例分为I型(100%)和II型(<100%)。由于顶体 完全缺失,精子无法穿透卵子透明带完成受精过程,因此 圆头精子症患者临床表现为男性不育。 传统方法认为,借助卵胞浆内单精子注射(ICSI)可实现 对圆头精子症患者的治疗,然而大多数报道称圆头精子症 患者行ICSI术后仍存在完全受精失败或受精率低的现象
a a.圆头精子症患者精液巴氏染色图,b.供精者精液巴氏染色图。Bar=l0um
a b a.圆头精子症患者精液巴氏染色图,b.供精者精液巴氏染色图。Bar=10um
最新研究表明圆头精子症患者受精失败归因 于圆头精子缺乏卵子激活能力。近期研究 发现一种磷脂酶PLC(,位于精子核周鞘上, 分布在精子顶体区、赤道板和顶体后区, 与卵子激活有关。 圆头精子PLC℃蛋白与正常精子相比表达量 下降,另外发现1例精子形态正常但ICSI受 精失败的不育男性中发现PLC(的基因突变
最新研究表明圆头精子症患者受精失败归因 于圆头精子缺乏卵子激活能力。近期研究 发现一种磷脂酶PLCζ,位于精子核周鞘上, 分布在精子顶体区、赤道板和顶体后区, 与卵子激活有关。 圆头精子PLCζ蛋白与正常精子相比表达量 下降,另外发现1例精子形态正常但ICSI受 精失败的不育男性中发现PLCζ的基因突变
Plasma or Vesicular membrane PIP2 PI-3P P? Sperm CGE Egg PLC Membrane 6 c2 PLC Cortical Granules Vesicle PIP, NLS Ca2 Nucleus ER C2 Histidine>Leucine Histidine>Proline PLC position 233 position 398 InsP. (H233L) (H398P) ER PLC PLCC的作用模式和报道的突变位点
PLCζ的作用模式和报道的突变位点
B A-D精子活能前 E G H E-H精子活能后 -L钙离子载体处理后 MP未加一抗对照组 PLC K FITC-PNA Hoescht-33342 M N
A-D 精子活能前 E-H 精子活能后 I-L 钙离子载体处理后 M-P 未加一抗对照组 PLCζ FITC-PNA Hoescht-33342
精子PLCS蛋白定位模式(顶体区、赤道板区和顶体后区)
精子PLCζ蛋白定位模式(顶体区、赤道板区和顶体后区)
目前已有多例ICSI联合辅助卵子激活(AOA)治疗方案提高 圆头精子症患者ICSI受精率及妊娠率的报道,这些圆头精子 症患者出生的小孩,至今未发现有出生缺陷。(钙离子载体 激活方案5例,机械激活1例,电击活1例) 钙离子载体激活方案 1、ICSI后30分钟,5uM钙离子载体A23187浓度的培养基处 理7分钟(或10uM钙离子载体A23187浓度的培养基处理5分钟) 或者1OuM钙离子载体ionomycin calcium salt浓度的培养基处理 10分钟; 2、不含钙离子载体的培养基清洗3次或数次再移到新鲜的培 养基; 3、ICSI后16-18小时观察原核形成情况
目前已有多例ICSI联合辅助卵子激活(AOA)治疗方案提高 圆头精子症患者ICSI受精率及妊娠率的报道,这些圆头精子 症患者出生的小孩,至今未发现有出生缺陷。(钙离子载体 激活方案5例,机械激活1例,电击活1例) 钙离子载体激活方案 1、ICSI后30分钟,5uM 钙离子载体A23187浓度的培养基处 理7分钟(或10uM 钙离子载体A23187浓度的培养基处理5分钟) 或者10uM钙离子载体ionomycin calcium salt浓度的培养基处理 10分钟; 2、不含钙离子载体的培养基清洗3次或数次再移到新鲜的培 养基; 3、ICSI后16-18小时观察原核形成情况
临床上对这两类圆头精子症的治疗方案:型圆头精子症主要 采取ICSI联合辅助卵子激活(AOA)进行治疗,而对Ⅱ型圆头 精子症患者可通过在精液中挑取形态正常的精子进行ICSI治疗。 最新的研究通过透射电镜和免疫荧光方法观察I型圆头精子症 患者的精子形态,发现精液中占非常小比例的精子具有不同形 式的异常顶体形态(萎缩顶体,异位顶体和小顶体囊泡) 报道这种小项体囊泡的精子进行CSI治疗无需联合辅助卵子激 活(AOA)就可以使卵子受精并使患者夫妇成功生出小孩。 虽然AOA方案能提高圆头精子症患者的ICSI受精率,但潜在 的安全性问题还是令人担忧
临床上对这两类圆头精子症的治疗方案:I型圆头精子症主要 采取ICSI联合辅助卵子激活(AOA)进行治疗,而对II型圆头 精子症患者可通过在精液中挑取形态正常的精子进行ICSI治疗。 最新的研究通过透射电镜和免疫荧光方法观察I型圆头精子症 患者的精子形态,发现精液中占非常小比例的精子具有不同形 式的异常顶体形态(萎缩顶体,异位顶体和小顶体囊泡), 报道这种小顶体囊泡的精子进行ICSI治疗无需联合辅助卵子激 活(AOA)就可以使卵子受精并使患者夫妇成功生出小孩。 虽然AOA方案能提高圆头精子症患者的ICSI受精率,但潜在 的安全性问题还是令人担忧