转基因技术 Genetically modified animals 章志国
转基因技术 Genetically modified animals 章志国
概念 转基因(transgene)是指以实验方法导入的外源基因在其染色体 基因组内稳定整合并能遗传给后代。 外源基因随细胞分裂分配到所有子细胞中并遗传给后代，这种 动物叫转基因动物。严格说，转基因动物有别于嵌合体
概念 转基因 (transgene)是指以实验方法导入的外源基因在其染色体 基因组内稳定整合并能遗传给后代。 外源基因随细胞分裂分配到所有子细胞中并遗传给后代，这种 动物叫转基因动物。严格说，转基因动物有别于嵌合体
转基因动物的意义 ■进行功能基因组学研究，研究外源基因在动物整体水平 的表达、调控及基因之间的相互作用 ■建立动物疾病模型，进行发病学和治疗性研究 改变动物基因，使其表现型更适合人类需要 ■生产人类所需的生物活性物质 转基因技术是动物基因工程在医学生物学研究史的窭出盛 近十年来 医 肿瘤研究及优良经济动畅的 多方面做出 的页
转基因动物的意义 ◼进行功能基因组学研究，研究外源基因在动物整体水平 的表达、调控及基因之间的相互作用 ◼建立动物疾病模型，进行发病学和治疗性研究 ◼改变动物基因，使其表现型更适合人类需要 ◼生产人类所需的生物活性物质 转基因技术是动物基因工程在医学生物学研究中的突出成 果。近十年来，为分子遗传学、发育生物学、医学遗传学、 肿瘤研究及优良经济动物的开发研究等多方面做出了很大 的贡献
与嵌合体的区别 嵌合体只有部分组织细胞的基因组中整合有外源基因 逆转录病毒感染法、胚胎干细胞介导法制备动物第一代 均为嵌合体。雄原核显微注射法制备的动物第一代中 1-10%为嵌合体（延迟整合）
与嵌合体的区别 • 嵌合体只有部分组织细胞的基因组中整合有外源基因 逆转录病毒感染法、胚胎干细胞介导法制备动物第一代 均为嵌合体。雄原核显微注射法制备的动物第一代中 1-10%为嵌合体（延迟整合）
发展简史 1972年，Gordon 等人首次试验转基因小鼠，将含有HSV 和SV40DNA片段的重组质粒DNA以显微注射法导入 小鼠受精卵的雄原核 1982年Palmiter等运用此法得到的所谓“超级巨鼠”，曾 引起整个生物学界的轰动 相继获得转基因鱼、鼠、羊、猪、兔、牛等动物 从转基因动物所获得的资料几乎涉及医学遗传、肿瘤学 免疫学等的基因研究，还涉及生物药物的研究，基因 治疗的开发研究
发展简史 1972年，Gordon 等人首次试验转基因小鼠，将含有HSV 和SV40DNA 片段的重组质粒DNA 以显微注射法导入 小鼠受精卵的雄原核 1982 年Palmiter 等运用此法得到的所谓“超级巨鼠” ,曾 引起整个生物学界的轰动 相继获得转基因鱼、鼠、羊、猪、兔、牛等动物 从转基因动物所获得的资料几乎涉及医学遗传、肿瘤学、 免疫学等的基因研究，还涉及生物药物的研究，基因 治疗的开发研究
转基因动物的制作方法 受精卵雄原核显微注射法 胚胎干细胞(ES细胞)法 逆转录病毒感染法 体细胞核移植法 精子载体法 YAC法
转基因动物的制作方法 受精卵雄原核显微注射法 胚胎干细胞（ES细胞）法 逆转录病毒感染法 体细胞核移植法 精子载体法 YAC法
1、雄原核显微注射法 以单细胞受精卵为靶细胞，利用显微注射技术 将构建好的载体DNA直接注射入受精卵的原核，再将 接受注射的受精卵移入假孕母体输卵管继续发育获得 转基因动物个体。目前应用较广泛，最早最经典的方 法
1、雄原核显微注射法 以单细胞受精卵为靶细胞，利用显微注射技术 将构建好的载体DNA直接注射入受精卵的原核，再将 接受注射的受精卵移入假孕母体输卵管继续发育获得 转基因动物个体。目前应用较广泛, 最早最经典的方 法
技术序： ·准备假孕母鼠（养母） ·受精卵的准备 。 基因导入 。 胚胎移植 对幼鼠的鉴定
技术序： • 准备假孕母鼠（养母） • 受精卵的准备 • 基因导入 • 胚胎移植 • 对幼鼠的鉴定
质粒DNA 溶液 /7 原核期受精卵 固定管 注射针 植入输卵管 戳孕小鼠 用特异探针 Southern 签定所导入DNA 杂交分析
DNA Select for cells Inject transfommed expressing ES cells into inner desired gene cell mass Embryonic stem (ES)cells Blastoyst Method 2 Inner cell mass Pronuclei Desired gene (with vector) Implant in uterus Implant in uterus Foster mother Test offspring for presence of gene Mate heterozygous offspring to produce homozygous transgenic strain