第七章 吸光光度法
第七章 吸 光 光 度 法
主要内容 概述 吸光光度法的基本原理 显色反应及显色条件的选择 测量条件的选择 分光光度计 吸光光度法的应用
2 主要内容 概述 吸光光度法的基本原理 显色反应及显色条件的选择 测量条件的选择 分光光度计 吸光光度法的应用
§7-1概述 分析方法的比较 分析方法类别含量相对误差 仪器 滴定分析法化学分析法>1901%~0.2%6准确度高玻璃仪器 重量分析法 吸光光度法仪器分析法<1961%~5%灵敏度高特殊仪器
3 § 7-1 概述 分析方法的比较
§7-2吸光光度法的基本原理 、物质的颜色对光的选择性吸收 吸光光度法是基于被测物质的分子对光具有选 择性吸收的特性而建立起来的分析方法
§7-2 吸光光度法的基本原理 一、物质的颜色对光的选择性吸收 吸光光度法是基于被测物质的分子对光具有选 择性吸收的特性而建立起来的分析方法
当一束光照射到某物质的溶液时,物质对光的吸收 具有选择性,只有当照射光的光子能量与被照射物质 的分子、原子或离子由基态到激发态之间的能量之差 相等时,这个波长的光才被吸收
5 当一束光照射到某物质的溶液时，物质对光的吸收 具有选择性，只有当照射光的光子能量与被照射物质 的分子、原子或离子由基态到激发态之间的能量之差 相等时，这个波长的光才被吸收
吸收曲线 将不同浪长的光照射某一固定浓度和液层厚度的 溶液,并测量每一波长下溶液对光的吸收程度 (吸光度),以吸光度为纵坐标,相应浪长为横 坐标,所得曲线,称为吸收曲线。如图为高锰酸 钾和重铬酸钾的吸收曲线。 吸收曲线是吸光光度法选择测定浪长的重要 依据
6 吸收曲线 将不同波长的光照射某一固定浓度和液层厚度的 溶液，并测量每一波长下溶液对光的吸收程度 （吸光度），以吸光度为纵坐标，相应波长为横 坐标，所得曲线，称为吸收曲线。如图为高锰酸 钾和重铬酸钾的吸收曲线。 吸收曲线是吸光光度法选择测定波长的重要 依据
Cr2O2、MnO4的吸收曲线 350 525545 Cr,O-2 MnO4 0 oo0 0 864 0 30350\400 50a 600 700 2nm
300 400 500 600 700 /nm 350 525 545 Cr2O7 2- MnO4 - 1.0 0.8 0.6 0.4 0.2 Absorbance 350 Cr2O7 2-、MnO4 -的吸收曲线
二、光吸收基本定律: Lambert-beer定律 入射光强度 1-d 透射光强度 朗伯-比尔定律公式: A=lg(/4)=lg1/T= kbc 吸光度 透光率介质厚 度(cm)
二、 光吸收基本定律: Lambert-Beer定律 A=lg(I0 /I t )= lg1/T = kbc It I0 b dx I I-dI s 吸光度 介质厚 度(cm) 朗伯-比尔定律公式： 透光率 入射光强度 透射光强度
T一透光率(透射比) (Transmittance) T A=g(0/11=g(1/)=-IgT=kbc 0.8 0.6 ■■ 0.4 0.2 ■■■■口 mg
T－透光率（透射比） （Transmittance） 0 t I T = I A = lg (I0 /It ) = lg(1/T) = -lgT = kbc 0 1 2 3 4 mg/ml A * 0.8 0.6 0.4 0.2 0
k吸光系数 Absorptivity 当c的单位用gL1表示时,用a表示, A=abc a的单位:L;glcm1 当c的单位用moL1表示时,用表示 摩尔吸光系数 Molar absorptivity A= bc 的单位: Lmol-lcm
k 吸光系数 Absorptivity a的单位: L·g-1·cm-1 当c的单位用g·L-1表示时，用a表示， A＝abc 的单位: L·mol-1·cm- 1 当c的单位用mol·L-1表示时，用 表示. －摩尔吸光系数 Molar Absorptivity A＝ bc