细胞工程 植物细胞、组织 评价了RAPD标记在证实马铃薯双单倍体的 及原生质体培养 原生质体经电融合形成的体细胞杂种的杂合性中的 应用。研究的大多数DNA引物检测了四倍体和 950140 双 双单倍体中的多态性,甚至在非常相近的克隆中也 小豆蔻的包囊苗尖的离体发育[英/Ganapathi,容易检测出多态性,通过比较带有相同胞质的克隆 .r. Biotechnol.tech.-1934,8(4)进行PC产生的谱带,从核基四组扩增的结果证 239~244[译自DBA,1904,13(1C),4-实多态性。双单倍体的所有带稳定传递给每个杂 05771 种。在缺少产生双亲本的互补多态谱带时,2种 在含有13.3/MBA、2.7 NAA的MS培适当引物的混合物中每个能产生特异于一个亲本的 养基上从小豆蔻籽苗建立了苗尖培养物6~8周谱带。从而能证明杂合性。32个融合组合的所有融 后苗尖形成丛生苗。在相同培养基上继代培养单个合衍生的再生体的杂合性被明确地证明了。(田桂 苗进行繁殖。在MS中将苗尖与3%藻酸钠混合,英) 并在2.5%CaCl2溶液中保温30分钟。将包囊化的950143 苗尖在 White培养基上培养。一周后100%萌发。小麦原胚离体萌发为可育植株英/ Iglesias, 在1000lux,相对湿度50~60%、25℃下培养6A. Plant Cell Rep-1994,13(7)-377 后记录产生的小植株数量。所有小植株均可移植。~380[译白DBA,1994,13(10),94-05776 在浸有1/4量MS盐的潮湿滤纸条上包囊苗尖也可用70%乙醇将小麦穗表面消毒5分钟,风干 ° 发育。因此,包囊的苗尖可能用作人工种子。(田开花后4~14天间每24小时切割未成熟胚,连同盾 桂英) 片与20g/ Sea Plaque琼脂糖固化的MSE(含 950141 200mg/酪蛋白水解物、8%或15%蔗糖、100mg 药物包囊作为人工种子的衣壳系统[英] Dupuis,/l肌醇)接触、置25℃、光下将胚与琼脂块一起 J.m.Bio/Technology.-1994,12(4)置于3 0ml0 MSE上(含3%蔗糖、以8g/琼脂糖固 385~389C自DBA,1994,13(10),94-0572]化)形成双层系统。萌发后,将带有发育根系的 开发了一种人工种子的衣壳,由药物包囊组9~10cm长小植株转移至土壤中。当分别在含15% 成,作为一种结实的水溶性壳。由一层不溶于水和3%蔗糖的MSE双层系统的琼脂块和培养基层 的膜复盖在其内表面。包囊由含有甘油(作增塑中进行培养时,从开花7天后收集的未成熟胚得到 剂)的明胶构成。包囊体长2cm、外径8mm,在其的萌发率和可育小植株分别为95%和90%。具有不 内表面用一层含不同聚合物的有机溶剂溶液包被同克分子渗透浓度的2种培养基组合使胚萌发前持 (向包囊内注入此溶液)。干燥后,用含有6g/的续发育。(田桂英) Phytagel的萌发培养基填充包囊。当用棉花或蛭950144 石代替凝胶时,在加入1ml液体萌发培养基前将在马铃薯种间体细胞杂种中还原糖积累的表达英了 100mg棉花或80mg蛭石置于包囊内。将05~1.5/Craig,a.l. Plant Cell Rep.-1994,13 mm的鱼雷形胚置于内部培养基上,方向不限。在(7)-401~405[译自DBA,1994,13(10), 此包囊内胡萝卜体细胞胚可维持90%的转化率,最94-05780 后将包囊体封闭。(田桂英) 将马铃薯苗培养物的叶肉原生质体(绿色)与 950142 快速分裂的 Solanum phureja悬浮细胞的原 在马铃薯的双单倍体育种中证实体细胞杂种的生质体(白色)通过电激融合融合的细胞在 rapd标记 Takemori英/,... Plant Cell VKClg培养基上中、22℃培养6天,然后置 Rep1994,13(7)-367~371译白DBA,光下16小时光周期形成的苗培养在半量的NM培 1991,13(10),94-05774 养基上。原生质体再生体为不对称杂种,消除了 58 91994-2008 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights
8, phureja染色体。在冷冻贮存时,S, phureja隆的初步序列分析显示,在单个筛选中,有可能分 块茎累积的还原糖低于马铃薯块茎。体细胞杂种还离出与下列克隆相关的克隆:过去七年中从事这顼 原糖累积量低表明其为显性性状。就利用不对称杂研究的其它实验室分离出的许多胚克隆,及未曾介 生产马铃薯基因型讨论了实验结果。(田桂英)绍过的、正在鉴别的24种以上新克隆。结果确证能 650145 利用筛选鉴别胚强化基因,表明在分子水平上,愈 芸苔和山芥族间体细胞杂种英]/ Fahleson,J∴…伤细胞与由共发育而成的胚茫异不大。(朱遐) / Plant Cell Rep.-1994,13(7).-411~416950148 译自DBA,1994,13(10),9405781] 可可珠心体细胞胚的开发「会,英]/ figueira, 将芸苔和耐冷山芥原生质体融合产生族间杂种A… Acta Hortic-193,336.-231~238[译 植株。用250~5001/ml5(t)·基荧光素-自DBA,1991,13(10),94-05791 乙酸盐将芸苔变种Tr的下怀辎原生质体染色10分 介绍了诱导可可珠心状体并将珠心体细胞压 钟,用 Sundberg和Gi s法将之与体外培养转变为籽苗的改进方法。将胚珠外植体培养在含 三周龄的山莽叶肉原生质体融合。依 Sundberg描117mM蔗糖、10%椰汁、41M2,4-D、0,5M异 述的方法进行筛选前的细胞处理,采用流式细胞光戊烯腺嘌呤(2iP)、0.5g/l麦提取物、0.2% 度术和分类术、培养杂种细胞和再生杂交的小植株。PVP(分子量为10000和0,5g/1水解酪蛋白的半 在无植物生长素的MS上小植株再生、生根,然量液体MS培养基(pH5,3)上。培养物在26℃ 后于温室中生长。3~4个刀内,7%分化的愈伤黑暗下振荡(100rpm)培养60天(30天后转一次 形成苗。1~6个月后约70%苗死亡。只形成9株培养基)。将愈伤块转到含117mM蔗糖、2,5M 小植株。RFLP分析表明,5次融合实验中产生的2iP、10%椰汁、0,1g/1麦芽提取物、0.2%PⅤP 植株中有6株是杂合的。所有杂种比芸苔的DNA10000半量半固体MS培养基(pl5.3):,在 含量高。除去离体培养条件不能建成成熟的植株表光下培养60天,然后在补加100mg/水解酪蛋 明品种间的不亲合性。(田桂英) 87.6mM蔗糖和8g/1琼脂的半量Ms(pH5,3) 再培养。培养150天后,出觋绿色凸起,并以低频 器官分化和体细胞胚发生会,英]/Litz,R,E.率形成体细胞胚。珠心体细胞胚在高CO2(2000 / Acta hortic,-1993,36.-199~205译自ppm)条件下成功地转变为籽凿,能转到土壤 DBA,1994,13(10),91-05791 并在温室条件下驯化。(朱遐) 就园艺植物离体形态发生阐述了以下论题:950149 (1)细胞形态发生:(2)离体形态发生:(a)甘薯的体细胞胚发生会,英1/S0nino,A∴ 直接诱导,包括对基因型、外植体、外植体发育阶 Acta hortic.-193,33.-239~243译们DBA 段、培养基和物理条件影响的研究;(b)易感诱199,13(10),91-05795- 导。结论是:诱导器官发生和体细胞胚发生的方法 用温室生长植株劳分生组织衍生愈伤检验了 是对已确定某种发育途径的细胞进行重新设计。设薯5个无性系(Q23728、Q23836、CN1489-89 计包括改变基因的表达。一般将感受态细胞继代培288-6B、W1901)的体细胞胚发生能力。用补加 养于低复合培养基(具表达新形式发育的潜力)2,4-D、稍改变有机组成的MS培养基诱导愈伤诱 后,触发形态发生。(朱遐) 导出黄白色愈伤。将其转到不含2,4-D的类似培 950147 养基上以形成胚。体细胞胚发生能力由基因型决 胡萝卜体细胞胚发育的分子甚础[会,英]/Zimm-定。在发生能力强的无性系Q23728中,67%的愈 erman,J,L∴…∥ Acta hortic.-1993,336.-伤形成不同发育阶段的成簇的合并或单个胚,平均 217~224译自DBA,1994,13(10),94-05793]为10,3个胚/外植体;获得483株发育完全的植株。 由胡萝卜球形期体细胞多核糖体mRNA制备288-6B和W190F每个胚性愈伤形成胚的平均数较 DNA文库,用“消减cDNA探针”(其中球低,分别为567和12,4;Q23836和CN1489-8 形胚cDNA已与合子籽苗多核糖体mRNA预杂交)极低,分别为3.3和1,3288-6B、Q23836、W190F 筛选除去所有共同序列。用此方法,分离出30个不和CN1489-89形成完整植株的数量分别为66、48、 同的克隆,其球形胚均多于籽苗。所有这些不同克7和0。对小植株进行离体繁殖,它们与对照植株 o1994-2008ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouse.Allrightsreservedhttp://www.cnki.net
间无显著的形态学差异。(朱遐) 的大型植株(L);生长和球茎的形成受到抑制而 950150 形成无明显基部球茎的基生小植株(A)。将三片 可可的体细胞胚发生会,英]/ Sondhi,M,R,叶小植株的鳞茎纵剖开,对每一半进行继代培养。 …∥ Acta Hortic,-1993,33.-245~248译自在每次继代中,从L型小植株中分出一株,移到田 间。还将部分L型植株移到田间。对413排田间植 将可可花瓣培养在由补加30g/1蔗糖、10.0M株进行了评估。结论是:变异宰不疊养基组成或 2,4-D、1,0MKn和0.8g/琼脂的MS培养基组增殖率的影响:A型植株的变影率远高于1型;培 成的愈伤诱导培养基上达4周,然后置于含半量养时洲不是变因系;初始外溘体是决定由这些外 MS盐类及0,2%活性炭、30g/蔗糖、5,0MBA植体在形成“慕忘”和“非稳定”性类别时是否发 和0,8g/1琼脂的再生培养上进迷代培养。将珠体克隆变异的主要因素。(朱遐) 心外植体培养在补加5s/lPⅤP,5%椰汁、600950153 mg/IMES,302,4-U、g/1蔗糖和0,8g/1组培中四倍体香瓜的产生[会,英]/ Adelberg, 琼脂的Kao培养上。置于再生培养基上2~4个JW…/ Acta hortic,-1993,336·-373~379[译 月后,由花瓣培养物得到体细胞胚(SE)。9000个DBA,1994,13(10),94-05814 外植体的再生率为4,3%这些初级胚形成发育为小 将香瓜cv. Miniloup子叶培养在含下列成分 植株的次级胚。珠心胚再生方式为直接或间接途径。的MS培养基上:0.7%琼脂、8%蔗糖、10M 29000个珠心外植体的SE再生率为2,0%(朱遐)BA、100mg/1肌醇、2mg/1甘氨酸、02mg/1盐酸 950151 硫胺素、0.5mg/l吡哆醇、0,5mg/1烟酸(pH5,7 千里光属 Senecio fuc hsii与S. jacobea间的体细培养物保存在23~27℃、16hr光周期下。自发产生 跑杂交[会,英/Wang,G,R,… Acta hor-四倍体再生植株。通过对前几节形成的早熟雄花进 tic,-193,336.-315~320译自DBA,194,13行花粉形态测量,很容易筛选出上述植株。单芽衍 (10),91-05806] 生培养品系中50%以下是混倍体。继代培养9和18 究了千里光属S, fuchsii与8. jacobea2个个月后,初始再生体用作再生体的倍性诱导剂。 白化突变体(1个质体突变体、1个核突变体)间此,四倍体产生于继代培养之前。此时,混倍体培 的原生质体融合。用高Ca‘、高pH值下的琮脂糖养物失去四倍体数并移变为二倍体。〔朱遐 三夹层介质技术实现融合。将小愈伤培养在添 加5%液体椰子胚乳的 Gamborg'sB5培养基上。百日草属 Zinnia mary l andic a组培诱导的变异及 根据形成色紮和形态学特点,筛选出具有双亲株特遗传力会,英J/ Stieve,S.M.…/A 点的一些品系,继代培养于基本MS或补加2.5 M Hortic,-1993,336-389~398译自DBA,1994 BA的MS培养基上,使苗生长并形成根。对试验13(10),94-05815 用10个品系的5个杂种和2个胞质杂种进行了染色 将百日草属Z。 mary landica cv, Thumb 体数、同工酶谱型和RFLP鉴别。利用核DNA和 lina mini- Salmon子叶组织培养在含0,2成22 叶绿体DNA的专一性探针揭示了总DNA的限制性 M thidiazuron(TDZ)的MS培养基上,由此 片段谱型。2个胞质杂种各具2n=2x=40染色体 生不定植株。在0,2MTDZ培养基上,被检测 其一含8, jacobea核基因组和S, fuchsii原质体的9种性状中有7种,上述植株产生的体克隆变异 系;其二含8, fuchsi基因组和 jacobea原质体体多于种子衍生对照株。在22,2MTDZ培养基 系。(朱遐) 上,被检测的9种性状中有5种,上述植株的变异 950152 体多于对照;9种性状中有2种,22,2 uM TDZ 影响微繁殖香蕉体克隆变异发生的因素会,英]衍生株变异体多于02μMTDZ衍生株。对具有变 / Reuveni,O∴…/ Acta hortic.-1993,336.-异性状的149株0,2MTDZ的生株中的12株、23 357~364译自DBA,1994,13(10),94-05812]株2,22 uM TDZ衍生株中的8株进行自花授粉, 将香蕉外植体谙养在16种不同培养基上,经过观察到其子代产生变异。畸变特征(包括株高、可 420天后,每隔6周对小植株进行继代培养。小植育性、花色及形态)在不同程度上由再生株以性传 株可分为两类:形成鳞茎状球茎的单个、发育完善 方式传给子代,说明发生了遗传变化。子代还出 01994-2008ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouse.Allrightsreservedhttp:/www.cnki.net
现了再生株不具备的畸变特性。(朱遐) 处于发育花原基阶段的未成熟花序对愈伤诱导和植 950155 株再生反应最好,该再生体的多数形态学性状表现 甘蔗长期愈伤培养物中体细胞胚胎发生的调控[英]活力最大。虽然再生体的染色体数目未发生改变, / Brisibe,E.A,…/New. Phytol-1994,126但比起始的杂种其有丝分裂的程度较高。特别是与 (2).-301~307译自DBA,1994,13(11),供体杂种(0,46%)相比,再生体交种子数高得 94-06292 多(549%),因此总共得到84粒自交种子。这 将甘蔗幼叶切片置于补加3M二氯甲氧苯酸表明,可能从冰草的F基因组将有看望门性状通过 的MS基本培养基上、暗中、21天,从离体生长的再生杂秒植株转移至普通小麦。(田桂英) 小植株诱导胚胎发生感受性愈伤,然后转至953158 EFDM培养基上,形成胚并戈育。如果在EFDM在胡岁卜细胞培养物中参与体细胞胚胎发生活化 中补加1~5M二气甲氧苯酸、蛋白水解物作用的oC启动区的分析英J/ Fujii,N.… 1g/1)、6%麦芽糖或6~9%玉米浆可改善胚 Plant Physiol.-1994,104(4),-1151~1157 胎发生反应。在此条件下怠伤维持其胚脍发生感受[译自DBA,1994,13(11),94-06298 性达6个月,在含20或30M二氯甲氧苯酸的新鲜 在转基因胡萝卜栽培种US- Harumakigosum 培养基上隔周继代、黑暗培养,胚胎发生愈伤繁殖细胞中(含Ri质粒rolC的5′非编码序列和细菌 进一步增加。用10-5脱落酸或5%山梨醇以一周间GUS的uidA基因),在诱导体细胞胚胎发生(SE) 隔预处理初始愈伤,然后转至含20或30M二氧甲后,该嵌合基因活跃表达。rolC启动子的活化取 氧苯酸的培养基上,胚胎发生感受性可进一步改善决于胚的发育,不决定于在无2,4-D培养基中的 至40个月。(田桂英) 培养时间。rolC启动子的cis区导致SE-相关的活 950156 化作用(SERA),检测了愈伤中的低GUS活性 银杏的再生:根据发育阶段对大配子体诱导胚胎发原胚发生质量(PEM)和心形及鱼雷形胚中的高 生[法]/ fontanel,A.…∥C Seances GUS活性。当利用rolC基因的255bp区时, Acad.Sci.Ser,3·1994,3172).149~155SERA不变。该区内部缺失不改变ro启动子调 译自DBA,1994,13(11),94-062941 控的SERA。当roC启动子片段(848至-94bp) 将取自波尔多,阿根廷,澳大利亚,智利的银与CaMV355中心区(-90至+6bp)融合时,愈伤 杏树的叶外植体(I),合子胚(Ⅱ)及来自胚珠及PEM中GUS活性相当低,而心形及鱼雷形胚中 的原叶体在补加各种生长素和细胞分裂素的MS培GUS活性高。当roC启动子的-848至-255bp或 养基或 Gupta和 Barzani诱导培养基上培养8周。255至-94bp片段与CaMV355基因中心区融合时 后将外植体转至无植物生长素的培养基上。(I)GUS活性与SE无关。(田桂英) 和(Ⅱ)叶组织生长旺盛,但不产生体细胞胚,而950159 原叶体产生外植体和体细胞胚胎发生。来自智利的大麦制芽变种糊粉粒原生质体的分离与鉴定[英 胚珠胚发生比例为82%,其次为来自澳大利亚的/ Sk jot,L.…/ Protoplasma.-1994,177(3~) (33%)、阿根廷的(20%)。从授粉后8~11周132~143译自DBA,1994,13(11),94-062991 采集的外植体采集的原胚产率最高。单倍体原胚发 开发了从大麦制麦芽变种 Alexis和4种其它 育至心脏形阶段但不能被诱导出体细胞胚胎发生。大麦基因型的成熟糊粉层分离原生质体的方法。该 (田桂英) 法将诱导内源细胞壁降解酶与使用 Onzuka纤维素 950157 酶R10和 driselase相结合。新分离的原生质体活 小麦与冰草F1杂种组培物中的体克变[英]/L,力在90%以上,不论是否有赤霉素,大多数原生质 L.H,…/ Plant breed.-1994,12(2)-160体处于较早的发育阶段。用指导糊粉细胞原生质体 ~166译自DBA,1994,13(11),94-06297]中氯霉素乙酰转移酶表达的一个低p的a-淀粉酶 从小麦和冰草A970Pr0 a desertorum间部分启动子研究转染作用表明,糊粉细胞的激素反应明 自交可孕的未成熱花序诱导的愈伤在补加2mg/1显不同。用赤霉素供给转染的 Alexis原生质体诱 2,4-D的MS培养基上产生株88株再生株。这些再生导报道基因表达提高8倍,而在 Himalaya中表达 株用于研究体克隆变异和获得更多的自交衍生物。保持不变。在研究转基因表达时,这种方法可用于 o1994-2008ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouse.Allrightsreservedhttp://www.cnki.net
不同的大麦基因型和突变型。(田柱英) 得双单倍体品系。将F1代供体系8~4mm长的芽 950160 破碎,然后堵养在G1and等人的培养基中、于适宜 玉米籽粒的愈伤诱导及其保持[英]/ Sawahel,条件下的人工气候室里。在改良的MS培养基上形 W,A∴…∥ Biotechnol.Let.-1994,16(4),成的胚状体发育;生根;再转移至温室。此外,通 -397~400译自DBA,1994,13(12),94-过 Sacristan和 Gerdemann方法应用貽营救技 06908 术进行胚珠胚胎培养物杂交借助这一方沾,克服了 从玉米各种外植体组织起始全能性组织培养印度油郣种与4个花椰菜品仲阃杂交的不亲和性。离 物。描述了另一可供选择的愈伤诱导源。将完整的体植株中有15驯化时性。杂种植株油的GC分析表 玉米粒置于补加20mg/12,4-D的LSRM培养基明,油含量为千物质的37,2~43,6%芥酸为总脂肪 于30℃、1200lux光密度下培养30天,从中产生愈酸量的,2~60,1%,超过亲本株。(李思经) 伤(G201杂种)。籽芽第一节产生的愈伤生长950163 最快。偶尔也从根区产生旗伤。然后把愈伤转移PCB促进甘薯叶外植体和原生质体再生植株英] 并保持在含2mg}2,4-D的培养基里。当将其转/ Kobayashi,R.S∴…/ Hortscience.-1994 至含80mg/1酵母膏、30g/1蔗糖和10g/l琼脂的培29(4)-327~328译自DBA,1994,13(12) 养基后愈伤形成大量根和叶状结构。这种对特殊愈94-06912] 伤培养物(如白色或淡黄色、易碎斧能直接从籽粒 将甘薯叶外植体培养在含有3g/1酵母膏、18,9 产生的Ⅱ型愈伤)进行诱导和保持比以往报道的其M脱落酸、2,3M2,4-D和015M蔗糖的LS培 它外植体生产愈伤更简单、省时、经济。(李思经)养基里。形成的愈伤转至含有17,8MBA和0,1 950161 10或100Ma-对氯苯氧基异丁酸(PCIB)的MS 用磁性原生质体分类法筛选体细跑杂种植株英]培养基。结果在含10 MPCIB的培养基上从愈伤形 Bio/ Technology.-1994,12成苗数增加显著,愈伤出现苗再生的百分率比在无 (5),511~515译自DBA,1994,13(12) PCIB再生培养基上愈伤的苗再生率几乎多两 91-06909 从离体生长植株的苗和叶柄外植体分离原生质体 利用磁性细胞分(MACS)技术产生大量培养在Kao和 Michayluk8p培养基上,~6mm愈 马铃薯体细胞杂种。应用筛选的生物素化外源凝集伤转至愈伤话导和再生培养基(用于叶培养的)。 通过抗生ξ白链菌素介导超顱磁性微珠粒与融合在愈伤转至无植物生长调节剂的培养基之前用 配对的一原生质体结仚。另一融仚配对物含有新霑PCIB,多数苗并不充分发育成小植株。原生质体衍 紮磷酸转够酶-Ⅱ选择标记。融合后,用MACS对生愈伤在含10或1004 M PCIB的培养基上培养2 原生质体混合物分类。然后将组分温育在含卡那莓月后再生植株率分别为13%和18%。而在无PCIB 素培养基上,仅杂种细胞长出愈伤。优化了用外源的培养基上没有植株再生。(李思经) 凝集素染色原生质体、用MACS分离原生质体及950164 杂种愈伤再生植株的方法学。用MACS处理后,腌制型黄瓜品种胚性悬浮培养物的小植株再生英] 马铃薯无性系1506/60与A89,24178/39之间的杂种 Raharjo,S,H,T,…/ In vitro plant.-1994 率从8%增至36%。马铃砦FCG1与 Solanum30(1),-16~20译自DBA,1994,13(12), bulbocastanum BGRC00806之间的体细胞杂种91-06914 率从28%增至82。从获得的大量植株中能筛选出 将腌制型黄瓜鼎种的叶柄外植体培养在含有 具理想染色体数、形态学和种子可育的杂种植株。5M,2,4-D和MBA的MS培养基上以诱导 (李思经) 愈伤。评估了各种植物生长调节剂组合对起始和保 持愈伤悬浮细胞培养物的影响,用仅含有1M2 高产芥酸的油菜育种现状及其前景[德]Lua,」-D和AMBA的培养基隔周继代培养8~15月后 W∴…/ Fat sci. Technol,-199,9(是) 使培养物形成黄色、易碎及可再生性组织。也估测 137~116译自D4,1991,13(12),94-06910]了平板培基中各种植物生长素和细胞激动素各种 应用常规育种程序筛选出含量芥酸(EA)浓度组合,加入硝酸银及各种平板方法的效应。当 的油菜。选出有希望的基因型进行小孢子培养以获细胞团块置于覆盖在含2:1或1:1 uM NAA o1994-2008ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouse.Allrightsreservedhttp://www.cnki.net
BA的MS培养基上的滤纸时获得的苗和小植株再950167 生率最高。培养基加入活性炭(.5%)或硝酸银暴荆树的微繁殖[英]/ Huang,上.H.…/InVi (30M)并不促进小植株冉生率。获得正常小植 tro Plant,-1994,30(1),70~74[译自DBA, 株最高率为42~46%。用此方法可提高从腌制黄瓜1994,13(12),94-06921] 种胚性愈伤的小植株再生率。(李思经) 从8周龄离体生长的黑荆树( Acacia mear- 950165 nsi)植株切下附带子叶的苗尖外植体,直立培养 应用于植物组织培养的分子标记[英]/ Cloutier,在合有30g/1燃糖、6g/1膽和植輟士长调节剂的 s∴…! In vitro plant,-1994,30(1),-32~15ml3/4量MS培养基(pH5,8)、20~30℃、12hr 39译自DBA,1994,13(12),94-06917] 光周期条件下。用z mg/1(8.87mM)BA结合0.01 就以下方面综述了分子学标记:(1)分子标mg/!(0,049M)IBA诱导丛生苗形成。低于1 记类型(同功酶、R7LP和CR记,如 KAPD mg/1细胞激动素加0,01~0,1mg/1植物生长素的组 标记):(Σ)应用分标记进行体细胞克隆变异合抑制丛生苗形成,但促进苗尖外植体生根。苗增 硏究;(δ)测定组织焙养物衍生植株的原点;殖培养物保持在含有2mg/1BA和0,0lmg/lIBA (4)双单倍体植物群体鉴定。应用分子标记研究了的培养基上。当苗达1,5~2cm长时,将其转移到 植物组织培养中存在的许多局限性。分子标记筛选GA-7培养基。用含NAA、20g/1蔗糖和6g/1琼脂 可精确测定出通过小孢子或花药培养及原生质体融的全量或半量MS培养基(pH5,8)诱导生根。在 合等产生的组培物衍生植株的原点。培育出几种含0,6mg/1(322M)NAA的半量MS培养基 主要农作物的双单倍体植株,用作分子图谱和标签上根增殖率最高。小植株转移到泥炭培养基,用 重要的农艺性状。组培系统、群体植株结构及分子MS盐溶液浇灌,再移至温室。(李思经) 学方法的正确配合为改善植物育种效率提供了一强950168 有力的策略。(李思经) 鷹嘴豆顶端分生组织和子叶的离体再生和植株繁殖 950166 [英J/ Brandt,E,B∴…/ In vitro plant.-1991, 从单胚芒果品种的珠心快速生产体细胞胚英y30(1),75~80译自DBA,1994,13(12) Jand, M. M."/In Vitro Plant.-1994,30 94-0692 (1),“55~57[译自DBA,1994,13(12), 从鹰嘴豆品种 Annigeri(I)和lCCⅤb( 94-06919 (两品种均抗尖镶孢真菌病害)的离体生长植株分 开发了从3个单胚芒果晶种( Alphonso,离出子叶节,培养在含有4,4MBA的100m Mundan和 Baneshan)株心组织快速生产体细 borg′sB5培养基里。3周内两品种产生7苗/ 胞胚(SE)(具正常二倍体形态学)的新方法。节。然后将每一品种7日龄离体生长植株的顶端分 采用含有5mg/12,4-D(22,62mM)、5mg/生组织外植体培养在含有,4MBA和0,05M GA(14,14pM)、60g/1蔗糖和2,5g/1活性炭IBA的2m1 McGranahan dKM-C-a培养基 (AC)的MS培养基,3种基因型在14~21天里。96%外植体形成10苗/外植体。通过顶端分生 内诱导出体细胞胚胎发生。然后将其转移到含有组织再分裂,伲进丛生苗形成,(I)为90苗外 5mg/12,4-D、10mg/lGA和400g/1谷氨酰胺的植体,(Ⅱ)为50苗/外植体。IBA是最好的生根 MS培养基里以诱导SE形成。A1 phono se形成率诱导剂。含2,5MIBA的 Wagner- Hess WH培 为51,1%,而 Bane shan和 Mundan的SE形成率养基诱导生根率最高(I72%,Ⅱ68%)。两品种 分别为356%和30,0%在缩短光照(16h光周期、节和分生组织区的苗生根率没有差异。小植株转至 235AE/m2sec)、降低基础培养基浓度和mg/1温室土壤里。I和Ⅱ的存活率分别为28%和23% 脱落酸(3.784m)、椰子汁(20%v/v)、100g小植株成熟并结籽。(李思经) 1酪蛋白水解液、40g/l蔗糖和2,5g/1AC的条件950169 下SE成熟。 Alphonso的成熟SE为63,3%5mg/1牡丹品种‘ Mme de Vatry’的离体繁殖:增殖期 (22,2M)BA促进正常胚萌发。75~80天内完间外源激素对植株发育的影响[英]/ Bouza,L, 成小植株再生。(李思经) Sci. Hortic. (Amsterdam).-1994, 57(3) 241~251[译自DBA,1994,13,12),94-069261 91994-2008ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouse.Allrightsreservedhttp://www.cnki.net
究了各种植物生长调节剂对牡丹( Paeonia950172 Suffruticosa)品种‘ Mme de vatry,离体增荸荠的组织培养和快速繁殖[中]/李良俊…/植物 殖和伸长的影响。外植体培养在含有6mMCa2、生理学通讯,194,30(4)·275~276 100mg/肌醇、0,1mg/1盐酸硫胺素、0,5mg/l烟 取种荠的饱满芽,经两种杀菌处理,然后剥取 酸、0,5mg/1吡哆醇、3%蔗糖、及4MBA、3~5mm的芽尖,接种于芽分化培养基(MS+ IBA或赤霉素的MS培养基(pH58,用0,7%琼BA0,2~1,0mg/(单位下同)+NAA0,1,3% 脂固化)、23~25℃,16hr光周期、45%相对空蔗糖)中,第3天能看到外植体叨显伸长影大并开 气湿度条件下。毎隔5周培养基更换一次。只有始转绿。两馬后,长有少数分顔的部分植株开始生 BA促进腋芽发育,而培养基仅含赤霉素时,既无根。30天后,根系发达,可移栽。再将取出的培养 苗伸长也无叶和腋芽形成或发育。"结合赤霉素蓄,苏除大部分叶状茎,再对叶状茎基部的芽丛进 比单独用BA更能提高培率,并促选蕌长。这行切割后接入增殖培养基(MS+玉米素0.4,3% 組合有时引起顶端和叶坏ξ,元其是Ca2‘浓度蔗糖)。pH5,8,培养温度25℃±2℃,光照度 较低时尤为如此。(车思经) 20001x,光照12h/d。结果表明,经培养25后, 950170 其平均分蘖系数最高达11.33,以主芽为外植体的 马铃薯实生苗了叶及下胚轴原生质体培养研究[中]次之,且苗壮,側芽的最低。经一个月增殖培养 /戴朝曦…∥植物学报1994.36(9)·-671~678后,移栽,其成活率达80%。(孙国凤) 用马铃薯普通栽培种( Solanum tuberosum)950173 3个品系的实生苗刚展开的子叶及下胚轴游离和培银脉单药花的组织培养中]/何炎明…/植物生理 养原生质体。实验发现,光照强度对子叶及下胚轴学通讯,1994,30(4).-276 原生质体的游离和培养效果有影响。在3001x强光 外植体消毒后切成0,5cm长带腋芽芽段,接种 照下培养效果最好;在连续黑暗下培养的黄化实生于培养基(MS+BA4mg/1(单位下同)+ZT1+ 苗不能游离出完整的原生质体。酶解前的抽气处理IAA0,5)中,。20天左右分化出芽,同时形成 对子叶及下胚轴游离原生质体的产量有显著的正效致密的表面有瘤状突起的愈伤组织。将此愈伤移到 应,但对试管苗叶片则无明显的效果。下胚轴原生上述培养基中,可分化出丛生芽,待长到3~4 质体的产量显著地高于子叶。(孙国风) cm时,切段增殖。当增殖芽长到2~3cm时,切 取转入诱导生根培养基(MS+NAA0,3,8%蔗 甘蓝下胚轴原生质体高效成株系统的建立[中]/薛糖,7%琼脂)中,pH5,8。温度25~28℃,日照 红卫…实验生物学报.-199,27(2).-259~12小时,光照度1000~15001x。20d根长1~2c 形成完整的植株。然后移栽,成活率在85%以上 采用4~τ天的计监无菌苗下胚轴为材料游离移栽的试管苗生长较快,可作中、小型盆栽,20℃以 原生质体,经酶解纯化后获得的原生质体产量为上形成花芽,全年春秋各开花一次(指广东地区) 1.5×10°s-FW,于含有1,5mg/lBA,0,5mg/1春天栽苗,当年秋天开花,整体花期达45天。 NAA和0.5mg/12,-D的KM8P的培养基中进 (孙国风) 浅层培养。原生质体培养3~4天后出现一次分950174 裂,七天时流计分裂频嘟为50,3%,培养15天左沙漠玫瑰的组织培养中]周志坚…植物生理学 右可形成细胞团,8~4周后即可形成肉眼可见的通讯,1994,30(4),-279 小愈伤组织,愈伤的植板辜为1,25%。再将愈伤转 茎尖和茎段在芽增殖培养基(MS+BA1.0~ 至个有1,5mg/1BA和0,2mg/12,4-D的MS固体2,0mg/l(单位下同)+KT1.~2.0)继代2~ 扩增培养基上进行扩增,其后可在含有2mg/1BA8次,形成丛生芽。待小苗长至2~2,5cm高时, 和0,5mg/1ZT的MS分化培斧基上分化出芽,其分切出转移到生根培养基(1/2MS+IBA1,0~1,5) 化率为54,17%,分化可于生根培养基中生根形中,20~25天形成完整根系,每株出根3~4条。 成完整植株,移救于盆中,成活卓为93.8%,置于生根率达80%。试管苗在移栽前,炼苗,一个月后 人工气候室中培养,多数生长良好。(孙国凤)可移栽到花盆内培育,7~10个月后可以开花。 (孙国凤) )01994-2008ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouse.Allrightsreservedhttp:/www.cnki.net
950175 在大肠杆菌中由1ac启动子调控表达Fab。非常相 花生属( Arachis L.)多年生野生种组织培养研究似的VL蛋白序列导致两个相应基因同时合成。用 初报[中]/吴爱忠…/上海农学院学报1994,12C-1结构城取代C-k区导致两种功能性Fab和周 (8).-210~214 质可溶性轻链的量增高。C-入-1结构域的序列可通 取顶芽、下胚轴、叶片、带叶腋茎段为外植过增加跨细胞膜的转运或通过减少局质内含体的形 体,接种到不同的选择培养基中培养,观察叶圆成而增加功熊性轻链的产量。{孙雷心) 片8周后形成淡黄色愈伤组织,但未能分化出幼95u178 芽,上胚轴还渐褐化且干枯死。只有顶芽能继续分瓦組覆白生产专,英1/ Unilever/EP-587-312 化生长丛生芽,频率为98%,茎段嫰枝在MS+11,08.92-92GB-016983(16,0394)09,0893As NAA2+BA,上分化出幼劳,正背幼在1/2MS+33EP-306259,94-085209/11(24页)[译自DBA, NAA1上,2后唧诱导昌不定银。选用i/2Ms1994,13(10),94-05667] +NAA1培养基为生板培养基。组培苗经炼苗后,下述步骤生产重组蛋白:利用PCR和寡 移至盆中,长发育成正常的花生小植株。(孙国风)DNA引物对克隆一段序列,得到带有由引物限定 终止部分的克隆,培养转化菌株使之表达蛋白;用 动物细胞培养及单克隆抗体 与至少3~6个引物特异性氨基酸亲和的结合剂测 定或提纯该蛋白。用此法可一起提纯多种重组蛋 白。该蛋白可为抗体重链或轻链可变区。可用下述 经遗传免疫产生单克隆抗体[英]/ Barry,M,A.方法生产朕合抗体:克隆一抗体某链的片段,同时 …!/ BioTechniques,-1994,16(4k),616~用编码第二链的片段转化同一菌株;培养该菌;纯 620[译自DBA,1994,13(10),94-05662] 化前使两链结合。结合剂可为抗体或片段。(孙雷心 研究了利用遗传免疫(G1)生产人生长激素950179 (hST)特异性单抗的情况。将质粒 PlFhGH4的用粒子轰击法将基因导人哺乳类细胞[英]/ Heiser hST基因组序列插入哺乳动物表达载体质粒 pcDN M,C,/Anal, Biochem,-1994,217(2).185 Al,构成CMV-hST。用手持式微弹装置每2周~196译自DBA,199:,13(10),94-05885 次给雌性BALB/c小鼠免疫接种25gCMⅤ 以COS-7和CHO细胞为模型系统,研究了用 hST(包被了DNA的金粒),接种部位为两耳。金微粒将基因导入哺乳类细胞的效率。影响转化效 第三次免疫后第4天处死小鼠制备杂交瘤。将脾细率最重要的参数是粒子大小,距靶远近和室真空 胞与SP2小鼠骨髓瘤细胞融合。阳性杂交瘤产生的度。细胞培养盘的大小也影响转化效率。而氦气 抗体,50%只识别天然蛋白、10%只识别变性蛋压、缝隙大小和巨大载体的迁移距离对转化效率影 白、40%可识別两者。当致免疫蛋白难以纯化或响不大。与其它转化技术比较,用粒子轰击法达到 其结构易经提纯损坏时,可用GI生产特异性单抗。成功地瞬吋或稳定表达所需的DNA量和细胞数目 可用GI法向动物体中同时输入多基因。(孙雷心)均较少。还转化了几种小鼠细胞系,这些细胞系 950177 是以前不曾转化或用其它方法转化水平极低的,这 c--C-k结构域转变对Fab活性的影响及其在大肠些细胞有,原脂肪细胞BMs-2、巨噬细胞J774和 杆菌中的产量英]/ MacKenzie,C.R,…!/Bio/转化的原-B-淋巴细胞(38B9和702/3)细胞系。 Technology.-1994,12(4),390~395译自该法比电穿孔、 lipofection和DEAE-葡聚糖法 得到的瞬时表达水平高。(王颖) 利用合成杂合基囚及恒定结构域搅乱在大肠杆950180 菌中构建并功能性表达编码两种抗碳水化合物Fab用HPLc监测杂交瘤培养过程中的蛋白[英/Gail- 的基因,这两种Fab分别特异于布鲁氏杆菌细胞表lard,I…/ Biotechnol.Tech.-1994,8(4 面多糖和人血A-组决定子。从两个区组组装V ~220[译自DBA,1994,13(10),94-05886] 序列,得到5′-端为 EcoRI位点、3′端为 BSpEI位点 建立了一种层析法用以检测杂交瘤培养上清液 的片段。两抗体均相同的C=K恒定结构域序列经组中的蛋白成份。在一培养基中,用含4Ag/m1胰岛 装成5′-端为 BspEI、3′-端为HindⅣ位惠的片 素、15g/m1转铁蛋白和00/m1牛血清白蛋白 91994-2008ChinaAcademicjOurnalElectronicPublishingHouse.Allrightsreservedhttp://www.cnki.net