华东师范大学：《植物生理学》课程教学资源（实验）常用仪器操作方法——叶绿素荧光仪Junior-PAM中文操作手册.pdf_大学文库

调制叶绿素荧光仪 Junior-PAM 操作手册泽泉科技有限公司，德国 WALZ 公司中国技术服务中心 I 目录 1 安全指导....................................................................................................................1 2 Junior-PAM 组件及安装............................................................................................2 2.1 Junior-PAM 组件.............................................................................................2 2.2 仪器的组装及软件安装.................................................................................3 2.2.1 Junior-PAM 组装..................................................................................3 2.2.2 安装 WinControl-3 软件 .....................................................................3 3 PAM 荧光测定技术和饱和脉冲分析 ......................................................................4 3.1 调制荧光（脉冲－振幅－调制）.................................................................4 3.2 饱和脉冲分析法.............................................................................................6 4 基本实验....................................................................................................................8 4.1 Fo'-Mode 的测量.............................................................................................8 4.2 荧光诱导曲线.................................................................................................9 5 Junior-PAM 控制软件 WinControl-3 的操作..........................................................11 5.1 初始窗口/主窗口 .........................................................................................11 5.1.1 Box (1)主菜单....................................................................................11 5.1.2 Box (2) 数据管理和图形形状的设定..............................................12 5.1.3 Box (3) 侧栏......................................................................................13 5.1.4 Box (4) 饱和脉冲分析数据..............................................................14 5.1.5 Box (5) 在线数据..............................................................................15 5.1.6 Box (6) 饱和脉冲触发......................................................................15 5.1.7 Box(7) 实验的参数及程序...............................................................15 5.1.8 Box (8) 图形形状及荧光仪设置......................................................16 5.1.9 Box (9) 坐标轴调整..........................................................................17 5.1.10 选择纵坐标及进行文本注释..........................................................17 5.1.11 图表区-选择数据 ............................................................................17 5.2 诱导曲线窗口...............................................................................................18 5.3 光响应曲线...................................................................................................18

调制叶绿素荧光仪 Junior-PAM 操作手册泽泉科技有限公司，德国 WALZ 公司中国技术服务中心 II 5.4 饱和脉冲图形窗口.......................................................................................18 5.4.1 Box (2) 数据管理..............................................................................18 5.4.2 Box (3) 侧栏......................................................................................19 5.4.3 饱和脉冲面板....................................................................................19 5.5 报告文件窗口...............................................................................................20 5.5.1 Box (11) 数据管理 ............................................................................20 5.5.2 Box (12) 报告数据区域....................................................................21 5.6 设置窗口.......................................................................................................22 5.6.1 Box (14) 设备名................................................................................22 5.6.2 Box (15) 测量相关设置....................................................................22 5.6.3 Box (16) 光源相关设置....................................................................23 5.6.4 Box (17) 程序相关设置....................................................................23 5.6.5 Box (18) 光强列表............................................................................24 5.7 系统设置.......................................................................................................25 6 参数符号及计算公式..............................................................................................26 6.1 相对荧光产量...............................................................................................26 6.1.1 样品暗适应后进行测定....................................................................26 6.1.2 对光下样品进行测量........................................................................26 6.2 荧光淬灭参数...............................................................................................27 6.3 相对电子传递速率（ETR）.......................................................................28 6.4 光响应曲线...................................................................................................29 6.5 本章参考文献...............................................................................................31 7 一些叶绿素荧光的综述文献..................................................................................33 8 JUNIOR-PAM 技术参数.........................................................................................35

调制叶绿素荧光仪 Junior-PAN操作手册泽泉科技有限公司,德国WALZ公司中国技术服务中心图3.2是一条荧光诱导曲线。当叶片在黑暗状态下长时间暗适应后所有的 PSII反应中心都处于开放状态,可以最大效率的将激发能转化成光化学。即,此时的光化学淬灭是最大的。此时荧光产量最低,记作Fo。暗适应叶片在照光前和照光后分别照射一个饱和脉冲光。“饱和”是指光的强度和持续时间都足够完全还原两个光系统之间的电子载体从而使PSII缺乏电子受体。在缺少电子受体的情况下,PSII的反应中心不能进行光化学反应从而完全关闭,即,光化学淬灭为0。此时,荧光产量达到最大值记作Fm(暗适应后样品)或Fm’(光下样品) 在图3.2中,每次饱和脉冲后照射了几秒钟的远红光。运红光被PSI吸收 (PSII吸收的很少)。PSI吸收远红光后迅速从电子传递链中获得电子从而使 PSI的反应中心打开使光化学淬灭最大化。照远红光使荧光产量降到一个很低的水平,记作Fo 照射光化光时,会在类囊体膜两侧产生跨膜质子梯度(ΔPH)及叶黄素、玉米黄质。跨膜质子梯度和玉米黄质的浓度可以很好的反映非光化学淬灭。当光化光关闭后,跨膜质子梯度瓦解叶黄素逐步转化成堇菜黄质。然而,远红光引起的PSII反应中心开放速度比跨膜质子梯度的瓦解和叶黄素的转化要快。因此,当关闭光化光照射远红光时的最小荧光产量代表的是处于开放状态的PSII反应中心存在非光化学淬灭时的荧光产量。关掉光化光后叶片要暗适应一段时间才能使PSII的反应中心完全打开。综上,饱和脉冲分析法提供的主要信息如下: (1)处于黑暗或照光状态的叶片在照射饱和脉冲时光化学淬灭降到0同时荧光产量达到最大(分别记做Fm或Fm’)。 (2)处于黑暗或照光状态的叶片在照射饱和脉冲前的荧光产量分别记做或Fs 通常情况下我们使用荧光比值而不是荧光产量的绝对值来反映PSII的状态。 WinContro1-3的各荧光比值参数计算公式参考表6.1

调制叶绿素荧光仪 Junior-PAM 操作手册泽泉科技有限公司，德国 WALZ 公司中国技术服务中心 7 图3.2是一条荧光诱导曲线。当叶片在黑暗状态下长时间暗适应后所有的 PSII反应中心都处于开放状态，可以最大效率的将激发能转化成光化学。即，此时的光化学淬灭是最大的。此时荧光产量最低，记作Fo。暗适应叶片在照光前和照光后分别照射一个饱和脉冲光。“饱和”是指光的强度和持续时间都足够完全还原两个光系统之间的电子载体从而使PSII缺乏电子受体。在缺少电子受体的情况下，PSII的反应中心不能进行光化学反应从而完全关闭，即，光化学淬灭为0。此时，荧光产量达到最大值记作Fm（暗适应后样品）或Fm'（光下样品）。在图3.2中，每次饱和脉冲后照射了几秒钟的远红光。运红光被PSI吸收（PSII吸收的很少）。PSI吸收远红光后迅速从电子传递链中获得电子从而使 PSII的反应中心打开使光化学淬灭最大化。照远红光使荧光产量降到一个很低的水平，记作Fo'。照射光化光时，会在类囊体膜两侧产生跨膜质子梯度（ΔPH）及叶黄素、玉米黄质。跨膜质子梯度和玉米黄质的浓度可以很好的反映非光化学淬灭。当光化光关闭后，跨膜质子梯度瓦解叶黄素逐步转化成堇菜黄质。然而，远红光引起的PSII反应中心开放速度比跨膜质子梯度的瓦解和叶黄素的转化要快。因此，当关闭光化光照射远红光时的最小荧光产量代表的是处于开放状态的PSII反应中心存在非光化学淬灭时的荧光产量。关掉光化光后叶片要暗适应一段时间才能使PSII的反应中心完全打开。综上，饱和脉冲分析法提供的主要信息如下：（1）处于黑暗或照光状态的叶片在照射饱和脉冲时光化学淬灭降到0同时荧光产量达到最大（分别记做Fm或Fm'）。（2）处于黑暗或照光状态的叶片在照射饱和脉冲前的荧光产量分别记做Fo 或Fs。通常情况下我们使用荧光比值而不是荧光产量的绝对值来反映PSII的状态。WinControl-3的各荧光比值参数计算公式参考表6.1