网上辅导5(第7-9章) 第七章药物中的杂质检查 第一节药物的杂质及其来源 1.杂质的概念:药物中的杂质是指存在于药物中无治疗作用或者影响药物的疗效和稳 定性,甚至对人体健康有害的一种物质 2.药物的纯度是指药物的纯净程度,它反映了药物质量的优劣。一般来说,药物的纯 净程度是指药物所含杂质的多少。事实上,许多杂质不可能完全除掉。只要将其降低到最低 限度,不妨碍药物的疗效和人体的健康,不影响药物的稳定性以及调配处理,可允许药物中 有一定限量的杂质存在。所以说,纯净的药物是相对的,不纯是绝对的。 3.药用规格与试剂规格的区别: 药物的纯度又称之为药用规格:试剂纯度称之为试剂规格 药用规格 试剂规格 符合国家试剂标准。分等级(如优 符合标准必须符合国家药品标准,不分等级 级纯、分析纯、化学纯等) 所含杂质及其限量以及检查项目以所含杂质及其检查项目,以不影响 检査项目不影响疗效,对人体无毒副作用为分析结果为原则,对砷盐和重金属 原则。重点检查砷盐和重金属等。可以不检查。 药用规格必须经药理实验及临床病 药理实验 试剂规格未经药理实验 例观察。 药物的纯度(药用规格或药用纯度)主要是从保证人民用药安全、有效考虑,而化工产 品及试剂纯度并不考虑杂质的生理作用,仅从杂质可能引起的化学变化,在使用上所产生的 影响以及它们使用的范围和目的来加以规定。所以,二者不能相互代替使用。 4.药物中的杂质主要有两个来源:一是生产过程中引入,二是贮藏过程中产生。 在合成药物的生产过程中,未反应完全的原料、中间体和副产物,在精制时未完全除去, 就会成为产品中的杂质。在药物的生产过程中,还需使用一些试剂、溶剂等,如未能完全除 去,也会带入到最终的产品中去。 如解热镇痛药阿司匹林中游离水杨酸的检査,生产过程是以水杨酸乙酰化制得,如乙酰 化不完全或在贮藏过程中水解,都有可能产生水杨酸,水杨酸不仅对胃有刺激性,而且分子
1 网上辅导 5（第 7-9 章） 第七章 药物中的杂质检查 第一节 药物的杂质及其来源 1．杂质的概念：药物中的杂质是指存在于药物中无治疗作用或者影响药物的疗效和稳 定性，甚至对人体健康有害的一种物质。 2．药物的纯度是指药物的纯净程度，它反映了药物质量的优劣。一般来说，药物的纯 净程度是指药物所含杂质的多少。事实上，许多杂质不可能完全除掉。只要将其降低到最低 限度，不妨碍药物的疗效和人体的健康，不影响药物的稳定性以及调配处理，可允许药物中 有一定限量的杂质存在。所以说，纯净的药物是相对的，不纯是绝对的。 3．药用规格与试剂规格的区别： 药物的纯度又称之为药用规格；试剂纯度称之为试剂规格 药用规格 试剂规格 符合标准 必须符合国家药品标准，不分等级。 符合国家试剂标准。分等级（如优 级纯、分析纯、化学纯等）。 检查项目 所含杂质及其限量以及检查项目以 不影响疗效，对人体无毒副作用为 原则。重点检查砷盐和重金属等。 所含杂质及其检查项目，以不影响 分析结果为原则，对砷盐和重金属 可以不检查。 药理实验 药用规格必须经药理实验及临床病 例观察。 试剂规格未经药理实验。 药物的纯度（药用规格或药用纯度）主要是从保证人民用药安全、有效考虑，而化工产 品及试剂纯度并不考虑杂质的生理作用，仅从杂质可能引起的化学变化，在使用上所产生的 影响以及它们使用的范围和目的来加以规定。所以，二者不能相互代替使用。 4．药物中的杂质主要有两个来源：一是生产过程中引入，二是贮藏过程中产生。 在合成药物的生产过程中，未反应完全的原料、中间体和副产物，在精制时未完全除去， 就会成为产品中的杂质。在药物的生产过程中，还需使用一些试剂、溶剂等，如未能完全除 去，也会带入到最终的产品中去。 如解热镇痛药阿司匹林中游离水杨酸的检查，生产过程是以水杨酸乙酰化制得，如乙酰 化不完全或在贮藏过程中水解，都有可能产生水杨酸，水杨酸不仅对胃有刺激性，而且分子
中的酚羟基,在空气中逐渐被氧化为有色的醌式化合物,使药物变色。因此,中国药典规定 阿司匹林和阿司匹林片剂等制剂都要检查游离的水杨酸 再如,盐酸普鲁卡因原料药不检査对氨基苯甲酸,而盐酸普鲁卡因注射剂在高温灭菌过 程中,可能水解为对氨基苯甲酸和二乙氨基乙醇,因此注射剂中则要检查对氨基苯甲酸 在药品的贮藏过程中,尤其是贮藏保管不善,或贮藏时间过长,在外界条件如温度、湿 度、日光、空气的影响下,或因微生物的作用,可能发生水解、氧化、分解、异构化、晶型 转变、聚合、潮解和发霉等变化,使药物中产生有关的杂质 5.药物中的杂质按来源分类,可分为一般杂质和特殊杂质。 般杂质是指在自然界中分布较广泛,在多种药物的生产和贮藏过程中容易引入的杂 质,如氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐、酸碱、水分等。共12项,重点是前5项 特殊杂质是指在药物的生产和贮藏过程中,根据该药物的性质、生产方法和工艺条件, 有可能引入的杂质。如阿司匹林中的游离水杨酸,盐酸普鲁卡因注射剂中对氨基苯甲酸,肾 上腺素中的肾上腺酮等。 药物中的杂质按其性质还可以分为信号杂质和有害杂质。信号杂质本身一般无害,但 其限量的多少可以反映出药物的纯度水平,如限量过大,表明药物的纯度差,因此也称为指 示性杂质。氯化物、硫酸盐等就属于信号杂质。重金属、砷盐、氰化物等,对人体有毒害 为有害杂质,在质量标准中必须严格控制,以保证用药的安全。 药物中的杂质按其结构又可分为无机杂质和有机杂质 第二节药物中杂质的限量检查 1.杂质限量检查 药物中所含杂质的最大允许量,叫做杂质限量。药物中杂质的检查,一般不要求准确 测定其含量,而只检查杂质的量是否超过一定的限量。这种杂质检查的方法叫做杂质的限量 检查( Limit test)。在药品质量标准中杂质检查多数为限量检査 2.杂质限量检查方法 对照法(最常用的方法)、灵敏度法和比较法 3.杂质限量的计算 供试品中所含杂质的量,是通过与一定量的杂质标准溶液进行比较来确定,杂质的最大 允许量也就是杂质标准溶液的浓度(C)与体积(V)的乘积。杂质的限量通常用百分之几 或百万分之几(ppm)来表示
2 中的酚羟基，在空气中逐渐被氧化为有色的醌式化合物，使药物变色。因此，中国药典规定： 阿司匹林和阿司匹林片剂等制剂都要检查游离的水杨酸。 再如，盐酸普鲁卡因原料药不检查对氨基苯甲酸，而盐酸普鲁卡因注射剂在高温灭菌过 程中，可能水解为对氨基苯甲酸和二乙氨基乙醇，因此注射剂中则要检查对氨基苯甲酸。 在药品的贮藏过程中，尤其是贮藏保管不善，或贮藏时间过长，在外界条件如温度、湿 度、日光、空气的影响下，或因微生物的作用，可能发生水解、氧化、分解、异构化、晶型 转变、聚合、潮解和发霉等变化，使药物中产生有关的杂质。 5．药物中的杂质按来源分类，可分为一般杂质和特殊杂质。 一般杂质是指在自然界中分布较广泛，在多种药物的生产和贮藏过程中容易引入的杂 质，如氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐、酸碱、水分等。共 12 项，重点是前 5 项。 特殊杂质是指在药物的生产和贮藏过程中，根据该药物的性质、生产方法和工艺条件， 有可能引入的杂质。如阿司匹林中的游离水杨酸，盐酸普鲁卡因注射剂中对氨基苯甲酸，肾 上腺素中的肾上腺酮等。 药物中的杂质按其性质还可以分为信号杂质和有害杂质。信号杂质本身一般无害，但 其限量的多少可以反映出药物的纯度水平，如限量过大，表明药物的纯度差，因此也称为指 示性杂质。氯化物、硫酸盐等就属于信号杂质。重金属、砷盐、氰化物等，对人体有毒害， 为有害杂质，在质量标准中必须严格控制，以保证用药的安全。 药物中的杂质按其结构又可分为无机杂质和有机杂质。 第二节 药物中杂质的限量检查 1．杂质限量检查 药物中所含杂质的最大允许量，叫做杂质限量。药物中杂质的检查，一般不要求准确 测定其含量，而只检查杂质的量是否超过一定的限量。这种杂质检查的方法叫做杂质的限量 检查（Limit test）。在药品质量标准中杂质检查多数为限量检查。 2．杂质限量检查方法 对照法（最常用的方法）、灵敏度法和比较法 3．杂质限量的计算 供试品中所含杂质的量，是通过与一定量的杂质标准溶液进行比较来确定，杂质的最大 允许量也就是杂质标准溶液的浓度（C）与体积（V）的乘积。杂质的限量通常用百分之几 或百万分之几（ppm）来表示
杂质限量。杂质最大允许量x100% 供试品量 杂质限量 标准溶液的浓度ⅹ标准溶液的体积 供试品量 C 100% 第三节一般杂质检查的原理与方法 氯化物检查法 、硫酸盐检查法 、铁盐检查法 四、重金属检查法五、砷盐检查法 六、酸碱度检查法 七、溶液颜色检査法八、易炭化物检査法九、澄清度检査法 十、炽灼残渣检査法 干燥失重测定法十二、有机溶剂残留量测定法 重点:氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐的检査。主要包括检査的基本原理、操 作方法、加入试剂的目的和注意事项等,特别是砷盐和重金属的检査。 其它一般杂质检查的概念、目的和意义。比如为什么要检查有机溶剂残留量?什么叫炽 灼残渣检查法?什么叫干燥失重测定法等? 第四节特殊杂质的检查原理方法 特殊杂质的检查方法,主要是根据药物和杂质在物理和化学性质上的差异来进行 重点是显色法和沉淀法、分光光度法、色谱法中的薄层色谱和高效液相色谱法。 第八章巴比妥类药物的分析 巴比妥类药物均具有共同结构的母核,不同的取代基,其分析方法多基于其分子中的 基本结构(1,3-二酰亚胺基团)的性质而决定。 主要化学性质: 1.弱酸性:巴比妥类药物可发生互变异构形成稀醇式结构,而显弱酸性。 2.水解性:巴比妥类药物与碱液共沸即水解而产生氨气 3.与重金属离子的反应:可与重金属离子生成有色或不溶性的沉淀。巴比妥类药物显 紫堇色或紫色沉淀,含硫的巴比妥则显绿色 4.紫外吸收光谱特征:在一定的碱性溶液中可发生电离,具有紫外吸收特性。 鉴别试验 重点:一是与重金属的反应;二是特殊取代基(不饱和烃基取代、芳环取代)和硫元
3 第三节 一般杂质检查的原理与方法 一、氯化物检查法 二、硫酸盐检查法 三、铁盐检查法 四、重金属检查法 五、砷盐检查法 六、酸碱度检查法 七、溶液颜色检查法 八、易炭化物检查法 九、澄清度检查法 十、炽灼残渣检查法 十一、干燥失重测定法 十二、有机溶剂残留量测定法 重点：氯化物、硫酸盐、 铁盐、重金属、砷盐的检查。主要包括检查的基本原理、操 作方法、加入试剂的目的和注意事项等，特别是砷盐和重金属的检查。 其它一般杂质检查的概念、目的和意义。比如为什么要检查有机溶剂残留量？什么叫炽 灼残渣检查法？什么叫干燥失重测定法等？ 第四节 特殊杂质的检查原理方法 特殊杂质的检查方法，主要是根据药物和杂质在物理和化学性质上的差异来进行。 重点是显色法和沉淀法、分光光度法、色谱法中的薄层色谱和高效液相色谱法。 第八章 巴比妥类药物的分析 巴比妥类药物均具有共同结构的母核，不同的取代基，其分析方法多基于其分子中的 基本结构（1,3-二酰亚胺基团）的性质而决定。 一、主要化学性质： 1．弱酸性：巴比妥类药物可发生互变异构形成稀醇式结构，而显弱酸性。 2. 水解性： 巴比妥类药物与碱液共沸即水解而产生氨气。 3. 与重金属离子的反应：可与重金属离子生成有色或不溶性的沉淀。巴比妥类药物显 紫堇色或紫色沉淀，含硫的巴比妥则显绿色。 4. 紫外吸收光谱特征：在一定的碱性溶液中可发生电离，具有紫外吸收特性。 二、鉴别试验 重点：一是与重金属的反应；二是特殊取代基（不饱和烃基取代、芳环取代）和硫元 = 100% 供试品量 杂质最大允许量 杂质限量 100% = 供试品量 标准溶液的浓度 标准溶液的体积 杂质限量 100% = S C V L
素的鉴别试验 三、含量测定重点:银量法、溴量法 (一)银量法 1.原理:巴比妥类药物在一定的碱性溶液中,可与银离子定量形成盐。因此,可采用 银量法测定本类药物及其制剂的含量。 在滴定过程中,巴比妥类药物首先形成可溶性的一银盐,当被测定的巴比妥类药物完全 形成一银盐后,稍过量的银离子与药物形成难溶性的二银盐沉淀,使溶液变浑浊,从而指示 滴定终点 2.测定方法: 以异戊巴比妥的含量测定为例。反应的摩尔比为1:1;即:每lml硝酸银滴定液 (0.1moL)相当于2483mg的异戊巴比妥钠。 3.含量计算: 含量%=7××Fx103 100% (二)溴量法 1.原理:5位有烯丙基取代的巴比妥类药物,其不饱和键能与溴定量地发生加成反应 故可用溴量法测定其含量。 反应的摩尔比1:2;每lm溴滴定液相当于130lmg的司可巴比妥钠。 2.含量计算: 含量n-12xC×1301x10-×100 0.1×W (三)紫外分光光度法测定 巴比妥类药物在碱性溶液中,具有特征性的紫外吸收,因而可采用紫外分光光度法测定 其含量。本法广泛用于巴比妥类药物原料和制剂的含量测定,以及固体制剂的溶出度和含量 均匀度检查。当供试品含有干扰物质时,需要经过提取分离后,再进行测定。 1.直接紫外分光光度法测定 供试品中硫喷妥钠的量按下式计算: 硫喷妥钠(mg)=A/xCr×l03×D×1.091 2.提取后紫外分光光度法测定 将巴比妥类药物的钠盐转变为母体药物,提取后再进行测定,可消除干扰物质的影响。 如苯巴比妥钠的含量测定,可根据苯巴比妥在氯仿中易溶解,而苯巴比妥钠则易溶于水的特
4 素的鉴别试验。 三、含量测定 重点：银量法、溴量法 （一）银量法 1．原理：巴比妥类药物在一定的碱性溶液中，可与银离子定量形成盐。因此，可采用 银量法测定本类药物及其制剂的含量。 在滴定过程中，巴比妥类药物首先形成可溶性的一银盐，当被测定的巴比妥类药物完全 形成一银盐后，稍过量的银离子与药物形成难溶性的二银盐沉淀，使溶液变浑浊，从而指示 滴定终点。 2．测定方法： 以异戊巴比妥的含量测定为例。反应的摩尔比为 1：1；即：每 1ml 硝酸银滴定液 （0.1mol/L）相当于 24.83mg 的异戊巴比妥钠。 3．含量计算： （二）溴量法 1．原理：5 位有烯丙基取代的巴比妥类药物，其不饱和键能与溴定量地发生加成反应， 故可用溴量法测定其含量。 反应的摩尔比 1：2；每 1ml 溴滴定液相当于 13.01mg 的司可巴比妥钠。 2．含量计算： （三）紫外分光光度法测定 巴比妥类药物在碱性溶液中，具有特征性的紫外吸收，因而可采用紫外分光光度法测定 其含量。本法广泛用于巴比妥类药物原料和制剂的含量测定，以及固体制剂的溶出度和含量 均匀度检查。当供试品含有干扰物质时，需要经过提取分离后，再进行测定。 1. 直接紫外分光光度法测定 供试品中硫喷妥钠的量按下式计算： 硫喷妥钠（mg）＝As/Ar×Cr×10-3×D×1.091 2.提取后紫外分光光度法测定 将巴比妥类药物的钠盐转变为母体药物，提取后再进行测定，可消除干扰物质的影响。 如苯巴比妥钠的含量测定，可根据苯巴比妥在氯仿中易溶解，而苯巴比妥钠则易溶于水的特 含量%= T×V ×F×10 -3 W ×100% 含量%= W ×100% (V0 V) ×C ×13.01×10 -3 0.1×
点,进行测定。 计算:苯巴比妥钠(mg)=Ar×C×1.095×5 第九章芳酸及其酯类药物的分析 第一节结构与性质 结构和分类 本类药物都具有芳酸和芳酸酯类的结构,主要包括芳酸及其酯类,以及芳酸盐等。 (一)水杨酸类:阿司匹林、水杨酸钠、对氨基水杨酸钠 (二)苯甲酸类:苯甲酸、苯甲酸钠、丙磺舒 (三)其它芳酸类:布洛芬、氯贝丁酯 性质 1.酸性:药用芳酸的pka一般在3~6之间,属于中等强度的酸或弱酸 芳酸类药物的酸性强度与分子中芳环以及芳环上取代基有关。 芳酸分子中苯环上如具有卤素、硝基、羟基、羧基等电负性大的吸电子基团,由于吸电 子效应能使苯环电子云密度降低,使氢质子较易解离,故酸性增强。 反之,分子中如具有甲基、氨基等斥电子基团,则能增加苯环的电子云密度,从而降低 氢-氧键极性,酸性减弱。 2.水解反应:芳酸酯易水解,在有酸或碱存在下,加热,可加速水解反应;利用芳酸 酯类药物水解后,所生成的酸和醇,可鉴别相应的芳酸酯 3.紫外吸收光谱特征: 第二节錾别反应 、三氯化铁反应 具有酚羟基的药物在中性或弱酸性条件下,与三氯化铁试液反应,生成紫堇色配位化合 物。反应适宜的pH为4-6,在强酸性溶液中配位化合物分解。 1.对氨基水杨酸钠取供试品,加稀盐酸呈酸性后,加三氯化铁试液,即显紫红色 2.阿司匹林分子中的酚羟基已成酯,可先加热水解,使酚羟基游离后,才能与三氯化 铁反应。例如中国药典阿司匹林的鉴别反应为:取本品约0.1g,加水10m1,煮沸放冷后 加三氯化铁试液1滴,即显紫堇色。 3.苯甲酸及其钠盐不显上述反应,但其碱性水溶液或中性溶液,与三氯化铁试液反应 生成碱式苯甲酸铁盐的赭色沉淀,可与水杨酸类药物相区别
5 点，进行测定。 计算：苯巴比妥钠（mg）＝As/Ar×Cr×1.095×5 第九章 芳酸及其酯类药物的分析 第一节 结构与性质 一、结构和分类 本类药物都具有芳酸和芳酸酯类的结构，主要包括芳酸及其酯类，以及芳酸盐等。 （一）水杨酸类： 阿司匹林、水杨酸钠、对氨基水杨酸钠 （二）苯甲酸类：苯甲酸、苯甲酸钠、丙磺舒 （三）其它芳酸类：布洛芬、氯贝丁酯 二、性质 1．酸性：药用芳酸的 pKa 一般在 3~6 之间，属于中等强度的酸或弱酸。 芳酸类药物的酸性强度与分子中芳环以及芳环上取代基有关。 芳酸分子中苯环上如具有卤素、硝基、羟基、羧基等电负性大的吸电子基团，由于吸电 子效应能使苯环电子云密度降低，使氢质子较易解离，故酸性增强。 反之，分子中如具有甲基、氨基等斥电子基团，则能增加苯环的电子云密度，从而降低 氢-氧键极性，酸性减弱。 2．水解反应：芳酸酯易水解，在有酸或碱存在下，加热，可加速水解反应；利用芳酸 酯类药物水解后，所生成的酸和醇，可鉴别相应的芳酸酯。 3．紫外吸收光谱特征： 第二节 鉴别反应 一、三氯化铁反应 具有酚羟基的药物在中性或弱酸性条件下，与三氯化铁试液反应，生成紫堇色配位化合 物。反应适宜的 pH 为 4~6，在强酸性溶液中配位化合物分解。 1．对氨基水杨酸钠 取供试品，加稀盐酸呈酸性后，加三氯化铁试液，即显紫红色。 2．阿司匹林分子中的酚羟基已成酯，可先加热水解，使酚羟基游离后，才能与三氯化 铁反应。例如中国药典阿司匹林的鉴别反应为：取本品约 0.1g，加水 10m1，煮沸放冷后， 加三氯化铁试液 1 滴，即显紫堇色。 3．苯甲酸及其钠盐不显上述反应，但其碱性水溶液或中性溶液，与三氯化铁试液反应， 生成碱式苯甲酸铁盐的赭色沉淀，可与水杨酸类药物相区别
4,丙磺舒与少量NaOH试液生成钠盐后,在pH50-60的水溶液中,与三氯化铁试液 反应,生成米黄色沉淀。 二、水解反应 阿司匹林与碳酸钠试液加热水解,可得水杨酸钠和醋酸钠,加过量稀硫酸酸化后,则析 出白色水杨酸沉淀,并产生醋酸的臭味 三、重氮化偶合反应 1.对氨基水杨酸钠:对氨基水杨酸钠具有芳伯氨基结构,与亚硝酸钠试液进行重氮化 反应,生成的重氮盐在碱性溶液中,与β-萘酚偶合生成橙红色沉淀 2.贝诺酯:贝诺酯具有潜在的芳伯氨基,可加酸水解后,产生芳伯氨基结构,再与亚 硝酸钠试液进行重氮化反应,生成的重氮盐与碱性β-萘酚偶合,产生橙红色沉淀。 第三节特殊杂质检查 阿司匹林中游离水杨酸的检查 生产过程中乙酰化不完全或贮藏过程中水解产生的水杨酸,对人体有毒性,而且分子中 酚羟基在空气中被逐渐氧化成一系列醌型有色物质,使阿司匹林成品变色 原理:利用阿司匹林结构中无游离酚羟基,不能与高铁盐作用,而水杨酸则可与高铁盐 反应显紫堇色,与一定量水杨酸对照溶液所呈的色泽比较,从而控制游离水杨酸的限量 对氨基水杨酸钠中间氨基酚的检查 对氨基水杨酸钠的合成以间氨基酚为原料。因此在成品中可能有未反应完全的间氨基 酚;对氨基水杨酸钠又不稳定,在日光或遇热受潮时,也可脱羧生成间氨基酚,再被氧化成 二苯醌型化合物,色渐变深,呈明显的红棕色。间氨基酚的存在不仅导致药物变色,且有毒 性。中国药典采用双相滴定法 检査原理:利用对氨基水杨酸钠不溶于乙醚,而间氨基酚易溶于乙醚的特性,用乙醚提 取杂质后,在乙醚中加入适量的水,用盐酸滴定液(0.02molL)滴定,以消耗一定量盐酸 滴定液来控制其限量。该法为双相滴定法,所生成的盐酸盐在乙醚中不溶,而转溶于水相中, 氯贝丁酯中特殊杂质的检查 生产氯贝丁酯的原料中,可能存在合成中间体对氯苯氧异丁酸,在放置过程中,也可能 分解产生对氯苯氧异丁酸。氯贝丁酯合成的起始原料对氯酚,在成品中常有微量存在,因其 毒性大,各国药典均采用气相色谱法对其进行对氯酚检査 第四节含量测定 酸碱滴定法(重点):本类药物中一部分具有游离羧基,pKa值一般在3-6之间
6 4．丙磺舒与少量 NaOH 试液生成钠盐后，在 pH5.0~6.0 的水溶液中，与三氯化铁试液 反应，生成米黄色沉淀。 二、水解反应 阿司匹林与碳酸钠试液加热水解，可得水杨酸钠和醋酸钠，加过量稀硫酸酸化后，则析 出白色水杨酸沉淀，并产生醋酸的臭味。 三、重氮化-偶合反应 1．对氨基水杨酸钠：对氨基水杨酸钠具有芳伯氨基结构，与亚硝酸钠试液进行重氮化 反应，生成的重氮盐在碱性溶液中，与β-萘酚偶合生成橙红色沉淀。 2．贝诺酯：贝诺酯具有潜在的芳伯氨基，可加酸水解后，产生芳伯氨基结构，再与亚 硝酸钠试液进行重氮化反应，生成的重氮盐与碱性β-萘酚偶合，产生橙红色沉淀。 第三节 特殊杂质检查 一、阿司匹林中游离水杨酸的检查 生产过程中乙酰化不完全或贮藏过程中水解产生的水杨酸，对人体有毒性，而且分子中 酚羟基在空气中被逐渐氧化成一系列醌型有色物质，使阿司匹林成品变色。 原理：利用阿司匹林结构中无游离酚羟基，不能与高铁盐作用，而水杨酸则可与高铁盐 反应显紫堇色，与一定量水杨酸对照溶液所呈的色泽比较，从而控制游离水杨酸的限量。 二、对氨基水杨酸钠中间氨基酚的检查 对氨基水杨酸钠的合成以间氨基酚为原料。因此在成品中可能有未反应完全的间氨基 酚；对氨基水杨酸钠又不稳定，在日光或遇热受潮时，也可脱羧生成间氨基酚，再被氧化成 二苯醌型化合物，色渐变深，呈明显的红棕色。间氨基酚的存在不仅导致药物变色，且有毒 性。中国药典采用双相滴定法。 检查原理：利用对氨基水杨酸钠不溶于乙醚，而间氨基酚易溶于乙醚的特性，用乙醚提 取杂质后，在乙醚中加入适量的水，用盐酸滴定液（0.02mol/L）滴定，以消耗一定量盐酸 滴定液来控制其限量。该法为双相滴定法，所生成的盐酸盐在乙醚中不溶，而转溶于水相中。 三、氯贝丁酯中特殊杂质的检查 生产氯贝丁酯的原料中，可能存在合成中间体对氯苯氧异丁酸，在放置过程中，也可能 分解产生对氯苯氧异丁酸。氯贝丁酯合成的起始原料对氯酚，在成品中常有微量存在，因其 毒性大，各国药典均采用气相色谱法对其进行对氯酚检查。 第四节 含量测定 一、酸碱滴定法（重点）：本类药物中一部分具有游离羧基，pKa 值一般在 3~6 之间
因此可用酸碱滴定法进行滴定 (一)直接滴定法 阿司匹林分子中含有游离羧基,pKa为3.49,可用碱滴定液直接滴定。每lm氢氧化钠 滴定液(0.1moL)相当于18.02mg的阿司匹林(CHO4)。反应的摩尔比为1:1 含量G T×I×F×10 (二)水解后剩余滴定法 1.原理:阿司匹林分子中酯结构,在碱性溶液中易于水解的性质,加定量过量碱滴定 液,加热使酯水解,剩余的碱用酸滴定液回滴。可根据消耗碱的量,计算含量。 2.方法:取本品1.5g→精密称定→加NaOH滴定液(0.5moL)500ml→缓缓煮沸 10min 放冷→加酚酞指示液→用硫酸滴定液(0.25mol/L)滴定剩余NaOH→并将滴定结果用空白 试验校正。每lml氢氧化钠滴定液(0.5mol/L)相当于45.04mg的阿司匹林(CHsO4)。 3.计算:反应的摩尔比为1:2 含量% (V-)×C×45.04×10-3 100% 0.25×W (三)两步滴定法 由于阿司匹林片剂和肠溶片中,加入少量枸橼酸或酒石酸作为稳定剂,并且阿司匹林片 剂在制备和贮藏过程中,还可能发生水解,生成水杨酸和醋酸。因此采用上述两种方法时, 酸性的附加剂和酸性的降解产物可干扰测定。为了消除这些酸性物质的干扰,可先中和供试 品中共存的酸,再将阿司匹林在碱性条件下水解,采用剩余滴定法测定。称为两步滴定法。 1.中和:精密称取片粉适量,加中性乙醇溶解后,以酚酞为指示剂,用NaOH滴定液 (o.lmol/L)滴定至溶液显粉红色。此时中和了所有存在的游离酸(水杨酸、醋酸、枸橼酸 或酒石酸等),阿司匹林同时形成钠盐 2.水解与测定:在中和后的供试品溶液中,加入定量过量的NaOH滴定液(0.1moL) 40m,置水浴上加热使酯结构水解完全,放冷至室温,用硫酸滴定液(0.05moI)滴定剩 余的碱,并将滴定结果用空白试验校正 3.计算:反应的摩尔比为1:1。 标示量%=(1-12×C×1802×x0xm100% 0.05×Wx标示量 双相滴定法(重点) 7
7 因此可用酸碱滴定法进行滴定。 （一）直接滴定法 阿司匹林分子中含有游离羧基，pKa 为 3.49，可用碱滴定液直接滴定。每 1ml 氢氧化钠 滴定液（0.1mol/L）相当于 18.02mg 的阿司匹林（C9H8O4）。反应的摩尔比为 1：1。 （二）水解后剩余滴定法 1．原理：阿司匹林分子中酯结构，在碱性溶液中易于水解的性质，加定量过量碱滴定 液，加热使酯水解，剩余的碱用酸滴定液回滴。可根据消耗碱的量，计算含量。 2．方法：取本品 1.5g→精密称定→加 NaOH 滴定液（0.5mol/L）50.0ml→缓缓煮沸 10min →放冷→加酚酞指示液→用硫酸滴定液（0.25mol/L）滴定剩余 NaOH→并将滴定结果用空白 试验校正。每 1ml 氢氧化钠滴定液（0.5mol/L）相当于 45.04mg 的阿司匹林（C9H8O4）。 3．计算：反应的摩尔比为 1：2。 （三）两步滴定法 由于阿司匹林片剂和肠溶片中，加入少量枸橼酸或酒石酸作为稳定剂，并且阿司匹林片 剂在制备和贮藏过程中，还可能发生水解，生成水杨酸和醋酸。因此采用上述两种方法时， 酸性的附加剂和酸性的降解产物可干扰测定。为了消除这些酸性物质的干扰，可先中和供试 品中共存的酸，再将阿司匹林在碱性条件下水解，采用剩余滴定法测定。称为两步滴定法。 1．中和：精密称取片粉适量，加中性乙醇溶解后，以酚酞为指示剂，用 NaOH 滴定液 （0.1mol/L）滴定至溶液显粉红色。此时中和了所有存在的游离酸（水杨酸、醋酸、枸橼酸 或酒石酸等），阿司匹林同时形成钠盐。 2．水解与测定：在中和后的供试品溶液中，加入定量过量的 NaOH 滴定液（0.1mol/L） 40ml，置水浴上加热使酯结构水解完全，放冷至室温，用硫酸滴定液（0.05mo1/L）滴定剩 余的碱，并将滴定结果用空白试验校正。 3．计算：反应的摩尔比为 1：1。 100% 0.05 标示量 （ ） 18.02 10 标示量% 3 0 − = − W V V C W 二、双相滴定法（重点）： 含量%= T×V ×F×10 -3 W ×100% 100% 0.25 （ ） 45.04 10 含量% 3 0 − = − W V V C
芳酸类药物的碱金属盐,易溶于水,其水溶液呈碱性,可用盐酸滴定。但是由于母体药 物的酸性较强,因而其共轭碱的碱性较弱,使滴定终点的突跃不明显,另一方面,在滴定过 程中生成的酸一般不溶于水,不利于终点的正确判断。苯甲酸钠的含量测定如下 1.原理:本法是利用苯甲酸溶于有机溶剂这一性质,在水相中加入与水不相混溶的有 机溶剂,在滴定过程中将生成的苯甲酸不断萃取入有机相,减小苯甲酸在水相中的浓度,并 减少苯甲酸的解离,使滴定反应进行完全,终点清晰 2.方法:取本品15g,精密称定,置分液漏斗中,加水25m、乙醚5oml及甲基橙指 示液2滴,用盐酸滴定液(0.5molL)滴定,边滴定边振摇,至水层显橙红色:分取水层, 置具塞锥形瓶中,乙醚层用水5m洗涤,洗液并入锥形瓶中,加乙醚20ml,继续用盐酸滴 定液(0.5mo仉)滴定,边滴定边振摇,至水层显持续的橙红色 反应的摩尔比为1:1。 每lml盐酸滴定液(0.5moL)相当于72.06mg的苯甲酸钠(C7H5NaO2) 三、高效液相色谱法 1.基本原理 反相离子对高效液相色谱法是将离子对试剂(又称反离子试剂)加入极性的流动相中, 与流动相中的药物离子生成不带电荷的离子对。这种离子对在非极性固定相中的溶解度增 进而分离酸性或碱性有机药物 般用缓冲溶液控制流动相的酸碱度,使药物和离子对试剂主要以解离形式存在,有利 于形成离子对。以增加药物在反相色谱系统中的保留值。 方法选择 对酸性药物,一般选择带正电荷的有机铵盐作为反离子,如氢氧化四丁基铵: 对碱性药物,则通常选择带负电荷的烃基磺酸盐等作为反离子试剂,如庚烷磺酸钠和十 二烷基磺酸钠等。 对氨基水杨酸钠分子中具有羧基,选用氢氧化四丁基铵作为反离子,可调整对氨基水杨 酸钠的保留行为,改善保留值的重现性和色谱峰的对称性 采用内标法定量
8 芳酸类药物的碱金属盐，易溶于水，其水溶液呈碱性，可用盐酸滴定。但是由于母体药 物的酸性较强，因而其共轭碱的碱性较弱，使滴定终点的突跃不明显，另一方面，在滴定过 程中生成的酸一般不溶于水，不利于终点的正确判断。苯甲酸钠的含量测定如下。 1．原理：本法是利用苯甲酸溶于有机溶剂这一性质，在水相中加入与水不相混溶的有 机溶剂，在滴定过程中将生成的苯甲酸不断萃取入有机相，减小苯甲酸在水相中的浓度，并 减少苯甲酸的解离，使滴定反应进行完全，终点清晰。 2．方法：取本品 1.5g，精密称定，置分液漏斗中，加水 25ml、乙醚 50m1 及甲基橙指 示液 2 滴，用盐酸滴定液（0.5mol/L）滴定，边滴定边振摇，至水层显橙红色；分取水层， 置具塞锥形瓶中，乙醚层用水 5ml 洗涤，洗液并入锥形瓶中，加乙醚 20ml，继续用盐酸滴 定液（0.5mol/L）滴定，边滴定边振摇，至水层显持续的橙红色。 反应的摩尔比为 1：1。 每 1ml 盐酸滴定液（0.5mol/L）相当于 72.06mg 的苯甲酸钠（C7H5NaO2）。 三、高效液相色谱法 1．基本原理 反相离子对高效液相色谱法是将离子对试剂（又称反离子试剂）加入极性的流动相中， 与流动相中的药物离子生成不带电荷的离子对。这种离子对在非极性固定相中的溶解度增 加，进而分离酸性或碱性有机药物。 一般用缓冲溶液控制流动相的酸碱度，使药物和离子对试剂主要以解离形式存在，有利 于形成离子对。以增加药物在反相色谱系统中的保留值。 2．方法选择 对酸性药物，一般选择带正电荷的有机铵盐作为反离子，如氢氧化四丁基铵； 对碱性药物，则通常选择带负电荷的烃基磺酸盐等作为反离子试剂，如庚烷磺酸钠和十 二烷基磺酸钠等。 对氨基水杨酸钠分子中具有羧基，选用氢氧化四丁基铵作为反离子，可调整对氨基水杨 酸钠的保留行为，改善保留值的重现性和色谱峰的对称性。 采用内标法定量
