急性经口毒性试验
急性毒性试验 ·实验动物的选择(物种和品系,年龄和体 重,性别,分组,预检,禁食)(who?) ·受试物(what?) ·染毒方法how?) ·剂量选择(how?) ·毒性作用观察ending)
一、实验目的 ·1.学习急性毒性试验的实验设计原则 ·2.掌握灌胃技术,随机分组方法 ·3.掌握LD50的计算方法 ·4.观察和描述受试物的中毒特征 ·5.掌握急性毒性分级标准
急性毒性作用: 指机体一次接触或24小时内多次接触化学物后 在短期(最长到14天)内所发生的毒性效应,包 括一般行为、外观改变、大体形态变化以及死亡 效应
LD5o:半数致死剂量 指引起一组受试实验动物半数死亡的剂量。常 用以表示急性毒性的大小。 其值越小,表示外源化学物的毒性越强;反之, 毒性越低。 LDso是经过统计学计算得到的毒性参数,是一 个统计量,受实验动物个体易感性差异的影响较 小,因此是最重要的急性毒性参数
二、实验原理 选择健康的实验动物,根据体重按随机分组的方 法,依据LD50计算的设计原则将动物分成数个染毒组。 给予受试物后,了解动物所产生的急性毒性反应及其 严重程度,中毒死亡的特征以及可能的死亡原因,观 察受试物毒性唇应与剂量的关系,求共半数致死剂量 (LDs0),并根据LD5O值将受试物进行急性毒性分级。 本次实验采用改进寇民法。 改进寇氏法:利用剂量对数与死亡率呈$型曲线 而设计的方法。要求如下: 每个染毒剂量组动物数相同, 各剂量组组距呈等比级数, 死亡率呈正态分布, 最低剂量组死亡率80%
三、材料和试剂 1.实验动物:健康成年小鼠,昆明种,普通级,雌 雄各60只 2器材:灌胃针,注射器,吸管,容量瓶,滴管, 动物体重秤等 3.试剂:受试物为1.3g/ml敌敌畏油溶液(湖北荆 州),植物油,苦味酸(染色标记)
四、操作步骤 1.实验动物选择:昆明种小鼠,雌雄各60(上午) 2.实验动物的随机分组和标记(上午) 3.剂量设计及受试物配制(上午) 4.经口染毒(下午) 5.中毒体征和动物死亡情况观察记录(下午) 6.LD50的计算(次日下午) 7.结果评价、完成实习报告(次日下午)
实验动物的随机分组 雌雄分开分组,每种性别分6组,每组10只 1.动物称重:按体重分在不同笼中待分组 24g 2.随机分组方法 每种性别随机分为6组:A、B、C、D、E,F,每轮分别从笼中取一只动 物按如下顺序到各组,直到动物取完。(雌雄分别分组) 第一轮:A、B、C、D、E、F 第二轮:B、C、D、E、F、A 第三轮:C、D、E、F、A、B 第四轮:D、E、F、A、B、C 第五轮:E、F、A、B、C、D 第六轮:F、A、B、C、D、E 雌雄各5组为剂量组,各剩一组作为溶剂对照(只灌植物油)和备用。 分完组后在笼子上做好标记,动物暂不标记,下午灌胃前再标记
剂量设计 预实验得出LD1o0、LD0,各设置五个剂量组,n=5 i=(lg LD100-lg LDo)/(n-1),k=10i 雌性: 雄性: LD100=240mg/kg LD100=250mg/kg LDo=90mg/kg LDo=100mg/kg