第六章酶 、填空题 1.全酶由 和 组成,在催化反应时,二者 所起的作用不同,其中 决定酶的专一性和高效率, 起传递电子、原子或化学基团的作用 2.酶是由_ 产生的,具有催化能力的 3.酶的活性中心包括 和 两个功能部位, 其中 直接与底物结合,决定酶的专一性, 是发生化学变化的部位,决定催化反应的性质 4.常用的化学修饰剂DFP可以修饰 残基,TPCK常用于修饰 残基。 5.酶促动力学的双倒数作图 Lineweaver-Burk作图法),得到的直线在横轴 上的截距为 ,纵轴上的截距为 6.磺胺类药物可以抑制」 酶,从而抑制细菌生长繁殖。 7.谷氨酰胺合成酶的活性可以被 共价修饰调节;糖原合成 酶、糖原磷酸化酶等则可以被 共价修饰调节。 二、是非题 1.[]对于可逆反应而言,酶既可以改变正反应速度,也可以改变逆反应速 2.[]酶活性中心一般由在一级结构中相邻的若干氨基酸残基组成。 3.[]酶活力的测定实际上就是酶的定量测定。 4.[]Km是酶的特征常数,只与酶的性质有关,与酶浓度无关。 5.[]当[S]>>Km时,Vv趋向于Vmax,此时只有通过增加[E]来增加v。 6.[]酶的最适温度与酶的作用时间有关,作用时间长,则最适温度高,作 用时间短,则最适温度低 7.[]增加不可逆抑制剂的浓度,可以实现酶活性的完全抑制。 8.[]正协同效应使酶促反应速度增加。 9.[]竞争性可逆抑制剂一定与酶的底物结合在酶的同一部位 10.[]酶反应的最适p只取决于酶蛋白本身的结构。 、选择题 1.[]利用恒态法推导米氏方程时,引入了除哪个外的三个假设? A.在反应的初速度阶段,E+P→ES可以忽略 B.假设[S]>[E],则[S]-[ES]≈[S] C.假设E+S→ES反应处于平衡状态 D.反应处于动态平衡时,即ES的生成速度与分解速度相等 ]用动力学的方法可以区分可逆、不可逆抑制作用,在一反应系统中, 加入过量S和一定量的I,然后改变[E],测v,得v~[E]曲线,则哪一条曲 线代表加入了 定量的可逆抑制剂?
第六章 酶 一、填空题 1.全酶由________________和________________组成,在催化反应时,二者 所 起 的 作 用 不 同 , 其 中 ________________ 决 定 酶 的 专 一 性 和 高 效 率 , ________________起传递电子、原子或化学基团的作用。 2.酶是由________________产生的,具有催化能力的________________。 3.酶的活性中心包括________________和________________两个功能部位, 其中________________直接与底物结合,决定酶的专一性,________________ 是发生化学变化的部位,决定催化反应的性质。 4.常用的化学修饰剂 DFP 可以修饰________________残基,TPCK 常用于修饰 ________________残基。 5.酶促动力学的双倒数作图(Lineweaver-Burk 作图法),得到的直线在横轴 上的截距为________________,纵轴上的截距为________________。 6.磺胺类药物可以抑制________________酶,从而抑制细菌生长繁殖。 7.谷氨酰胺合成酶的活性可以被________________共价修饰调节;糖原合成 酶、糖原磷酸化酶等则可以被________________共价修饰调节。 二、是非题 1.[ ]对于可逆反应而言,酶既可以改变正反应速度,也可以改变逆反应速 度。 2.[ ]酶活性中心一般由在一级结构中相邻的若干氨基酸残基组成。 3.[ ]酶活力的测定实际上就是酶的定量测定。 4.[ ]Km 是酶的特征常数,只与酶的性质有关,与酶浓度无关。 5.[ ]当[S]>> Km 时,v 趋向于 Vmax,此时只有通过增加[E]来增加 v。 6.[ ]酶的最适温度与酶的作用时间有关,作用时间长,则最适温度高,作 用时间短,则最适温度低。 7.[ ]增加不可逆抑制剂的浓度,可以实现酶活性的完全抑制。 8.[ ]正协同效应使酶促反应速度增加。 9.[ ]竞争性可逆抑制剂一定与酶的底物结合在酶的同一部位。 10.[ ]酶反应的最适 pH 只取决于酶蛋白本身的结构。 三、选择题 1.[ ]利用恒态法推导米氏方程时,引入了除哪个外的三个假设? A.在反应的初速度阶段,E+P→ES 可以忽略 B.假设[S]>>[E],则[S]-[ES]≈[S] C.假设 E+S→ES 反应处于平衡状态 D.反应处于动态平衡时,即 ES 的生成速度与分解速度相等 2.[ ]用动力学的方法可以区分可逆、不可逆抑制作用,在一反应系统中, 加入过量 S 和一定量的 I,然后改变[E],测 v,得 v~[E]曲线,则哪一条曲 线代表加入了一定量的可逆抑制剂?
ABC 123 D.不可确定 3.[]在一反应体系中,[S]过量,加入一定量的I,测v~[E]曲线,改 变[I],得一系列平行曲线,则加入的I是: 大 「E A.竞争性可逆抑制剂 B.非竞争性可逆抑制剂 C.反竞争性可逆抑制剂 D.不可逆抑制剂 4.[]竞争性可逆抑制剂抑制程度与下列哪种因素无关? A.作用时间 B.抑制剂浓度 C.底物浓度 D.酶与抑制剂的亲和力的大小 E.酶与底物的亲和力的大小 5.[]酶的竞争性可逆抑制剂可以使: A.Vmax减小,Km减小
A.1 B.2 C.3 D.不可确定 3.[ ]在一反应体系中,[S]过量,加入一定量的 I,测 v~[E]曲线,改 变[I],得一系列平行曲线,则加入的 I 是: A.竞争性可逆抑制剂 B.非竞争性可逆抑制剂 C.反竞争性可逆抑制剂 D.不可逆抑制剂 4.[ ]竞争性可逆抑制剂抑制程度与下列哪种因素无关? A.作用时间 B.抑制剂浓度 C.底物浓度 D.酶与抑制剂的亲和力的大小 E.酶与底物的亲和力的大小 5.[ ]酶的竞争性可逆抑制剂可以使: A.Vmax 减小,Km 减小
B.Vmax增加,Km增加 C.Vmax不变,Km增加 D.Vmax不变,Km减小 E.Vmax减小,Km增加 ]溶菌酶在催化反应时,下列因素中除哪个外,均与酶的高效率有关? A.底物形变 B.广义酸碱共同催化 C.邻近效应与轨道定向 D.共价催化 7.[]丙二酸对琥珀酸脱氢酶的影响属于: A.反馈抑制 B.底物抑制 C.竞争性可逆抑制 D.非竞争性可逆抑制 E.反竞争性可逆抑制 8.[]酶的活化和去活化循环中,酶的磷酸化和去磷酸化位点通常在酶的哪 一种氨基酸残基上? A.天冬氨酸 B.脯氨酸 C.赖氨酸 D.丝氨酸 E.甘氨酸 ]测定酶活性时,通常以底物浓度变化小于多少时测得的速度为反应的 初速度? A.0.1% B.0.5% C.1% D.2% E.5% 10.[]在生理条件下,下列哪种基团既可以作为H+的受体,也可以作为H 的供体? A.His的咪唑基 BLys的ε氨基 C.Arg的胍基 D.Cys的巯基 E.Trp的吲哚基 四、问答与计算 1.什么是酶?为何说酶的本质示蛋白质? 2.酶作为生物催化剂有何特点? 3.何谓酶分子的必需基团?其作用如何?常见的必需基团有那些? 4.何谓寡聚酶?何谓变构酶? 5.影响酶促反应的因素有哪些?用曲线表示它们的影响?为什么会产生这 些影响? 6.米氏方程的基本形式是什么?Km的意义及用途如何?
B.Vmax 增加,Km 增加 C.Vmax 不变,Km 增加 D.Vmax 不变,Km 减小 E.Vmax 减小,Km 增加 6.[ ]溶菌酶在催化反应时,下列因素中除哪个外,均与酶的高效率有关? A.底物形变 B.广义酸碱共同催化 C.邻近效应与轨道定向 D.共价催化 7.[ ]丙二酸对琥珀酸脱氢酶的影响属于: A.反馈抑制 B.底物抑制 C.竞争性可逆抑制 D.非竞争性可逆抑制 E.反竞争性可逆抑制 8.[ ]酶的活化和去活化循环中,酶的磷酸化和去磷酸化位点通常在酶的哪 一种氨基酸残基上? A.天冬氨酸 B.脯氨酸 C.赖氨酸 D.丝氨酸 E.甘氨酸 9.[ ]测定酶活性时,通常以底物浓度变化小于多少时测得的速度为反应的 初速度? A.0.1% B.0.5% C.1% D.2% E.5% 10.[ ]在生理条件下,下列哪种基团既可以作为 H+的受体,也可以作为 H+ 的供体? A.His 的咪唑基 B.Lys 的ε氨基 C.Arg 的胍基 D.Cys 的巯基 E.Trp 的吲哚基 四、问答与计算 1. 什么是酶?为何说酶的本质示蛋白质? 2. 酶作为生物催化剂有何特点? 3. 何谓酶分子的必需基团?其作用如何?常见的必需基团有那些? 4. 何谓寡聚酶?何谓变构酶? 5.影响酶促反应的因素有哪些?用曲线表示它们的影响?为什么会产生这 些影响? 6.米氏方程的基本形式是什么?Km 的意义及用途如何?
7.酶为什么能加速化学反应的进程? 8.酶促反应中有哪些常见的亲核基团和亲电子基团?酶分子中既能作为质 子供体,又能作质子受体的最有效、最活泼的基团是什么? 9.辅基和辅酶的作用是什么?并用代号写出其作用机理 10.何谓竞争性抑制和非竞争性抑制?二者有何异同? 11.有机磷农药为何能杀死害虫? 12.国际酶委会把酶分为哪几类?写出其催化反应通式。 13.试述TDP、FAD、FMN、NAD+、NADP+、CoA的分子组成及生物学功 能 14.写出其催化反应测定酶活力时为什么要测量初速度,且一般以测定产物 的增加量为宜? 15.举例说明酶的专一性。试指出下列每种酶具有哪种类型的专一性 (1)脲酶(只催化尿素NH2CONH2的水解,但不能作用于NH2 CONHCH3) (②)β-D-葡萄糖苷酶(只作用β-D-葡萄糖形成的各种糖苷,但不能作用于其 他的糖苷,例如果糖苷) (3)酯酶(作用于 RICOOR2的水解反应) (4)L-AA氧化酶(只作用于L-A,而不能作用于D-AA) (5)反丁烯二酸水合酶[只作用于反丁烯二酸(延胡索酸),而不能作用于顺丁 烯二酸(马来酸)] (6)甘油激酶(催化甘油磷酸化,生成甘油-1-磷酸) 16.假如反应体系中存在着下列各种情况,求其初速度v相当于理论最大速 度Vnax的百分数:(1)[S]=Km(2)[S]=1/2Km(3)[S]=2Km(4)[S]=1/10 17.称取25ng蛋白酶配成25m溶液,取2ml溶液测得含蛋白氮0.2mg,另取 0.lml溶液测酶活力,结果每小时可以水解酪蛋白产生1500ug酪氨酸,假定 个酶活力单位定义为每分钟产生1ug酪氨酸的酶量,请计算:(1)酶溶液的蛋白 浓度及比活(2)每克酶制剂的总蛋白含量及总活力 18.Vmax和米氏常数可以通过作图法求得,试比较v~[S]图,双倒数图 V~v/[S]作图,[S]/v~[S]作图及直接线性作图法求Vmax和Km的优缺点。 19.有时别构酶的活性可以被低浓度的竞争性抑制剂激活,请解释 20.在很多酶的活性中心均有His残基参与,请解释。 21.解释下列名词:单成份酶和双成份酶、全酶和辅因子、辅基和辅酶、酶促 反应、底物、酶的活性中心、酶的活性基团、酶的抑制剂和激活剂、酶原、单体 酶、寡聚酶、多酶复合体、同工酶、诱导酶、构酶、固相酶、酶活力、酶活力 单位、比活力、米氏常数、温度系数、核酶、维生素、酶的专一性、酶促反应初 速度、中间产物学说、酶的最适温度和最适P、酶的热稳定范围,酶的酸碱稳 定范围、竞争性抑制剂。 22过氧化氢酶的Km为2.5×10mol/L,当底物HO2浓度为100mmm01/L时, 求反应速度达到最大速度的百分数。 23.试对比不同类型可逆抑制剂的特点 24.为什么测酶活力时,酶液要适当稀释?“适当”的标准时什么? 25.称取500ng蛋白酶粉配制成500ml的酶液,从中取出0.lml酶液,以酪 蛋白为底物,用福林一酚法测定酶活力,得每小时产生1500g酪氨酸。试计算 lml酶溶液得活力及酶制剂得活力
7. 酶为什么能加速化学反应的进程? 8. 酶促反应中有哪些常见的亲核基团和亲电子基团?酶分子中既能作为质 子供体,又能作质子受体的最有效、最活泼的基团是什么? 9. 辅基和辅酶的作用是什么?并用代号写出其作用机理。 10. 何谓竞争性抑制和非竞争性抑制?二者有何异同? 11. 有机磷农药为何能杀死害虫? 12. 国际酶委会把酶分为哪几类?写出其催化反应通式。 13.试述 TDP、FAD、FMN、NAD+ 、NADP+ 、 CoA 的分子组成及生物学功 能。 14.写出其催化反应测定酶活力时为什么要测量初速度,且一般以测定产物 的增加量为宜? 15.举例说明酶的专一性。试指出下列每种酶具有哪种类型的专一性。 (1)脲酶(只催化尿素 NH2CONH2 的水解,但不能作用于 NH2CONHCH3) (2)β-D-葡萄糖苷酶(只作用β-D-葡萄糖形成的各种糖苷,但不能作用于其 他的糖苷,例如果糖苷) (3)酯酶(作用于 R1COOR2 的水解反应) (4)L-AA 氧化酶(只作用于 L-AA,而不能作用于 D-AA) (5)反丁烯二酸水合酶[只作用于反丁烯二酸(延胡索酸),而不能作用于顺丁 烯二酸 (马来酸)] (6)甘油激酶(催化甘油磷酸化,生成甘油-1-磷酸) 16.假如反应体系中存在着下列各种情况,求其初速度 v 相当于理论最大速 度 Vmax 的百分数:(1)[S]=Km (2) [S]=1/2 Km (3) [S]=2Km (4) [S]=1/10 Km (5) [S]=10Km 17.称取 25mg 蛋白酶配成 25ml 溶液,取 2ml 溶液测得含蛋白氮 0.2mg,另取 0.1ml 溶液测酶活力,结果每小时可以水解酪蛋白产生 1500ug 酪氨酸,假定 1 个酶活力单位定义为每分钟产生 1ug 酪氨酸的酶量,请计算:(1)酶溶液的蛋白 浓度及比活(2)每克酶制剂的总蛋白含量及总活力。 18.Vmax 和米氏常数可以通过作图法求得,试比较 v~[S]图,双倒数图, v~v/[S]作图,[S]/v~[S]作图及直接线性作图法求 Vmax 和 Km 的优缺点。 19.有时别构酶的活性可以被低浓度的竞争性抑制剂激活,请解释。 20.在很多酶的活性中心均有 His 残基参与,请解释。 21.解释下列名词:单成份酶和双成份酶、全酶和辅因子、辅基和辅酶、酶促 反应、底物、酶的活性中心、酶的活性基团、酶的抑制剂和激活剂、酶原、单体 酶、寡聚酶、多酶复合体、.同工酶、诱导酶、构酶、固相酶、酶活力、酶活力 单位、比活力、米氏常数、温度系数、核酶、维生素、酶的专一性、酶促反应初 速度、中间产物学说、酶的最适温度和最适 PH、酶的热稳定范围,酶的酸碱稳 定范围、竞争性抑制剂。 22.过氧化氢酶的 Km 为 2.5×10-2 mol/L,当底物 H2O2浓度为 100mmmol/L 时, 求反应速度达到最大速度的百分数。 23.试对比不同类型可逆抑制剂的特点。 24.为什么测酶活力时,酶液要适当稀释?“适当”的标准时什么? 25.称取 500mg 蛋白酶粉配制成 500ml 的酶液,从中取出 0.1ml 酶液,以酪 蛋白为底物,用福林-酚法测定酶活力,得每小时产生 1500µg 酪氨酸。试计算 1ml 酶溶液得活力及酶制剂得活力
26.有0.5ga一淀粉酶制剂,配制成500m1溶液,从中取出1m1,在规定条 件下进行酶促反应,测得l0min分解5g淀粉成糊精,试计算酶制剂得酶活力。 27.酶制剂应该在什么条件下保存?为什么? 28.酶的分离纯化一般经过哪些步骤?应注意哪些问题? 29.什么叫固定化酶、固定化细胞?固定化酶、固定化细胞的方法有哪几种类型? 其优缺点是什么?
26.有 0.5gα-淀粉酶制剂,配制成 500ml 溶液,从中取出 1ml,在规定条 件下进行酶促反应,测得 10min 分解 5g 淀粉成糊精,试计算酶制剂得酶活力。 27.酶制剂应该在什么条件下保存?为什么? 28.酶的分离纯化一般经过哪些步骤?应注意哪些问题? 29.什么叫固定化酶、固定化细胞?固定化酶、固定化细胞的方法有哪几种类型? 其优缺点是什么?