华中农业大学生物化学精品课程组 Yangzq@mail.hzau.edu.cn 第七章蛋白质的酶促 降解和AA代谢 第一节蛋白质的酶促降解 第二节AA的分解与转化 第三节氨基酸的生物合成
第七章 蛋白质的酶促 降解和AA代谢 第一节 蛋白质的酶促降解 第二节 AA的分解与转化 第三节 氨基酸的生物合成
第七章蛋白质的酶促 降解和AA代射 第一节蛋白质的酶促降解 食物中摄取的Pr 组成机体细胞的Pr Pr水解E AA 细胞内合成的Pr 肽酶 蛋白酶
第七章 蛋白质的酶促 降解和AA代谢 第一节 蛋白质的酶促降解 食物中摄取的Pr 组成机体细胞的Pr Pr 水解E AA 细胞内合成的Pr 肽酶 蛋白酶
一、肽酶 肽酶：肽链外切酶，可分别从多肽链的 游离羧基端或游离氨基端逐个水解AA的E。 氨肽酶：从多肽链氨基端逐个水解AA的E。 羧肽酶 (羧肽酶A:水解中性AA为羧基 末端的肽键 羧肽酶B: 水解碱性AA为羧基 末端的肽键
一、肽酶 肽酶：肽链外切酶，可分别从多肽链的 游离羧基端或游离氨基端逐个水解AA的E。 氨肽酶：从多肽链氨基端逐个水解AA的E。 羧肽酶 羧肽酶 A：水解中性AA为羧基 末端的肽键 羧肽酶 B：水解碱性AA为羧基 末端的肽键
二、蛋白酶 蛋白酶：又称肽链内切酶，它能水 解肽链内部的肽键，使蛋白质多肽链水 解为许多小肽段 胃蛋白酶：水解由芳香族AA的-NH, 形成的肽键 胰凝乳蛋白酶：水解由芳香族AA 的-COOH形成的肽键
二、蛋白酶 蛋白酶：又称肽链内切酶，它能水 解肽链内部的肽键，使蛋白质多肽链水 解为许多小肽段 胃蛋白酶：水解由芳香族AA的-NH2 形成的肽键 胰凝乳蛋白酶：水解由芳香族AA 的-COOH形成的肽键
胰蛋白酶；水解由Lys、Arg等 碱性AA的COOH形成的肽键 嗜热菌蛋白酶：水解由非极性AA 的-NH,形成的肽键 溴化氰：水解由Met的COOH形成的 肽键
嗜热菌蛋白酶：水解由非极性AA 的-NH 2形成的肽键 溴化氰：水解由Met的COOH形成的 肽键 胰蛋白酶；水解由Lys、Arg等 碱性AA的COOH形成的肽键
嗜热菌蛋白酶 0 0 9 H2N-CH-C-N- CH-C-N-CH-C-N- CH- R1 -I R TH 氨肽酶 胰凝 非 胃蛋白酶 芳香族 乳蛋 白酶 极性从
O O O H 2N－CH－C－N－CH－C－N－CH－C－N－CH－ R1 H R2 H R3 H R 4 氨 胃 芳 胰凝 非 肽 蛋 香 乳蛋 极 酶 白 族 白酶 性 酶 AA AA 嗜热菌蛋白酶
0 0 0 0 -N-CH-C N-CH-CN-CH-C N-CH-COOH H R5 H R7 H R。 碱 Met 产 胰蛋白酶 化氰 羧肽酶
O O O O －C－N－CH－C－N－CH－C－N－CH－C－N－CH－COOH H R5 H R6 H R7 H R n 碱 Met 性 AA Lys Arg 胰 蛋 白 酶 溴 化 氰 羧 肽 酶
三、蛋白质一级结构的测定 1、样品预处理：样品须纯化，测分 子量，加入含巯基乙醇的高浓度尿素溶液， 使Pr分子中的二硫键和非共价键断开。 2、测定AA组成：样品用6moI/LHCI 在110C水解24h,再用AA自动分析仪进行 测定。 3、肽链末端AA的测定：用Sanger反 应或Edman)反应测定N-末端AA;用羧肽酶 测定C末端AA
三、蛋白质一级结构的测定 1、样品预处理：样品须纯化，测分 子量，加入含巯基乙醇的高浓度尿素溶液， 使Pr分子中的二硫键和非共价键断开。 2、测定AA组成：样品用6mol/LHCl 在110 oC水解24h，再用AA自动分析仪进行 测定。 3、肽链末端AA的测定：用Sanger反 应或Edman反应测定N-末端AA；用羧肽酶 测定C-末端AA
4、用蛋白酶水解成小肽链段，并分离纯化。 5、测定每个肽段的AA顺序：用Edman降解 法或序列仪进行测定。 6、确定整个肽段的AA序列。 A:Gly-Lys-Asn-Tyr Ala-Phe His-Val Arg-Tyr B:Ala-Phe-Gly-Lys Tyr-His-Val Asn-Tyr-Arg 确定排列：Ala-Phe-Gly-Lys-Asn-Tyr-Arg Tyr-His-Val 回首页
A: Gly-Lys-Asn-Tyr Ala-Phe His-Val Arg-Tyr B: Ala-Phe-Gly-Lys Tyr-His-Val Asn-Tyr-Arg 确定排列:Ala-Phe-Gly-Lys-Asn-Tyr-ArgTyr-His-Val 4、用蛋白酶水解成小肽链段,并分离纯化。 5、测定每个肽段的AA顺序：用Edman降解 法或序列仪进行测定。 6、确定整个肽段的AA序列。 回首页
第二节AA的分解与转化 AA的共同代谢途径： R-C-COOH NH3 R-CH-COOH 0 NH2 基作用 R-CH2-NH2 CO2
第二节 AA的分解与转化 AA的共同代谢途径： R－C－COOH + NH3 R－CH－COOH O NH2 R－CH2－NH2 + CO2 脱羧基作用 脱氨基作用