华中农业大学生物化学精品课程组 Yangzq@mail.hzau.edu.cn 第八章 核酸的酶促降解 和核苷酸代谢 第一节核酸的酶促降解 第二节核苷酸的降解 第三节核苷酸的合成代谢
第八章 核酸的酶促降解 和核苷酸代谢 第一节 核酸的酶促降解 第二节 核苷酸的降解 第三节 核苷酸的合成代谢
第八章 核酸的酶促降解 和核苷酸代谢 第一节核酸的酶促降解 一、降解方式 核酸 核酸E、 核苷酸 +H20 3’,5’-磷酸二酯键水解
第八章 核酸的酶促降解 和核苷酸代谢 第一节 核酸的酶促降解 一、降解方式 核酸 核酸E 核苷酸 +H 2 O 3 ’，5 ’-磷酸二酯键水解
二、核酸E (一)按底物分： DNA酶，RNA酶，有的酶可作用于DNA 和RNA (二)按作用方式分： 1、核酸外切E:从核酸链的一端 逐个水解下核苷酸的酶（非特异性的） 3’-核酸外切E:如蛇毒磷酸二酯E 从3’一0H端开始，生成5’-核苷酸
二、核酸E （一）按底物分： DNA酶，RNA酶，有的酶可作用于DNA 和RNA （二）按作用方式分： 1、核酸外切E：从核酸链的一端 逐个水解下核苷酸的酶（非特异性的） 3’-核酸外切E：如蛇毒磷酸二酯E 从3’－OH端开始，生成5 ’-核苷酸
5’-核酸外切E:如牛脾磷酸二酯E 从5’一0H端开始，生成3-核苷酸 2、核酸内切E:特异水解DNA或RNA 分子内的磷酸二酯键的酶（特异性强）。 如：牛胰核糖核酸酶：切嘧啶核苷3？ 一磷酸与相邻核苷酸的3’，5’一磷酸二 酯键
2、核酸内切E：特异水解DNA或RNA 分子内的磷酸二酯键的酶(特异性强)。 如：牛胰核糖核酸酶：切嘧啶核苷3 ’ －磷酸与相邻核苷酸的3 ’，5 ’－磷酸二 酯键。 5 ’-核酸外切E：如牛脾磷酸二酯E 从5 ’－OH端开始，生成3 ’-核苷酸
B B Py B BB OH 牛脾磷酸二酯E 蛇毒磷酸二酯E 牛胰核酸E(RNase I)RNase T1
B B G B Py B B B HO P P P P P P P OH 牛脾磷酸二酯E 蛇毒磷酸二酯E 牛胰核酸E(RNase I) RNase T 1
限制性内切酶 定义：细菌内存在的一类能识别水解 外源双链DNA的核酸内切酶。 这些酶主要是从细菌中分离得到，能识 别特定的核苷酸顺序，但在细菌本身的 DNA中，这些顺序已被甲基化，因而不被 水解，也就是说这些酶仅限于水解外源 DNA以保护自身，故称限制性酶
限制性内切酶 定义：细菌内存在的一类能识别水解 外源双链DNA的核酸内切酶。 这些酶主要是从细菌中分离得到，能识 别特定的核苷酸顺序，但在细菌本身的 DNA中，这些顺序已被甲基化，因而不被 水解，也就是说这些酶仅限于水解外源 DNA以保护自身，故称限制性酶
限制酶都以内切方式水解DNA 产物：5为P,3为0H 特点：有极高的专一性（对特定核 苷酸顺序专一性，而非对一种或几种 碱基专一)，对底物DNA有特异的识别 位点，这些位点一般在4-8bp,通常具 回文结构，切割后形成粘性末端（或 平齐末端)
产物：5’为P，3’为OH 特点：有极高的专一性(对特定核 苷酸顺序专一性，而非对一种或几种 碱基专一），对底物DNA有特异的识别 位点，这些位点一般在4-8bp，通常具 回文结构，切割后形成粘性末端（或 平齐末端） 限制酶都以内切方式水解DNA
回文结构：DNA局部双螺旋以某一 对称轴旋转180°后，与另一侧的互补片 段的顺序完全相同的DNA结构 粘性末端：双链DNA分子经限制性E 作用后，每条单链的一端带有识别顺序 中几个互补碱基，这样的末端称~。 5’.PGAATTCp.3'EcoRI 5.pG AATTCp.3' 3'.pCTTAAGp.5' 3'.pCTTAA Gp.5
回文结构：DNA局部双螺旋以某一 对称轴旋转180 。后，与另一侧的互补片 段的顺序完全相同的DNA结构 粘性末端：双链DNA分子经限制性E 作用后，每条单链的一端带有识别顺序 中几个互补碱基，这样的末端称～。 5’. pGAATTCp . 3’EcoRI 5’.pG AATTCp . 3’ 3’. pCTTAAGp . 5’ 3’.pCTTAA Gp . 5’
大肠杆菌限制性内切E EcoRI 菌属菌种 菌株 酶编号 3、核酸内切兼外切E:例：核酸酶 P1,先内切再外切
3、核酸内切兼外切E：例：核酸酶 P1，先内切再外切 大肠杆菌限制性内切E EcoRI 菌属 菌种 菌株 酶编号
第二节核苷酸的降解 一、核苷酸的降解 核苷酸酶 核苷酸 核苷 H20 Pi 核苷磷酸化E 核苷水解E 碱基+戊糖-1-P 碱基+戊糖 (所有生物体) (植物、微生物， 且只对核糖核苷作用)》
第二节 核苷酸的降解 一、核苷酸的降解 核苷酸酶 核苷酸 核苷 H 2O Pi 核苷磷酸化E 核苷水解E 碱基 + 戊糖-1-P 碱基 + 戊糖 （所有生物体） （植物、微生物， 且只对核糖核苷作用）