组织化学实验一PAS反应实验十五、小鼠肝糖原染色实验十六、小鼠肝/肠核酸染色一一Feulgen反应
组织化学实验 实验十五、小鼠肝糖原染色——PAS反应 实验十六、小鼠肝/肠核酸染色——Feulgen反应
实验目的1.了解PAS染色法（PeriodicAcid-Schiffstain）的基本原理，掌握PAS染色法的技术方法及其应用。2.了解孚尔根染色法的基本原理，掌握孚尔根染色法的技术方法及其应用
实验目的 1.了解PAS染色法（Periodic Acid-Schiff stain） 的基本原理，掌握PAS染色法的技术方法及 其应用。 2.了解孚尔根染色法的基本原理，掌握孚尔根 染色法的技术方法及其应用
-PAS反应小鼠肝糖原染色心糖原是由多个葡萄糖组成的带分枝的大分子多糖，形状为大小不等的颗粒，遇碘则变褐色，易溶于水，心动物细胞内贮存的多糖，完全由葡萄糖组成。在动物体内以肝脏和骨骼肌中储量最丰富，与淀粉在植物中的作用相当*肝糖原分解主要维持血糖浓度，肌糖原分解为肌肉自身收缩供给能量
小鼠肝糖原染色——PAS反应 糖原是由多个葡萄糖组成的带分枝的大分子多 糖，形状为大小不等的颗粒，遇碘则变褐色，易 溶于水。 动物细胞内贮存的多糖，完全由葡萄糖组成。 在动物体内以肝脏和骨骼肌中储量最丰富，与淀 粉在植物中的作用相当。 肝糖原分解主要维持血糖浓度，肌糖原分解为肌 肉自身收缩供给能量
PAS(Periodic AcidSchiff)反应的基本原理利用强氧化剂使多糖产生游离的醛基，醛CH,OHCH,OHOH-0H基和Schiff试剂结合，H.1O6OH0OH形成紫红色的化合物。CHOHOHHOH0因此在有多糖的部位，就会呈现除紫红色阳性反应
利用强氧化剂使多糖 产生游离的醛基，醛 基和Schiff试剂结合， 形成紫红色的化合物。 因此在有多糖的部位， 就会呈现除紫红色阳 性反应。 PAS （Periodic Acid Schiff ） 反应的基本原理
CH,OHCH,OHHIO4H（过碘酸）OOHHOTCHIIHOH0OCH,OH+F(SO2H)2（亚硫酸品红）HC无色TYF（紫红色产物）
Schiff氏试剂的制备将0.5g碱性品红置入三角烧瓶内沸腾的蒸馏水中，时时摇动玻璃瓶，煮沸5min使之充分溶解，冷却至50℃时过滤加入10ml1MHC1，冷至25℃时，加入0.5g偏重亚硫酸钠(Na,S,O3）或无水亚硫酸（NaHSO3），在室温冷暗处至少放置24h（有时需2~3天），使其颜色退至淡黄色，密封瓶口，藏于暗处，最好保存于4℃冰箱中（可保存数月或更长时间）。摇1min，用粗滤纸过滤，滤液在使用前加入0.5g活性碳，应为无色；若液体颜色变为粉红色，便不能再用
将0.5g碱性品红置入三角烧瓶内沸腾的蒸馏水中，时时摇 动玻璃瓶，煮沸5min使之充分溶解，冷却至50℃时过滤， 加入10ml 1M HCl，冷至25℃时，加入0.5g偏重亚硫酸钠 (Na2S2O3)或无水亚硫酸(NaHSO3)，在室温冷暗处至少放置 24h(有时需2~3天)，使其颜色退至淡黄色，密封瓶口，藏 于暗处，最好保存于4℃冰箱中(可保存数月或更长时间)。 在使用前加入0.5g活性碳, 摇1min, 用粗滤纸过滤，滤液 应为无色；若液体颜色变为粉红色，便不能再用。 Schiff氏试剂的制备
PAS反应的应用可用于证明与鉴别细胞内空泡状的性质，心肌病变及其他心血管疾病的诊断，糖原累积病诊断和研究，糖尿病的诊断和研究，用于某些肿瘤的诊断等。在临床诊断、分类和治疗具有重要的意义
PAS反应的应用 可用于证明与鉴别细胞内空泡状的性质 ， 心肌病变及其他心血管疾病的诊断 ，糖原累 积病诊断和研究 ，糖尿病的诊断和研究 ，用 于某些肿瘤的诊断等。在临床诊断、分类和 治疗具有重要的意义
实验材料，鸭血涂片1）组织切片(70%酒精中)，2)过碘酸液3）Schiff氏液4)0.5%偏重亚硫酸盐溶液5苏木精染色液
1) 组织切片(70%酒精中)，鸭血涂片 2) 过碘酸液 3) Schiff氏液 4) 0.5%偏重亚硫酸盐溶液 5) 苏木精染色液 实验材料
（PAS反应）实验步骤1.将石蜡切片（已保存于70%酒精中）移入50%酒精复水5min2.石蜡切片及鸭血涂片用蒸馏浸洗1次，1min;3.过碘酸液处10min（对照实验用蒸馏水浸泡）：4.蒸馏水洗1次，2min；5.Schiff试剂中放置20min；6.亚硫酸盐溶液浸洗，3次，每次2min；7.流水冲洗5min（避免流水直接冲洗有组织的部位），蒸馏水过一下8.用苏木精复染细胞核10min；9.流水冲洗5min：（避免流水直接冲洗有组织的部位），蒸水浸泡1min吸干;10.甘油封片；11.显微镜观察
1. 将石蜡切片（已保存于70%酒精中）移入50%酒精复水5 min 2.石蜡切片及鸭血涂片用蒸馏浸洗1次，1 min; 3. 过碘酸液处10 min （对照实验用蒸馏水浸泡）; 4. 蒸馏水洗1次，2 min; 5. Schiff 试剂中放置 20 min; 6. 亚硫酸盐溶液浸洗，3次， 每次2 min; 7. 流水冲洗5 min（避免流水直接冲洗有组织的部位）, 蒸馏水过一下; 8. 用苏木精复染细胞核10 min ; 9. 流水冲洗5 min （避免流水直接冲洗有组织的部位），蒸馏水浸泡1 min， 吸干; 10. 甘油封片; 11. 显微镜观察。 实验步骤（ PAS反应）
结果分析PAS阳性呈不同程度的紫红色，细胞核蓝色
结果分析 PAS阳性呈不同程度的紫红色，细胞核蓝色