之模块二土微生物的分离与抗菌活性菌株的筛选微生物学与免疫学实验第三讲-土壤悬液的制备与接种、培养从土壤中分离到微生物需要哪些技术和方法呢？
第三讲-土壤悬液的制备与接种、培养 模块二 土壤微生物的分离与抗菌活性菌株的筛选 之
本次课的主要内容1.无菌水的制备及玻璃器械的灭菌2.土壤悬液的制备(溶化)3.培养基的准备4.土壤悬液的接种（倾注法）5.培养本次实验目的学习并掌握微生物接种、培养的方法。掌握灭菌方法和无菌操作等技术
1.无菌水的制备及玻璃器械的灭菌 2. 土壤悬液的制备 3. 培养基的准备（溶化） 4. 土壤悬液的接种（倾注法） 5. 培养 学习并掌握微生物接种、培养的方法。 掌握灭菌方法和无菌操作等技术
无菌操作本次课的主要内容及安排安排流程无菌水简单讲解注意事项操作-无菌水的准备土壤稀释液灭菌过程取1ml稀释液到无菌的培养皿讲解接种实验原理及操作（接种）方法，学生操作分享等倾注培养基于培养皿中，混匀溶化3瓶培养基操作：土壤悬液的制备与静置到培养基凝固接种倒置培养（37或28℃）倒置恒温培养课后(观察、计数)
本次课的主要内容及安排 流程 无菌操作 安排 简单讲解注意事项 操作-无菌水的准备 灭菌过程 讲解接种实验原理及操作 方法，学生操作分享等 溶化3瓶培养基 操作：土壤悬液的制备与 接种 倒置培养（37或28 ℃） 课后（观察、计数） 土壤稀释液 取1 ml稀释液到无菌的培养皿， （ 接种） 倾注培养基于培养皿中，混匀 静置到培养基凝固 倒置恒温培养 无菌水
1.无菌水的制备及培养川的火菌讲解实验所需要的主要器械培养Ⅲ10+4只（烘箱干热灭菌）三角瓶（1）、试管（4）、移液器、移液管等。方法量筒量取99 mL水置于250mL三角瓶(内放10几粒玻璃珠）；用移液管分别量取9mL水，分装于试管4支）包扎好，标记，待灭菌1-2mL移液管包扎待灭菌湿热灭菌：121.3℃，灭菌20min
方法 量筒量取99 mL水置于250 mL三角瓶 ( 内放10几粒玻璃珠）； 用移液管分别量取9 mL水，分装于试管 （ 4 支）包扎好, 标记，待灭菌. 1-2 mL 移液管包扎待灭菌 湿热灭菌：121.3℃，灭菌20 min 1.无菌水的制备及培养皿的灭菌 实验所需要的主要器械 培养皿10+4只（烘箱干热灭菌） 三角瓶（1）、试管（4）、移液器、移液管等。 讲解
制备无菌水操作（视频）操作演示99mL/三角瓶（内放10几粒玻璃珠9mL/支试管，4支。包扎好，标记，待灭菌1/2mL移液管包扎待灭菌湿热灭菌：121.3℃，灭菌20min为什么要从土壤中分离微生物呢？
操作演示（视频） 99 mL /三角瓶 (内放10几粒玻璃珠） 9 mL /支试管，4 支。 包扎好, 标记，待灭菌. 1-2 mL 移液管包扎待灭菌 湿热灭菌：121.3℃，灭菌20 min 操作
无菌操作本次课的主要内容及安排讲解内容安排流程无菌水简单讲解注意事项操作-无菌水的准备土壤稀释液灭菌过程取1ml稀释液到无菌的培养皿讲解实验原理及操作方法（接种）学生操作分享等倾注培养基于培养皿中，混匀溶化3瓶培养基操作：土壤悬液的制备与静置到培养基凝固接种倒置培养（37或28℃）倒置恒温培养课后(观察、计数)
本次课的主要内容及安排 流程 无菌操作 内容安排 简单讲解注意事项 操作-无菌水的准备 灭菌过程 讲解实验原理及操作方法， 学生操作分享等 溶化3瓶培养基 操作：土壤悬液的制备与 接种 倒置培养（37或28 ℃） 课后（观察、计数） 土壤稀释液 取1 ml稀释液到无菌的培养皿， （ 接种） 倾注培养基于培养皿中，混匀 静置到培养基凝固 倒置恒温培养 无菌水 讲解
土中微生物的分离讲解地球上有多少微生物分布在土壤中呢？实验目的通过从士壤中分离微生物，初步掌握微生物接种、培养、分离的方法以及无菌操作技术。如何接种士壤样品？又怎样实现无菌操作呢？多且混杂的系统里如何分离出目标菌呢？
如何接种土壤样品？ 又怎样实现无菌操作呢？ 多且混杂的系统里如何分离出目标菌呢？ 实验目的 通过从土壤中分离微生物，初步掌握微生物 接种、培养、分离的方法以及无菌操作技术。 讲解 地球上有多少微生物分布在土壤中呢？
土壤微生物的类群讲解放线菌（链霉菌等），以及其它的细菌和丝状真菌（根霉菌、毛霉菌．青霉菌和曲霉）都是土壤微生物中的重要的成员。病毒等也很重要，但是我们不在这里研究。每克士壤样品中包括众多的微生物。土壤的酸碱度，类型，温度等不同，其中的微生物会有差别。例如，酸性土壤中比碱性土壤中会有更多的真菌，而营养丰富的花园土壤中，含有更多的放线菌所以，仅就我们采集的土壤样品，对细菌、放线菌和真菌进行分离。通过牛肉膏蛋白陈和高氏一号和马丁氏培养基
所以，仅就我们采集的土壤样品，对细菌、放线菌和 真菌进行分离。通过牛肉膏蛋白胨和高氏一号和马丁 氏培养基。 讲解 土壤微生物的类群 放线菌（链霉菌等），以及其它的细菌和丝状真菌 （根霉菌、毛霉菌，青霉菌和曲霉）都是土壤微生 物中的重要的成员。病毒等也很重要，但是我们不 在这里研究。 每克土壤样品中包括众多的微生物。 土壤的酸碱度，类型，温度等不同，其中的微生物会 有差别。例如，酸性土壤中比碱性土壤中会有更多的 真菌，而营养丰富的花园土壤中，含有更多的放线菌
实验方案的设计思路讲解种子：土壤样品（可否直接接种？）如何接种？定量 (土壤悬液接种)工具：培养皿、移液器如何制备士壤悬液？士地：培养基如何培养？采用何种培养基？要求：无菌操作怎样达到无菌操作？
种子：土壤样品 （可否直接接种？） 如何接种？ 定量（土壤悬液接种） 工具：培养皿、移液器 如何制备土壤悬液？ 土地：培养基 采用何种培养基？ 如何培养？ 要求：无菌操作 怎样达到无菌操作？ 实验方案的设计思路 讲解
2.土壤悬液的制备制备土壤稀释液操作1ml1ml1ml1g99ml9ml9ml9ml9ml土壤样品XYC10-510-210-310-4无菌水注意事项10充分混匀10-5对照10-42)更换枪头对照10-410-53)标记无菌操作
2. 土壤悬液的制备 制备土壤稀释液 1m 1ml 1ml l 1g 10-2 10-3 10-4 10-5 土壤样品 99ml 9ml 9ml 9ml 9ml 无菌水 10-4 10-5 对照 10-4 10-5 对照 10-4 10-5 对照 无菌操作 操作 注意事项： 1）充分混匀 2）更换枪头 3）标记