高敦液相色谱
高致色普点 ◆高压 高效 高速 高灵敏度
高效液相色谱特点 高压 –高效 •高速 –高灵敏度
第一节高效液相色谱仪 第二节液相色谱分析 第三节色谱类型选擀 第四节流动相的选排 第五节液相色谱方法的建豆 第六节方法例
第一节 高效液相色谱仪 第二节 液相色谱分析 第三节 色谱类型选择 第四节 流动相的选择 第五节 液相色谱方法的建立 第六节 方法举例
第一节高敌液相色谱仪 1、高压输液系统:贮液罐、过滤器、高压输液泵 要求高压输液泵: ◆压力输出够 流量恒定 流量可调 压力平稳 2、进样系统 3、色谱柱 4、检测系统
第一节 高效液相色谱仪 1、高压输液系统：贮液罐、过滤器、高压输液泵 要求高压输液泵： 压力输出够 – 流量恒定 • 流量可调 – 压力平稳 2、进样系统 3、色谱柱 4、检测系统
检测器 (1)紫外可见吸收检测器 (2)示差折光检测器 (3)荧光检测器 (4)二级管陈列检测器 (5)电导检测器
检测器 （1）紫外-可见吸收检测器 （2）示差折光检测器 （3）荧光检测器 （4）二级管 陈列检测器 （5）电导检测器
第二节液相色谱分祈 (一)吸附色谱(液-固色谱) 流动相:液体固定相:吸附剂 应用:分离分子量中等的脂溶性组分,对 由不同官能团的化合物和异构体
第二节 液相色谱分析 （一）吸附色谱（液-固色谱） 流动相：液体 固定相：吸附剂 应用：分离分子量中等的脂溶性组分，对 由不同官能团的化合物和异构体
(二)液液色谱 流动相:液体固定相:液体 1、正相液-液色谱 流动相的极性小于固定相的极性,即固 定相采用亲水性固定液 流动相:极性小于固定液的溶液。 应用:甾醇类、类脂化合物、磷脂化合物、 脂肪酸
（二）液液色谱 流动相：液体 固定相：液体 1、正相液-液色谱 流动相的极性小于固定相的极性，即固 定相采用亲水性固定液 流动相：极性小于固定液的溶液。 应用：甾醇类、类脂化合物、磷脂化合物、 脂肪酸
2、反相浪液色谱 以强疏水性的填料为固定液,以可以与水向混合的有机 溶剂为流动相的色谱。 特点:流动相的极性大于固定相。 (1)色谱柱的类型: 以硅胶为基质:硅胶上键合C18、C8 氧化物 :一氧化钛、二氧化锆 聚合物:苯乙烯-二乙烯基苯的聚合物 (2)流动相:水、甲醇、乙晴的溶液 (3)应用:应用广泛
2、反相液液色谱 以强疏水性的填料为固定液，以可以与水向混合的有机 溶剂为流动相的色谱。 特点：流动相的极性大于固定相。 （1）色谱柱的类型： 以硅胶为基质：硅胶上键合C18、C8 氧化物 ：一氧化钛、二氧化锆 聚合物 ：苯乙烯-二乙烯基苯的聚合物 （2）流动相：水、甲醇、乙晴的溶液 （3）应用：应用广泛
3、高子金换色谱 利用固定相和流动相对待测组分离子交换能力的 差异进行分离的色谱。 固定相:阴、阳离子交换剂 流动相:含盐的水溶液,有时加入适量的有机溶 剂 应用:分离可离子或者可离解的化合物
3、离子交换色谱 利用固定相和流动相对待测组分离子交换能力的 差异进行分离的色谱。 固定相：阴、阳离子交换剂 流动相：含盐的水溶液，有时加入适量的有机溶 剂 应用：分离可离子或者可离解的化合物
4、体积排阻色谱 原理:分子的体积排阻作用。 固定液:具有不同孔径的多孔凝胶。 典型色谱柱:TsK-G-W、TsK-G- SW Superose、 Zorbax Bio series GF 应用:多肽、蛋白质、多糖、聚合物、病 毒、 DNA、RNA
4、体积排阻色谱 原 理：分子的体积排阻作用。 固定液：具有不同孔径的多孔凝胶。 典型色谱柱：TSK-G-W、TSK-G-SW Superose、 Zorbax Bio Series GF 应用：多肽、蛋白质、多糖、聚合物、病 毒、 DNA、RNA