第五章 微生物的生产 及其影响因素 第一节 微生物生长 第二节 微生物的生长规律 第三章 环境对微生物生长的影响
第五章 微生物的生产 及其影响因素 第一节 微生物生长 第二节 微生物的生长规律 第三章 环境对微生物生长的影响
第一节 微生物生长 ◆微生物生长的概念 ◆微生物生长量的测定
第一节 微生物生长 ◆微生物生长的概念 ◆微生物生长量的测定
一、微生物生长的概念 • 生长是指微生物细胞吸收营养物质，进行新陈代谢，当 同化作用大于异化作用时，生命个体的重量和体积不断 增大的过程。 • 繁殖是指生命个体生长到一定阶段，通过特定方式产生 新的生命个体，即引起生命个体数量增加的生物学过程。 • 个体生长是指微生物细胞个体吸收营养物质，进行新陈 代谢，原生质与细胞组分的增加为个体生长。 • 群体生长是指群体中个体数目的增加。可以用重量、体 积、密度或浓度来衡量。 • 个体生长→个体繁殖→ 群体生长 • 群体生长 = 个体生长 + 个体繁殖
一、微生物生长的概念 • 生长是指微生物细胞吸收营养物质，进行新陈代谢，当 同化作用大于异化作用时，生命个体的重量和体积不断 增大的过程。 • 繁殖是指生命个体生长到一定阶段，通过特定方式产生 新的生命个体，即引起生命个体数量增加的生物学过程。 • 个体生长是指微生物细胞个体吸收营养物质，进行新陈 代谢，原生质与细胞组分的增加为个体生长。 • 群体生长是指群体中个体数目的增加。可以用重量、体 积、密度或浓度来衡量。 • 个体生长→个体繁殖→ 群体生长 • 群体生长 = 个体生长 + 个体繁殖
二、微生物生长量的测定 （一）稀释平板菌落计数法 是一种最常用的活菌计数法。 是一种最常用的 活菌计数法。取一定体积的稀释菌液与合适的 固体培养基在其凝固前均匀混合，或涂布于已 凝固的固体培养基平板上。在最适条件下培养 后，从平板上（内）出现的菌落数乘上菌液的 稀释度，即可计算出原菌液的含菌数。在一个 9cm直径的培养皿平板上，一般以出现50～500 个菌落数为宜数
二、微生物生长量的测定 （一）稀释平板菌落计数法 是一种最常用的活菌计数法。 是一种最常用的 活菌计数法。取一定体积的稀释菌液与合适的 固体培养基在其凝固前均匀混合，或涂布于已 凝固的固体培养基平板上。在最适条件下培养 后，从平板上（内）出现的菌落数乘上菌液的 稀释度，即可计算出原菌液的含菌数。在一个 9cm直径的培养皿平板上，一般以出现50～500 个菌落数为宜数
1ml 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml 3 -8 1 10g检样 90ml 每管各9ml无菌水 无菌水 每皿倒 15ml 琼脂培养基 稀释平板计数用来测微生物的活菌数
• ★技术要求：样品充分混匀，操作熟练快速 （15~20min完成操作），严格无菌操作； • ★注意事项：每一支吸管只能用于一个稀释 度，样品混匀处理，倾注平板时的培养基温 度； • ★适用范围：中温、好氧和兼性厌氧、能在 营养琼脂上生长的微生物， • ★误差：多次稀释造成的误差是主要来源， 其次还有由于样品内菌体分布不均匀、以及 不当操作
• ★技术要求：样品充分混匀，操作熟练快速 （15~20min完成操作），严格无菌操作； • ★注意事项：每一支吸管只能用于一个稀释 度，样品混匀处理，倾注平板时的培养基温 度； • ★适用范围：中温、好氧和兼性厌氧、能在 营养琼脂上生长的微生物， • ★误差：多次稀释造成的误差是主要来源， 其次还有由于样品内菌体分布不均匀、以及 不当操作
（二）血球计数板法
（二）血球计数板法
• 原理：将1cm2×0.1mm的薄层空间划分为400 小格，从中均匀分布地选取80或100小格，计 数其中的细胞数目，换算成单位体积中的细 胞数。 • 适用范围：个体较大细胞或颗粒，如血球、 酵母菌等。不适用于细菌等个体较小的细胞， 因为（1）细菌细胞太小，不易沉降；（2） 在油镜下看不清网格线，超出油镜工作距离。 • 特点：简便、直接、快速、准确，对酵母菌 可同时测定出芽率，或在菌悬液中加入少量 美蓝可以区分死活细胞
• 原理：将1cm2×0.1mm的薄层空间划分为400 小格，从中均匀分布地选取80或100小格，计 数其中的细胞数目，换算成单位体积中的细 胞数。 • 适用范围：个体较大细胞或颗粒，如血球、 酵母菌等。不适用于细菌等个体较小的细胞， 因为（1）细菌细胞太小，不易沉降；（2） 在油镜下看不清网格线，超出油镜工作距离。 • 特点：简便、直接、快速、准确，对酵母菌 可同时测定出芽率，或在菌悬液中加入少量 美蓝可以区分死活细胞
（三）称干重 ⚫ 将一定量的菌液中的菌体通过离心法或 过滤法分离出来，然后烘干(干燥温度 可采用105℃、100℃或80℃)、称重。 一般干重为湿重的10%～20%，而一个 细菌细胞一般重约10-12～10-13g。 ⚫ 这种方法较适合于丝状微生物的生长量 的测定，对于细菌来说，一般在实验室 或生产实践中较少使用
（三）称干重 ⚫ 将一定量的菌液中的菌体通过离心法或 过滤法分离出来，然后烘干(干燥温度 可采用105℃、100℃或80℃)、称重。 一般干重为湿重的10%～20%，而一个 细菌细胞一般重约10-12～10-13g。 ⚫ 这种方法较适合于丝状微生物的生长量 的测定，对于细菌来说，一般在实验室 或生产实践中较少使用
（四）比浊法 • 原理是在一定范围内，菌悬液中的细胞 浓度与混浊度成正比，即与光密度成正 比，菌数越多，光密度越大。因此，借 助于分光光度计，在一定波长下测定菌 悬液的光密度，就可反应出菌液的浓度。 这种方法的特点是快速、简便；但易受 干扰
（四）比浊法 • 原理是在一定范围内，菌悬液中的细胞 浓度与混浊度成正比，即与光密度成正 比，菌数越多，光密度越大。因此，借 助于分光光度计，在一定波长下测定菌 悬液的光密度，就可反应出菌液的浓度。 这种方法的特点是快速、简便；但易受 干扰